貯藏條件對(duì)麻瘋樹(shù)花粉生活力的影響

摘要：以四年生麻瘋樹(shù)（Ｊａｔｒｏｐｈａ ｃｕｒｃａｓ Ｌ.）花粉為試驗(yàn)材料，研究不同發(fā)育階段和不同保存條件對(duì)花粉生活力的影響，以期為麻瘋樹(shù)的遠(yuǎn)距離雜交提供一定的理論依據(jù)。研究結(jié)果表明，麻瘋樹(shù)新鮮花粉的生活力均為１００％，隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，花粉生活力呈下降趨勢(shì)；相同保存條件下，發(fā)育階段不同的花粉生活力差異不顯著；相同發(fā)育階段的花粉，貯藏方法不同，花粉生活力存在極顯著的差異；麻瘋樹(shù)花粉生活力以冷凍（－２０℃）貯藏方法處理的最高，冷藏（２℃）處理次之，高溫貯藏花粉生活力下降最快。

關(guān)鍵詞：麻瘋樹(shù)（Ｊａｔｒｏｐｈａ ｃｕｒｃａｓ）；花粉生活力；貯藏條件

中圖分類號(hào)：Ｓ７９４．９；Ｑ９４４．４２ 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ文章編號(hào)：0439－８114（２０11）18－3761-03

Effects of Storage Condition on Jatropha curcas Pollen Viability

ＰＵ Ｇｕａｎｇ－ｌａｎ１，ＺＨＯＵ Ｌａｎ－ｙｉｎｇ１，ＪＩＡ Ｑｉ－ｋｕｎ１，ＳＨＥＮ Ｊｉｅ２

（１．Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｓｉｃｈｕａｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｙａ＇ａｎ ６２５０１４， Ｓｉｃｈｕａｎ， Ｃｈｉｎａ；

２． Ｐａｎｚｈｉｈｕａ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ａｎｄ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｐａｎｚｈｉｈｕａ ６１７０６１， Ｓｉｃｈｕａｎ， Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｗａｓ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｐｏｌｌｅｎｓ ｏｆ ４－ｙｅａｒ－ｏｌｄ Ｊａｔｒｏｐｈａ ｃｕｒｃａｓ Ｌ． ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ ｓｔａｇｅ ａｎｄ ｓｔｏｒａｇｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｎ ｐｏｌｌｅｎ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ showed that ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｆｒｅｓｈ ｐｏｌｌｅｎ ｗａｓ １００％， ａｎｄ ｐｏｌｌｅｎ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｄｅｃｌｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｔｉｍｅ ｐｒｏｌｏｎｇｉｎｇ. Ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｏｆ ｐｏｌｌｅｎ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｗａｓ ｎoｔ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ ｓｔａｇｅｓ， however， ｉｔ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｕｎｄｅｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｔｏｒａｇｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ. Storaging ｐｏｌｌｅｎ ｕｎｄｅｒ －２０ ℃ ｗａｓ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｔｅｍｐｒｅｔｕｒｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ followed by ｕｎｄｅｒ ２ ℃ ｏｆ ｃｏｌｄ ｓｔｏｒａｇｅ． Ｐｏｌｌｅｎ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｄｅｃｌｉｎｅｄ ｑｕｉｃｋｌｙ ｕｎｄｅｒ ｈｉｇｈ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｊａｔｒｏｐｈａ ｃｕｒｃａｓ Ｌ．； ｐｏｌｌｅｎ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ； ｓｔｏｒａｇｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ

麻瘋樹(shù)（Ｊａｔｒｏｐｈａ ｃｕｒｃａｓ Ｌ．）又名小桐子、假花生、亮桐、臭油桐等，系大戟科（Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｃｅａｅ）麻瘋樹(shù)屬（Ｊａｔｒｏｐｈａ Ｌ．）植物，起源于中美洲北部，在我國(guó)主要分布于西南干熱河谷，以云南省的分布面積最大，資源數(shù)量最多；四川省次之［１］。麻瘋樹(shù)的根、葉、樹(shù)皮和種子均可入藥，具有涼血止血、散瘀消腫、斂瘡止癢等功效，可治療跌打腫痛、骨折、創(chuàng)傷、皮膚瘙癢、濕疹、急性胃腸炎等病癥［２］。其枝葉提取物能有效抑制單純皰疹病毒的增殖，有強(qiáng)效的殺菌作用和對(duì)流感病毒顯著的直接滅活作用［３］，還能抵抗ＨＩＶ病毒［４］。和麗萍［５］等人從麻瘋樹(shù)的葉、皮、種子揮發(fā)性物質(zhì)中均檢測(cè)出多種化學(xué)成分，它們以酮、酯、脂肪類、萜類、甾醇類、有機(jī)酸類、烷烴等化合物為主。其中，麻瘋樹(shù)主要活性成分之一的二萜類，在抗腫瘤和治療老年癡呆癥方面具有良好的作用［６］。因此，麻瘋樹(shù)在植物源農(nóng)藥、醫(yī)藥開(kāi)發(fā)等方面極具開(kāi)發(fā)利用價(jià)值。然而，大多數(shù)麻瘋樹(shù)處于野生或半野生狀態(tài)，品質(zhì)和產(chǎn)量問(wèn)題一直是制約其發(fā)展的瓶頸。雜交育種是提高麻風(fēng)樹(shù)產(chǎn)量、改良品質(zhì)的重要手段，而雜交親本的花粉生活力高低直接影響到育種成效。迄今為止，有關(guān)麻瘋樹(shù)栽培管理方面的研究較多［７，８］，雜交育種方面僅見(jiàn)張麗等［９］探討了麻瘋樹(shù)的雜交授粉技術(shù)，不過(guò)筆者尚未見(jiàn)有麻瘋樹(shù)花粉生活力研究方面的報(bào)道。為探索麻瘋樹(shù)花粉貯藏的適宜方法，使花粉具有較高生活力，試驗(yàn)對(duì)麻瘋樹(shù)新鮮花粉和各種貯藏條件下花粉生活力進(jìn)行了測(cè)定，旨在為確保麻瘋樹(shù)遠(yuǎn)距離雜交成功提供技術(shù)支撐，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

１材料與方法

為防止單花發(fā)育差異而導(dǎo)致花粉生活力的不同，從１０株四年生麻瘋樹(shù)樣株上采摘待開(kāi)和盛開(kāi)的單花雄花。將待開(kāi)的單花盛于２個(gè)無(wú)菌的小瓶中，作好標(biāo)記，分別設(shè)置室溫（２５ ℃）貯藏和冷藏

（２ ℃）２個(gè)處理；將盛開(kāi)的單花盛裝在４個(gè)無(wú)菌的小瓶中，分別設(shè)置室溫貯藏（２５ ℃）、冷藏（２ ℃）、冷凍

（－２０ ℃）、人工模擬原產(chǎn)地溫度（３６ ℃）４個(gè)處理。從采摘當(dāng)天開(kāi)始，每天測(cè)定花粉生活力，直至生活力完全喪失為止。花粉生活力測(cè)定采用α－萘酚－聯(lián)苯胺法，計(jì)算公式為：

R=（yi / xi）×100%

式中，Ｒ為花粉生活力，ｙｉ為各視野中花粉粒數(shù)，ｘｉ為各視野中花粉總粒數(shù)。數(shù)據(jù)處理應(yīng)用Ｅｘｃｅｌ ２００３軟件進(jìn)行，并采用新復(fù)極差測(cè)驗(yàn)（ＳＳＲ）進(jìn)行多重比較分析。

２結(jié)果與分析

２．１室溫保存的花粉生活力

室溫（２５ ℃）貯藏處理麻瘋樹(shù)花粉生活力的動(dòng)態(tài)測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖１，由圖１可知，麻瘋樹(shù)新鮮花粉生活力均為１００％，表明麻瘋樹(shù)花粉具有較強(qiáng)的生活力。在室溫條件下，常溫待開(kāi)和常溫盛開(kāi)２種單花的花粉生活力均隨貯藏時(shí)間延長(zhǎng)而呈下降趨勢(shì)，前５ ｄ下降速度緩慢，第五天后花粉生活力急劇下降；貯藏８ ｄ時(shí)，盛開(kāi)單花的花粉生活力低于５０％，待開(kāi)單花于室溫貯藏１１ ｄ后，其花粉生活力低于５０％；１６ ｄ后花粉生活力均完全喪失。從圖１還可以看出，待開(kāi)單花的花粉生活力較盛開(kāi)單花的花粉生活力略高。方差分析結(jié)果表明，麻瘋樹(shù)常溫待開(kāi)和常溫盛開(kāi)２種單花的花粉在生活力上差異不顯著。因此，在人工收集、保存和使用麻瘋樹(shù)花粉時(shí)，采集即將開(kāi)放或已盛開(kāi)的雄花均可。

２．２冷藏保存的花粉生活力

冷藏（２ ℃）處理麻瘋樹(shù)花粉生活力的動(dòng)態(tài)測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖２，由圖２可知，冷藏條件下，麻瘋樹(shù)花粉保存７ ｄ內(nèi)其生活力仍較高（≥６０％），而后花粉生活力下降速度加快；冷藏１４ ｄ時(shí)，花粉生活力低于５０％；１６ ｄ后下降速度減慢，直至３２ ｄ后花粉完全失活，此時(shí)部分花粉發(fā)生形態(tài)上和體積的改變。此外，待開(kāi)單花的花粉生活力較盛開(kāi)單花的花粉生活力略高。冷藏處理的麻瘋樹(shù)花粉生活力的方差分析結(jié)果見(jiàn)表１，從表１可見(jiàn)，２種花粉的生活力差異不顯著。

對(duì)室溫和冷藏條件下分別保存的２種單花花粉生活力，以保存時(shí)間和保存方法分別進(jìn)行雙因素方差分析，結(jié)果見(jiàn)表２，從表2可見(jiàn)，花粉無(wú)論來(lái)源于待開(kāi)單花還是盛開(kāi)單花，同樣保存方法下，不同保存時(shí)間花粉生活力呈現(xiàn)極顯著的差異（Ｆ待開(kāi)＝２２．１５＞Ｆ０．０１＝３．５２；Ｆ盛開(kāi)＝１２．３２＞Ｆ０．０１＝３．５２）；在保存時(shí)間相同的情況下，不同保存方法花粉生活力的差異也達(dá)到了極顯著水平（Ｆ待開(kāi)＝１５．５０＞Ｆ０．０１＝８．６８；Ｆ盛開(kāi)＝１２．９４＞Ｆ０．０１＝８．６８）。由此得出，與常溫保存相比，冷藏能有效地延長(zhǎng)麻瘋樹(shù)花粉的保存時(shí)間。

２．３模擬原產(chǎn)地自然溫度環(huán)境的花粉生活力

人工模擬麻風(fēng)樹(shù)原產(chǎn)地自然溫度（３６ ℃）條件進(jìn)行花粉貯藏處理，麻瘋樹(shù)盛開(kāi)單花花粉生活力的動(dòng)態(tài)測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖３，由圖３可知，隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，花粉生活力急速下降，第二天花粉生活力低于４０％，第六天花粉完全失活。可見(jiàn)，過(guò)高的溫度對(duì)保持花粉生活力極為不利。在麻瘋樹(shù)原產(chǎn)地，盛花期期間白天氣溫多在３６ ℃以上，如不具備冷藏條件，花粉應(yīng)現(xiàn)采現(xiàn)用，不宜過(guò)夜。

２．４冷凍保存的花粉生活力

冷凍（－２０ ℃）處理麻瘋樹(shù)花粉生活力的動(dòng)態(tài)測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖４，從圖４可知，冷凍處理下麻瘋樹(shù)盛開(kāi)的單花花粉生活力下降較慢，保存時(shí)間明顯延長(zhǎng)，貯藏４４ ｄ時(shí)，麻瘋樹(shù)盛開(kāi)單花花粉生活力仍可保持在８０％以上；冷凍貯藏４４ ｄ后，麻瘋樹(shù)盛開(kāi)單花花粉生活力下降速度加快；當(dāng)貯藏６３ ｄ后，麻瘋樹(shù)盛開(kāi)單花花粉生活力在６０％左右。

３小結(jié)與討論

研究結(jié)果表明，發(fā)育期不同的麻瘋樹(shù)單花花粉，在相同保存條件下花粉生活力差異不顯著；在不同保存條件下，發(fā)育階段一致的單花花粉生活力差異較大，溫度越低，保存時(shí)間越久，這與王兵益等［１０］、張亞利等［１１］、袁德義等［１２］的研究結(jié)果一致。冷凍條件下花粉貯藏２個(gè)月還有較高的生活力，可見(jiàn)溫度是影響花粉貯藏效果的主要因素，低溫有利于花粉貯藏，這與徐剛標(biāo)等［１３］、李景欣等［１４］的研究結(jié)論一致。由此我們認(rèn)為，在生產(chǎn)實(shí)踐中，人工收集、保存和使用麻瘋樹(shù)花粉時(shí)，采集待開(kāi)或盛開(kāi)的雄花均可，并根據(jù)實(shí)際需要選擇貯藏方法。雜交過(guò)程中花粉應(yīng)存放在冰箱內(nèi)；在不能使用冰箱的山區(qū)或野外，可以用存有冰塊的冰壺、保溫箱等簡(jiǎn)單設(shè)備冷藏花粉，既降低成本、也能在一定時(shí)間內(nèi)保持花粉的生活力，以確保雜交效率。在麻瘋樹(shù)雜交工作中，一般采用生活力不低于新鮮花粉生活力５０％的花粉進(jìn)行授粉。本試驗(yàn)證明，在麻瘋樹(shù)原產(chǎn)地，如不具備冷藏條件，花粉應(yīng)現(xiàn)采現(xiàn)用，不能過(guò)夜；室溫條件下（２５ ℃），花粉在１周之內(nèi)可用于授粉；冷藏條件下（２ ℃），花粉在２周之內(nèi)可用于授粉；冷凍條件下，花粉雖在２個(gè)月內(nèi)還有較高的生活力，但對(duì)花粉萌發(fā)和花粉管的生長(zhǎng)是否有影響還需要進(jìn)一步驗(yàn)證，故而在雜交中應(yīng)慎用。

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