碎米果鎮痛抗炎的實驗研究

　　摘 要：目的：觀察碎米果水煎液的鎮痛、抗炎作用。方法：鎮痛實驗采用小鼠熱板法、光熱刺激法、醋酸致痛扭體法等實驗方法；抗炎實驗采用二甲苯所致小鼠耳腫脹方法及二甲苯所致小鼠皮膚毛細血管通透性增高的方法。結果：碎米果水煎液對小鼠熱刺激致痛、光熱刺激致痛及注入醋酸致痛均有抑制作用，還能降低二甲苯所致小鼠耳腫脹度及皮膚毛細血管通透性。結論：碎米果水煎液有一定鎮痛、抗炎作用。
　　關鍵詞：碎米果；鎮痛；抗炎；實驗研究
　　中圖分類號：R285.5文獻標識碼：A
　　文章編號：1007-2349（2011）05-0063-02
　　
　　碎米果又名牙痛草、碎米棵、大紅袍、小鐵子，為紫金牛科植物小鐵仔（Myrsine africana L.）的全株。生于海拔1100~3600 m的山間、林下、路邊、山坡、灌木叢中。全年可采挖，洗凈切片曬干^［1］。本品甘、淡，涼^［2］。具有祛風止痛、清熱利濕、收斂止血的功效。主治風濕疼痛、牙痛、泄瀉、痢疾、血崩、便血、肺結核咳血等^［3］。《貴州民間藥物》記載：“驅風濕，活血，治痢疾。”《云南中草藥》記載：消炎，止痛，止痢。治牙痛，腸炎，痢疾。內服：煎湯，0.3～1兩，燉肉或浸酒。治痢疾：大紅袍、仙鶴草根各一兩，煎水服。治風濕：大紅袍五錢，大風藤、追風散各三錢，紅禾麻二錢，泡酒一斤。日服二次，每次五錢至一兩。治紅淋：大紅袍三至五錢。煎水服。（選方出《貴州民間藥物》）。閉經：大紅袍1～2兩，紅糖適量，水煎分3次服。痛經：大紅袍、丹參、香附各3錢，小茴香根1錢，水煎服。外用治黃水瘡，燒燙傷，鮮根烤出汁搽患處。經文獻查閱，對碎米果的現代研究較少。根據其功效和主治，擬進行碎米果水煎液鎮痛、抗炎方面的初步研究，為其臨床應用提供藥效學依據。
　　1 實驗材料
　　1.1 實驗動物 昆明種小白鼠，體重18~22 g，雌雄兼有，由四川省醫學科學院實驗動物研究所提供，生產許可證號：SCXK（川）2004-16。
　　1.2 藥物 碎米果采自昆明小墨雨一帶山上，由云南中醫學院錢子剛教授鑒定。碎米果藥材先浸泡30 min，再煎煮3次，每次30 min，過濾合并3次藥液，水浴濃縮至2 g生藥/ mL的藥液。元胡止痛片（廣西半宇天龍制藥有限公司，產品批號060801）；阿司匹林（昆明云健制藥有限公司，生產批號20051195）。各藥給藥劑量均按臨床等效劑量換算。
　　1.3 試劑及主要儀器
　　1.3.1 試劑 所用試劑按實驗要求均為市售化學純或分析純試劑。
　　1.3.2 主要儀器 RB-200智能熱板儀（成都泰盟科技有限公司）；SW-200光熱尾痛測試儀（成都泰盟科技有限公司）；756型紫外可見分光光度計（上海光譜儀器有限公司）。
　　1.4 統計學方法 實驗數據以（Ax-G ±s ）表示，計量資料用方差分析，非計量資料用非參數檢驗。
　　2 方法
　　2.1 鎮痛實驗
　　2.1.1 熱板法^［4］ 取18~22 g雌性小鼠，將熱板測痛儀預熱至55 ℃，測定小鼠的痛閾值（即痛反應潛伏期，指小鼠接觸熱板至舔后足的時間）。痛反應在5~30 s內為合格鼠，取2次正常痛閾平均值，作為該鼠給藥前痛閾值。將合格小鼠隨機分為4組，分組及給藥劑量如表1所示，連續灌胃6 d，于末次給藥后30、60、90、120、180min分別測量小鼠痛閾值，以60 s為限，以免燙傷小鼠。
　　2.1.2 甩尾法^［4］ 取18~22 g小鼠56只，雌雄各半，將小鼠置鼠筒中，尾自然下垂于筒外，以啟動光熱至鼠尾急速擺動的時間為鼠尾潛伏期痛閾值，調整刺激強度使基礎痛閾值（給藥前痛閾值）為5 s左右，記錄其給藥前痛閾值，按表2所示分組及給藥，小鼠連續灌胃7 d，于末次給藥后30 min測其痛閾，照射時間以10 s為限，以免燙傷小鼠。記錄各組動物給藥后痛閾值，并與給藥前作比較。
　　2.1.3 扭體法^［4］ 選用體重18~22 g的小鼠56只，按表3所示分組及給藥，連續灌胃6 d后，于末次給藥后1 h，每鼠腹腔注射0.5%冰醋酸0.2 mL/只，記錄注射醋酸后15 min內各鼠扭體出現的時間和扭體次數。
　　2.2 抗炎實驗
　　2.2.1 對二甲苯所致小鼠耳腫脹及免疫器官重量的影響^［4］ 取18~22 g小鼠，隨機分為4組，每組14只，給藥劑量如表4所示。連續灌胃7 d，于末次給藥后30 min，各小鼠右耳涂二甲苯30 μL，1 h后將小鼠頸椎脫臼處死，剪下左右耳廓，用打孔器打下直徑7 mm的耳片，稱重，計算腫脹率；將取耳后的小鼠迅速打開胸腔、腹腔，取出胸腺、脾臟，用電子天平稱其鮮重并計算胸腺指數和脾臟指數。
　　腫脹率=右耳重-左耳重左耳重×100%胸腺（脾臟）指數=胸腺（脾臟）重量/g體重/g×10
　　2.2.2 對二甲苯所致小鼠皮膚毛細血管通透性的影響^［4］ 取18~22 g小鼠56只，隨機分為4組，分組及給藥劑量如表5所示。連續灌胃7 d，于第6 d將小鼠腹部正中位去毛，第7 d末次給藥后60 min，各小鼠尾靜脈注射0.5%伊文思蘭生理鹽水溶液0.2 mL/只，隨即于小鼠腹部去毛皮膚上滴二甲苯30 μL/只，30 min后小鼠頸椎脫臼處死，剝下染藍腹部皮膚，用打孔器打下兩塊直徑7㎜的染藍皮膚，放入有塞玻璃試管內。在每個試管內加入丙酮：生理鹽水＝7：3的混合溶液5 mL，置37 ℃的恒溫箱中孵化36 h。2000 r/min離心10 min，取上清液，于610 nm處比色測定吸光度，以空白丙酮生理鹽水校零。
　　3 實驗結果
　　3.1 鎮痛實驗
　　3.1.1 熱板法對小鼠熱刺激致痛的影響 見表1。
　　結果表明：與空白對照組比較，高劑量組在90 min和120 min時能提高小鼠熱刺激致痛反應的痛域值，差異有非常顯著性意義（P<0.01）；低劑量僅在90 min提高小鼠熱刺激致痛反應的痛域值，差異有非常顯著性意義（P<0.01），但2組均不如元胡止痛對照組。
　　3.1.2 甩尾法對小鼠光熱刺激致痛的影響 見表2。
　　結果表明：與空白對照組比較，各給藥組均能提高小鼠光熱刺激致痛反應痛域值，差異有非常顯著性意義（P<0.01）。
　　3.1.3 扭體法對小鼠醋酸致痛的影響 見表3。
　　結果表明：與空白對照組比較，元胡止痛組與碎米果水煎液高劑量組均能減少醋酸所致小鼠扭體次數，并延長扭體反應出現時間，差異有非常顯著性意義（P<0.01）；低劑量組能減少小鼠扭體次數，差異有顯著性意義（P<0.05）。
　　3.2 抗炎實驗
　　3.2.1 對二甲苯所致小鼠耳腫脹及免疫器官重量的影響 見表4。
　　結果表明：與空白對照組比較，各給藥組均能降低二甲苯所致小鼠耳廓腫脹率和脾臟指數，差異有非常顯著性意義（P<0.01）。對胸腺指數有下降趨勢，但無顯著性差異。
　　3.2.2 對二甲苯所致小鼠皮膚毛細血管通透性的影響 見表5。
　　結果表明：與空白對照組比較，各給藥組均能降低小鼠皮膚毛細血管通透性，差異有非常顯著性意義（P<0.01）。
　　4 討論
　　碎米果主產于云南、四川、貴州等省，具有祛風止痛、清熱利濕、收斂止血的功效，主治風濕疼痛、牙痛、泄瀉、痢疾、血崩、便血、肺結核咳血等癥。本實驗對其進行了抗炎、鎮痛實驗，實驗結果表明，碎米果能提高小鼠熱刺激致痛反應及小鼠光熱刺激致痛反應的痛域值，并減少醋酸所致小鼠扭體反應的扭體次數；對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹有明顯的抑制作用，降低小鼠皮膚毛細血管通透性。說明碎米果有較好的鎮痛、抗炎作用，為其臨床應用提供了理論依據。
　　
　　參考文獻：
　　［1］詹文濤.臨床常用中草藥［M］.昆明：云南科技出版社，1996：88~89.
　　［2］黃泰康.中藥辭海［M］.北京：中國醫藥科技出版社，1993：281~282.
　　［3］國家中醫藥管理局《中華本草》編委會.中華本草［M］.上海：上海科技出版社，1999：82~83.
　　［4］陳奇.中藥藥理學實驗方法學［M］.北京：人民衛生出版社，1993：362~377.
　　（收稿日期：2010-12-15）