中藥復方柴花顆粒劑的制備工藝優化

馮文杰 陸 曉

(南京市玄武區中醫院，江蘇 南京 210018）

中藥復方柴花顆粒劑的制備工藝優化

馮文杰 陸 曉

(南京市玄武區中醫院，江蘇 南京 210018）

目的優化中藥復方柴花顆粒劑的制備工藝參數。方法考察中藥復方柴花顆粒劑工藝各步驟（提取、濃縮、干燥過程中）綠原酸含量變化，對主要工藝參數進行優化選擇，采用高效液相色譜法分析測定樣品含量。結果采用優化后的提取制備工藝制得中藥柴花顆粒，測得其中綠原酸含量高于1.60 mg?g-1，比工藝優化之前含量提高約50%。結論中藥復方柴花顆粒的制備工藝優化有效提高了其指標成分的含量，制劑質量得到加強。

柴花顆粒劑；綠原酸；制備工藝優化

中藥復方柴花顆粒劑是由臨床有效方研制的現代中藥復方醫院制劑，由柴胡金銀花連翹等八味中藥組成。該顆粒的主要功效是清熱解毒，用于外感發熱、咽紅腫痛、咳嗽等病癥。綠原酸是復方中藥材金銀花中的主要活性成分，是由咖啡酸與奎尼酸組成的縮酚酸，屬于苯丙素類化合物，其具有廣泛的生物活性[1,2]，如抗菌、抗病毒、消炎解熱、利膽保肝、抗脂質過氧化，因此常作為生藥和一些中藥成方制劑質量控制的指標性成分。由于其分子結構不穩定，提取時不能高溫、強光及長時間加熱[3]。本研究在充分結合綠原酸理化性質的基礎上，經試驗考察中藥柴花顆粒的提取制備工藝，確定保證含量合理的關鍵步驟，通過制備工藝的優化以提高指標成分的含量，保證該顆粒的質量。

1 材 料

Agilent 1200高效液相色譜儀，包括在線脫氣機、四元泵、自動進樣器、DAD檢測器（Agilent公司）；AL204分析天平（METTLER TOLEDO公司）；KQ-250DE數控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；R-210旋轉蒸發儀（BUCHI公司）；TGL-16G離心機（上海安亭科學儀器廠）；綠原酸對照品（批號0753-9910，中國藥品生物制品檢定所）；乙腈，磷酸為色譜純；水為純化水；其余試劑均為分析純；處方組成中八味中藥（南京市藥材公司）。

2 方法與結果

2.1 制備工藝考察

2.1.1 色譜條件[4-6]

色譜柱：Alltima C18（250 mm×4.6 mm，5μm）；流動相：乙腈-0.4%磷酸水溶液（12∶88）；檢測波長：327 nm；流速：1.0mL/min；柱溫：30 ℃；進樣量：10μL。理論塔板數按綠原酸峰計算不低于5000。

2.1.2 對照品溶液配制

精密稱取綠原酸對照品適量，置棕色量瓶中，用50%甲醇超聲溶解并定容，配成質量濃度為0.0482mg/mL的溶液，即得。

2.1.3 標準曲線的制備

分別精密吸取綠原酸對照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL于10mL棕色量瓶中，用50%甲醇定容至刻度，搖勻，分別進樣10μL，記錄峰面積。以峰面積和進樣濃度求得回歸方程：A=24.364X+3.2786，r=0.999 8。在4.82～28.92 μg?mL-1的范圍內，其濃度與色譜峰面積呈良好的線性關系。

2.1.4 精密度試驗

精密吸取同一供試品溶液10μL，按上述色譜條件進樣，平行測定6次，記錄峰面積。其相對標準偏差RSD為0.40%，說明儀器精密度良好。

2.1.5 供試品溶液制備

按照中藥復方柴花顆粒劑的制法工藝制備成顆粒成品，分別于水煎提取后（煎煮液）、濃縮后（浸膏）、干燥后（顆粒成品）取樣[分別為5mL，5g，5g]，用50%甲醇溶解定容，制得供試品溶液。

2.1.6 供試液含量測定

精密吸取上述對照品及供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測定。計算結果見表1，損失比例指后一步測得量相比前一步驟綠原酸的下降比例。

表1 各工序中綠原酸的含量

2.1.7 工藝考察結果

上述試驗表明，工藝過程中濃縮、烘干步驟均導致綠原酸含量的損失和下降。其中，濃縮步驟對綠原酸含量的影響最大，損失比例在50%以上，干燥步驟含量下降的幅度稍輕。此外，筆者在相同色譜條件下測定了金銀花藥材中綠原酸含量，經與煎煮提取液中綠原酸含量比較表明，提取率在45%～60%之間，反映原工藝提取率偏低也是導致成品中綠原酸含量低的重要原因之一。

2.2 制備工藝優化

[7]并結合上述工藝考察結果，在充分尊重實際生產條件、不改變基本工藝過程的前提下，我們對提取用溶劑量（用水量）、提取時間、濃縮溫度三個因素進行優化研究，篩選出合理且具有可操作性的最佳工藝參數。

2.2.1 用水量的考察

取相當于中藥復方柴花顆粒劑1/20處方量的八味藥材，每味藥材稱取三份，按處方比例均勻混合，編號1、2、3。分別按10+8倍量（第一次10倍，第二次8倍），8+6倍量，7+5倍量加水煎煮兩次，每次1.5 h；提取液濃縮至相同水平時（接近7+5倍量所得水提液），分別取樣，測定其中綠原酸含量，比較加水量對綠原酸提取率的影響，結果見表2。[加溫濃縮過程是綠原酸損失的原因之一]

表2 水量對綠原酸提取率的影響

2.2.2 煎煮提取時間的考察

取相當于中藥復方柴花顆粒劑1/20處方量的八味藥材，每味藥材稱取三份，按處方比例均勻混合，編號1、2、3。均分別加入7+5倍量加水煎煮兩次；1號每次各煎煮0.5 h，2號每次1.0 h，3號每次1.5 h。合并提取液并稱重，分別取樣測定其綠原酸含量，結果見表3。

表3 煎煮時間對綠原酸提取率的影響

2.2.3 濃縮溫度的考察

將“2.2.2項”下所得三份提取液合并后，平均分成3份，每份580.0 g，分別采用100 ℃常壓敞口濃縮、80 ℃和60 ℃減壓濃縮至相同水平（65+5g），比較濃縮前后綠原酸含量的變化以確定最佳濃縮溫度，結果見表4。

表4 濃縮溫度對綠原酸含量的影響

2.2.4 工藝參數確定

由試驗結果得中藥柴花顆粒劑最佳制備工藝參數為：①用水量：相當于藥材總量7+5倍，綠原酸得率最佳；②煎煮時間及次數：煎煮兩次，每次0.5h；③最佳濃縮溫度為80 ℃，該溫度下綠原酸損失最小。

2.2.5 樣品制備及含量測定

按優化后的工藝方法制備中藥復方柴花顆粒，取本品顆粒，研細，取約0.25g，每批樣品各2份，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇25mL，密塞，稱定重量，超聲處理30min；放冷，再稱定重量，用50%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，濾液用0.45μm微孔濾膜濾過。分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，記錄峰面積，以外標法計算樣品中綠原酸的含量，結果見表5。

表5 不同批次樣品的綠原酸含量

3 討 論

本實驗工藝考察結果表明，濃縮工藝使綠原酸含量下降明顯，由于兩批次在用水量（前者用水量較高）和濃縮溫度上有一定差異（后者濃縮溫度稍低），故提取總量和含量下降的比例也有一定程度的浮動。工藝優化步驟中相關參數的設置盡可能地貼近實際生產需要，如用水量的設置為（10+8）、（8+6）、（7+5），主要是從避免濃縮時間延長致含量降低和節約能源的角度考慮的。

由含量測定結果可知，采用優化后的工藝所制得的中藥復方柴花顆粒，其指標成分綠原酸含量顯著提高（≥1.60mg/g），比工藝優化之前含量提高約50%。表明通過制備工藝的優化，提高生藥材中綠原酸的提取率，減少綠原酸在受熱過程中的損失率，確保了成品中有效成分含量，進而保證了該顆粒的制劑質量。

參考文獻

[1]鄧良,袁華,喻宗沅.綠原酸的研究進展[J].化學與生物工程,2005,4(7):4-6.

[2]吳衛華,康楨,歐陽冬生,等.綠原酸的藥理學研究進展[J].天然產物研究與開發,2006,18(3):691-694.

[3]黃紹重.綠原酸的提取及應用[J].應用化工,2006,35(6):467-469.

[4]楊剛,杜守穎,吳清,等.HPLC法測定忍冬藤中綠原酸及咖啡酸含量[J].中國藥品標準,2004,5(4):47-50.

[5]熊茉君,毛興榮,張敏,等.HPLC測定柔肝解毒膠囊中的綠原酸[J].華西藥學雜志,2010,25(6):746-747.

[6]國家藥典委員會.中國藥典.一部[S].北京:中國醫藥科技出版社,2010:205.

[7]林丹,趙國玲,劉佳佳.金銀花不同提取方法的綠原酸比較研究[J].天然產物研究與開發,2003,15(2):124-126.

Optimization of the Preparation Technology for Chaihua Granules

FENG Wen-jie, LU Xiao
(Nanjing Traditional Chinese Medicine Hospital, Nanjing 210018, China)

ObjectiveTo establish an appropriate preparation technology for Jinchai granules.MethodsTo investigate the content of chlorogenic acid in the process steps (extraction, concentration and drying process) of Jinchai granules and optimize the main process parameters.The chlorogenic acid content of the samples were determined by high performance liquid chromatography.ResultsThe chlorogenic acid content of Jinchai granules in optimized preparation technology was higher than 1.60 mg?g-1 and increased by about 50% than the original process.ConclusionThe optimized preparation technology effectively improved the content of chlorogenic acid and the quality of preparation had been strengthened.

Jinchai granules; Chlorogenic acid;Optimum Preparation

R282.710.2

B

1671-8194（2011）28-0219-02