青藏龍膽對四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的保護作用

唐曉光

（赤峰學院 醫學院，內蒙古 赤峰 024000）

青藏龍膽對四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的保護作用

唐曉光

（赤峰學院 醫學院，內蒙古 赤峰 024000）

目的：探討不同劑量的青藏龍膽對CCl4所致的小鼠肝損傷的保護作用.方法：先采用青藏龍膽給藥，再采用CCl4所致的小鼠肝損傷模型，用賴氏法測定小鼠血清丙氨酸氨基轉移酶ALT含量,肝臟常規切片，觀察病理組織學改變.結果：不同劑量的青藏龍膽組血清ALT含量明顯低于CCl4組，鏡下病理顯示青藏龍膽對四氯化碳所致的小鼠急性化學性肝損傷有保護作用.

青藏龍膽；ALT；急性肝損傷

青藏龍膽（Flos Gentiance）系龍膽科龍膽屬植物，是青藏高原特有的藥用植物，目前資源尚未充分利用，該植物的帶根全草民間供藥用，其味苦，性寒，有清濕熱，瀉肝火，鎮咳，利喉，健胃等功效，主治感冒發燒，目赤咽痛，肺炎，咳嗽，胃炎，腦膜炎，氣管炎等.本實驗觀察青藏龍膽對CCl4所致小鼠急性肝損傷的保護作用.

1 材料和方法

1.1 藥品和試劑

青藏龍膽：購自青海省西寧市八一路藏藥市場，由中藥教研室魏全嘉教授鑒定.

藥用部位：水提取液，1g/ml.

ALT試劑盒：南京生物建成研究所操作嚴格按照試劑盒說明書進行四氯化碳：分析純，中國醫藥集團上?；瘜W試劑公司生產，批號W20051218

聯苯雙酯：聯苯雙酯片，25 mg/片，上海市醫藥股份有限公司天平制藥廠生產，批號248004

1.2 儀器

721紫外分光光度計；切片機；數碼照相顯微鏡

1.3 實驗性肝損傷模型制備

取ICR遠交系小鼠，雄性，體重（20±2），由青海省實驗動物中心提供，將實驗隨機分為4組，每組動物10只.A正常對照組，正常飼養，無外加條件，B CCl4肝損傷模型組，用生理鹽水0.2ml/20g小鼠灌胃，每天一次，連續10天.C青藏龍膽預防組，用青藏龍膽提取液0.2ml/20g小鼠灌胃，每天一次，連續10天.D聯苯雙酯片組：0.2ml/20g，連續10天，第11天進行CCl4所致實驗性肝損傷模型制備；將CCl4與植物油按1：9配制，正常組給予植物油0.2ml/20g，其余各組給予CCl4植物油溶液0.2ml/20g，24小時后，小鼠斷頭取血，分離血清待測，同時，取出各組小鼠肝臟，用10%的福爾馬林固定作病理切片.

1.4 血清相關酶學測定

1.4.1 血清肝功能酶ALT的測定

實驗結束時，每鼠斷頭取血，3000r/min離心15 min，分離血清，按照ALT試劑盒說明測定ALT活性.

1.4.2 肝病理組織學觀察

每鼠斷頭取血后，迅速摘取肝臟，取各鼠肝組織用百分之十甲醛固定，常規石蠟包埋，用切片機切片，片厚8um，HE常規染色，照相顯微鏡下觀察肝組織的病理變化及照相.

1.6 實驗組數據處理

統計學處理實驗數據用SPSS11.5統計軟件進行方差分析，采用±s表示

組別 鼠數 ALT正常組 A組 10 57.89±7.42模型組 B組 10 243.27±26.04青藏龍膽組 C組 10 184.92±13.74聯苯雙酯組 D組 10 157.76±6.67

說明：CCl4模型組小鼠血清ALT明顯高于正常組（P〈0.01），青藏龍膽組小鼠血清ALT明顯低于模型組，與模型組相比（P〈0.01）有顯著意義.聯苯雙酯組血清ALT與模型組相比明顯降低（P〈0.01），與模型組相比（P〈0.01）有顯著意義.聯苯雙酯組與青藏龍膽組比較明顯降低（P〈0.01）與青藏龍膽組有顯著意義.

2 結果

2.1 青藏龍膽對CCl4肝損傷小鼠血清ALT的影響

由表結果可以得出：模型組小鼠血清ALT明顯高于正常組表明對小鼠肝細胞造成嚴重損傷動物模型制備成功，青藏龍膽組的血清ALT明顯低于模型組，表明青藏龍膽對小鼠肝有保護作用.

2.2 肝組織的光鏡檢查

模型組；肝小葉邊界不清，肝小葉中心肝細胞氣球樣變，肝細胞體積增大，排列紊亂擁擠，除肝細胞變性和壞死外，匯管區可見輕度炎細胞浸潤.

青藏龍膽組：鏡下可見肝小葉結構完整，肝細胞圍繞中央靜脈呈放射狀排列，肝細胞大小正常，無變性和壞死.

模型組

青藏龍膽組

討論：（1）青藏龍但作為青藏高原特有的藥物，藏醫認為其味苦，性寒，有清濕熱，瀉肝火，鎮咳，利喉，健胃等功效，主治感冒發燒，目赤咽痛，肺炎，咳嗽，胃炎，腦膜炎，氣管炎等.民間一直將其作為抗肝炎的藥物使用，但其對肝臟損傷方面的治療還未見報道，為此我們選擇了此藥進行實驗.

（2）肝臟是體內重要的生物代謝功能器官，CCl4在肝臟產生三氯甲基自由基，啟動肝細胞膜肝微粒體膜脂質過氧化，使肝細胞受損.ALT主要分布于肝臟，肝臟正常時，血清中其含量較低，但肝炎，肝硬化，藥理中導致肝細胞壞死時，肝細胞通透性增加，使得血漿ALT含量升高.因此，ALT被認為是肝受損的敏感指標，本實驗我們觀察了青藏龍膽對CCl4誘發的小鼠肝損傷的作用.預處理青藏龍膽組血清ALT水平明顯減低（P＜0.01），結合病理切片檢查結果顯示，可以說明，青藏龍膽對CCl4所致小白鼠肝損傷具有保護作用，作用機理有待于進一步研究.

（3）根據實驗結果知，加大對青藏龍膽的開發進度，積極探索其治病機理，爭取其再抗肝炎方面的突破，將其開發成新藥，將是藏藥史上的一大創新.

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A

1673-260X（2011）03-0147-02