芍藥內酯苷抗抑郁作用的實驗研究

張建軍，王景霞，李偉，歐麗娜，陳振振，葛陽

白芍為毛茛科植物芍藥Paeonia lactiflora Pall.的根，味苦、酸，性微寒，歸肝、脾經。酸性收斂，有補血斂陰，柔肝緩急之功，因而白芍既能養肝血，又能柔肝體，最能順應肝之特性，為養血柔肝的代表[1]。《傅青主女科》在應用白芍的34證中，以白芍為君藥者12證，其病機以肝失條達，氣郁不舒為主。傅氏曾言: “病之在肝者，(白芍)尤不可不用。”肝性多郁，養血柔肝解郁，是白芍臨床應用的一個重要特色[2]。

白芍的主要成分為一組單萜苷類物質，包括芍藥苷（Paeoniflorin，PF）、芍藥內酯苷(albiflorin，AF)等，已有研究表明芍藥苷有多方面藥理活性[3～4]，而白芍另一主要成分芍藥內酯苷藥理作用的報道尚不多見。據報道，白芍水煎劑、乙醇提取物、總單萜苷以及芍藥苷有抗抑郁作用[5～9]。本文根據傳統中醫藥理論對白芍的認識，以及白芍的中醫臨床應用經驗和現代研究報道，對芍藥內酯苷進行抗抑郁作用的研究，以期進一步揭示白芍抗抑郁的有效成分。

1 實驗材料

1.1 實驗藥物

受試藥：芍藥內酯苷，自制，純度大于96%；陽性藥：鹽酸氟西汀（Fluoxetine, Prozac百憂解），禮來蘇州制藥有限公司，批號：A333341-070608。

1.2 實驗動物

ICR小鼠，雄性，體重18-22g。由維通利華動物實驗中心提供，合格證編號：SCXK（京）2007-0001。動物購入后，適應一周，常規飼養。

1.3 儀器

JZ100型100g張力換能器(高碑店市新航機電設備有限公司)，Medlab生物信號采集系統（南京易美科技有限公司），Sony數碼攝像機（上海索廣電子有限公司），XZC-1型小鼠自主活動儀（黑龍江省牡丹江市中華電器廠），秒表，玻璃缸。

2 實驗方法

2.1 分組和給藥

取正常小鼠100只，按隨機區組法分為5組，即空白組、百憂解組、芍藥內酯苷14、7、3.5mg/kg劑量組。各組均按0.2ml/l0g體重灌胃，空白組給去離子水。以上各組連續7天給藥，于末次給藥1h后進行實驗。

2.2 小鼠懸尾實驗[10]

將小鼠尾端(距尾尖2cm處)用膠布固定在100g張力換能器的連線上，使其呈倒懸狀態，頭部離實驗臺約15cm，換能器連接到Medlab生物信號采集系統，適應2min后，記錄4min內的不動時間(s)。

2.3 小鼠強迫游泳實驗[10]

將小鼠單個放入高20cm、直徑18cm、水深10cm、水溫23±2℃的水缸中，觀察6min，適應2min，記錄后4min內累計不動時間(s)。

2.4 對小鼠自主活動的影響[10]

將小鼠放入小鼠光電計數儀活動箱，適應環境10min后，觀察5min內小鼠的活動次數。每只小鼠測試完畢用濕布擦拭活動儀，清除糞便，繼用干布擦凈后再進行下一只小鼠的測試。

2.5 統計學處理

3 實驗結果

3.1 芍藥內酯苷對小鼠懸尾不動時間的影響

結果表明，給予芍藥內酯苷14，7mg/kg能明顯縮短小鼠懸尾不動時間，與空白組比較差異顯著（P<0.01，0.05）。見表1。

表1 芍藥內酯苷對小鼠懸尾不動時間的影響（）

表1 芍藥內酯苷對小鼠懸尾不動時間的影響（）

注：與空白組比較， ** P<0.01，* P<0.05

組別 劑量(mg/kg) n 不動時間（s）空白組 —— 20 64.92±54.620鹽酸氟西汀 3.5 20 30.15±44.888*芍藥內酯苷 14 20 27.45±34.097**7 20 33.65±43.762*3.5 20 44.85±59.695

3.2 芍藥內酯苷對小鼠強迫游泳不動時間的影響

結果顯示，芍藥內酯苷14，7mg/kg均能明顯縮短小鼠游泳不動時間，與空白組比較差異顯著（P<0.05），結果見表2。

表2 芍藥內酯苷對小鼠強迫游泳不動時間的影響（）

表2 芍藥內酯苷對小鼠強迫游泳不動時間的影響（）

注：與空白組比較， * P<0.05

組別 劑量(mg/kg) n 不動時間（s）空白組 —— 20 89.115±35.391鹽酸氟西汀 3.5 20 56.725±31.340*芍藥內酯苷 14 20 55.335±30.684*7 20 63.025±39.461*3.5 20 75.763±36.892

3.3 芍藥內酯苷對小鼠自主活動的影響

結果顯示，各劑量芍藥內酯苷對小鼠的自主活動無明顯影響( P > 0.01)，提示芍藥內酯苷無中樞興奮或抑制作用，結果見表3。

表3 芍藥內酯苷對小鼠自主活動的影響（）

表3 芍藥內酯苷對小鼠自主活動的影響（）

組別 劑量(mg/kg) n 活動次數空白組 —— 20 125.00±32.78鹽酸氟西汀 3.5 20 101.87±33.47芍藥內酯苷 14 20 101.27±43.43 7 20 102.20±34.48 3.5 20 107.13±20.55

4 討論

肝郁，中醫認為可引起情志疾病，與現代醫學的慢性心理應激（應激）一致，而應激可導致抑郁癥。應激損傷的病位主要在肝[11]。“肝體陰而用陽”，性剛而喜柔，肝之體以陰為養，以柔為生，藏血充足是疏泄正常的前提，因此，養血柔肝解郁至關重要。治肝大家王旭高體會“肝氣脹甚，疏之更甚者，當柔肝”。張山雷指出：“肝陰耗損之證，專事疏肝不獨無效，反增其燥傷陰血，柔可馭之。”葉天士云：“肝為剛臟，當濟之以柔藥”。解郁多用疏肝理氣法，但如果患者素秉陰虛之質，或郁久化熱傷陰者，即不可再用疏理，以疏理之藥多香燥，往往出現愈疏愈郁，而柔肝解郁法即為有效良法，白芍即為中醫應用該法的首選藥物。

本實驗采用小鼠抑郁動物模型對芍藥內酯苷進行研究，探討其抗抑郁作用。小鼠懸尾試驗和小鼠強迫游泳試驗為經典的抗抑郁小鼠實驗，具有簡單、敏感和可靠性較強的特點[12]，因此本研究首先采用這兩個模型結合小鼠自主活動實驗進行初步研究，結果表明芍藥內酯苷具有抗抑郁作用。

已有研究報道和本研究結果提示，白芍抗抑郁的主要有效成分可能是芍藥苷和芍藥內酯苷，兩者是通過單獨的機制來發揮抗抑郁作用，還是具有協同作用，或是兩者兼具，還有待于進一步研究。本研究為深入研究白芍抗抑郁的有效成分和作用機制奠定了基礎。

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