IgD型多發性骨髓瘤患者實驗室檢查結果分析

耿紅蓮,王淇泓,趙文靜,竺 蓓,仲人前

(第二軍醫大學附屬長征醫院實驗診斷科、全軍臨床免疫中心,上海200003)

多發性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是漿細胞單克隆增生的惡性腫瘤,實驗室檢查以血清蛋白電泳中出現異常濃集區帶,即M蛋白帶最有診斷價值。根據其增生的漿細胞分泌的免疫球蛋白重鏈的不同,可將MM分為IgG型 、IgA 型、IgM 型、IgD型和IgE型。其中IgG型、IgA型、IgM型較為常見,其實驗室診斷方法和結果分析較為成熟,而IgE型非常罕見。本研究主要針對臨床出現但較為少見的IgD型MM的實驗室檢查結果進行分析,以期發現其特點,避免漏診。

1 材料與方法

1.1 研究對象 收集2009.5至2010.10符合MM診斷標準的患者血清分別收集20例,本實驗室檢測到的IgD型、IgG型、IgA型、IgM型MM患者血清標本,盡量包括κ輕鏈型和λ輕鏈型。30例體檢健康者血清,為免疫球蛋白定量的正常對照組。

1.2 檢測方法

1.2.1 免疫球蛋白定量:采用西門子公司Dade Behring BNII免疫生化分析儀及配套試劑,利用免疫散射比濁法,定量測定免疫球蛋白IgG、IgA、IgM和kappa、lambda輕鏈的濃度。

1.2.2 血清蛋白電泳:采用Helena公司的Spife3000電泳儀及掃描儀進行血清蛋白電泳,具體操作包括加樣(每孔19ul)、染色(acid blue)、脫色(5%乙酸)、烘干等,最后在掃描儀上進行掃描,自動計算出各區帶所占百分比。

1.2.3 免疫固定電泳:采用Helena公司的Spife3000電泳儀及配套試劑,特別注意加IgD泳道。具體操作包括瓊脂糖凝膠電泳、免疫沉淀及顯色三個部分。免疫沉淀即應用固定劑和各型免疫球蛋白及輕鏈抗血清,加于凝膠表面的泳道上,經孵育讓固定劑和抗血清的在凝膠內滲透并擴散后,若有對應的抗原存在,則在適當位置形成抗原抗體復合物。

1.3 統計學處理

所得免疫球蛋白和輕鏈濃度采用均數加減標準差表示,兩組之間比較采用t檢驗。

2 結果

2.1 血清免疫球蛋白及輕鏈定量 20例IgD型MM患者血清免疫球蛋白及輕鏈定量結果顯示,IgG、IgA和 IgM 含量顯著減低(18例,占90%),其余兩例3種免疫球蛋白含量處于正常下限。輕鏈定量發現,IgD型MM患者以λ輕鏈升高為主(19例,占95%),且20例中有19例是輕鏈比值異常的。與IgG、IgA和IgM型MM定量結果比較發現,IgG型MM以IgG升高為主,其它免疫球蛋白下降,輕鏈型中κ型和λ型均有;IgA和IgM型結果類似;IgD型MM患者血清IgG、IgA和IgM均顯著低于正常對照組,輕鏈型以λ升高,κ/λ比值下降為主。以 IgG/λ型MM患者為例,IgG/λ型和IgD/λ型MM患者血清免疫球蛋白及輕鏈定量結果比較如表1所示。

表1 IgG/λ型和IgD/λ型MM患者定量測定結果比較

2.2 血清蛋白電泳M帶檢出率

MM患者經血清蛋白電泳后,IgG、IgA、IgM和IgD型MM的血清蛋白電泳M帶檢出率分別為19(95%)、18(90%)、19(95%)和 18(90%),檢出率無顯著差異。另外,各型MM的血清蛋白電泳陽性條帶的位置分布包括β區、γ區以及位于β和γ之間的區域,各型之間無明顯差異。

2.3 免疫固定電泳分型

IgG、IgA、IgM和IgD型MM患者血清經免疫固定電泳均呈現異常濃集區帶,分型結果顯示IgD型MM,以IgD/λ為主(19/20,95%);6例經血清蛋白電泳未檢出M帶而免疫固定電泳檢出M帶的患者中,有2例為IgD型MM患者,其余4例為各型MM患者化療后樣本。以一例典型的IgD型MM患者為例,其實驗室檢查結果如圖1所示:

圖1 IgD型MM患者實驗室檢查結果

3 討論

多發性骨髓瘤是惡性漿細胞單克隆增殖性疾病[1,2],單克隆增殖是一個細胞在某一分裂階段發生突變,然后急劇分化、增殖,并大量表達某種單一的免疫球蛋白。MM在人群中發病機率和免疫球蛋白本身含量一致[3],因為IgG含量最高,因此IgG型最多,IgA型次之,IgM型少見,IgD更少。本文以少見的IgD型MM實驗室檢查結果進行分析,目的是減少IgD型MM的漏診和誤診。

MM患者的實驗室檢查中以M蛋白鑒定最有診斷價值,所謂M蛋白帶即單一的免疫球蛋白增殖在血清蛋白電泳時表現為一條狹窄濃集的異常區帶。本研究發現IgD型MM患者的IgG、IgA和 IgM含量均減低者,而由于試劑限制,無法進行 IgD定量。MM患者一個顯著特點是難治性感染的反復發作[4,5],可能是當某種免疫球蛋白特異性升高時,其它正常成分的免疫球蛋白就會相應的減少,失去正常的免疫功能。因此推斷,IgD型MM患者三種免疫球蛋白減少,IgD免疫球蛋白含量升高。輕鏈定量發現,20例IgD型MM患者有19例為IgD型λ輕鏈型,占95%,而IgD型κ輕鏈型僅1例,這可能是因為正常人總的免疫球蛋白κ/λ比值為2左右,而IgD型免疫球蛋白κ/λ比值僅為0.3,因此是以λ型為主的。IgD型MM患者的血清蛋白電泳陽性率與其余類型無顯著差異,免疫固定電泳顯示IgD泳道有特異性的抗原抗體沉淀帶。

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