乙型肝炎感染后相關(guān)疾病-肝硬化和原發(fā)性肝癌患者鐵代謝的臨床觀察

李永偉 楊宏志 王擁澤 肖閣敏 滕立春

（中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院中醫(yī)科，廣東 廣州 510630）

肝臟是鐵儲(chǔ)存的主要器官，鐵超載所導(dǎo)致的氧自由基和脂質(zhì)過(guò)氧化物會(huì)加重肝組織損傷[1]。研究表明鐵會(huì)協(xié)同丙型肝炎病毒加重肝細(xì)胞的炎性反應(yīng),即使輕度的肝鐵蓄積也可激活肝星形細(xì)胞，促進(jìn)膠原生成，形成肝纖維化[2]，甚至逐漸導(dǎo)致肝硬化和肝癌[1]。目前國(guó)外已有較多研究認(rèn)為鐵的異常升高是導(dǎo)致丙型肝炎、酒精性肝病和非酒精性脂肪肝炎等慢性肝病嚴(yán)重纖維病變，演變?yōu)楦斡不奈ｋU(xiǎn)因素之一[3]。但有關(guān)鐵代謝相關(guān)指標(biāo)在乙型肝炎病毒（HBV）感染中的研究并不多見(jiàn)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院中醫(yī)科2010年1月至2011年7月住院患者，HBV表面抗原或HBV DNA 陽(yáng)性至少半年。并排除其他病因所致肝硬化和肝癌，排除合并細(xì)菌感染者。肝硬化的臨床診斷依據(jù)2000年第十次全國(guó)病毒性肝炎及肝病學(xué)術(shù)會(huì)議 （西安） 制定的《病毒性肝炎防治方案》[4]，肝癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)2001年9月廣州第八屆全國(guó)肝癌學(xué)術(shù)會(huì)議通過(guò)的《原發(fā)性肝癌的臨床診斷與分期標(biāo)準(zhǔn)》[5]，根據(jù)血白蛋白、總膽紅素、凝血酶原時(shí)間、腹水和肝性腦病情況進(jìn)行child-pugh分級(jí)。 其中乙肝后肝硬化（LC）30例和以肝硬化為基礎(chǔ)病變的原發(fā)性肝癌（HCC）32例， 男性58例，女性4例，年齡分別為（51.33±15.87）、（51.00±12.9），兩組間年齡、性別比例及child-pugh分級(jí)無(wú)顯著差異。

表1 乙型肝炎后肝硬化和原發(fā)性肝癌患者血清中Fe、TIBC、UIBC和TS的比較

1.2 檢測(cè)方法

采用Ferene法測(cè)定血清鐵和TIBC。鐵標(biāo)準(zhǔn)貯存液（1.79mmol/L）：精確稱取硫酸高鐵銨CFeNH4（SO4）.12H2O 0.8635g，溶于約300mL蒸餾水中，加濃硫酸5mL，搖勻，加水至l000mL，密閉貯存于冰箱長(zhǎng)期使用。鐵標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液（35.8μmol/L）用鐵貯存液稀釋50倍；顯色劑20mg Ferene S溶于l00mL醋酸鹽緩沖液中。操作取清潔試管三支，在測(cè)定、標(biāo)準(zhǔn)和空白管中分別加血清，標(biāo)準(zhǔn)液和蒸餾水0.4mL，各管加顯色劑2.2mL，充分混勻，37℃水浴10min，594nm波長(zhǎng)，加入比色皿，以空白管調(diào)零，讀取測(cè)定、標(biāo)準(zhǔn)管吸光度（A）。計(jì)算：血清鐵μmol/L =Au÷As×35.8。采用紅菲繞啉直接法檢測(cè)UIBC，UIBC=測(cè)定（OD[S-Bl]/ 校準(zhǔn)（OD[S-Bl]×校準(zhǔn)品濃度。計(jì)算TS（%） =血清鐵/總鐵結(jié)合力。

參考值：鐵 11～27μmol/L，TIBC 46.4～69.5μmol/L，UIBC 20～58.7μmol/L，TS 33%～55%。甲胎蛋白（AFP）采用化學(xué)發(fā)光法按試劑盒說(shuō)明操作，正常值0～0.81 μg/L；血色素（HB）用常規(guī)方法檢測(cè)，正常值131～172g/L。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行兩組間比較，采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，P值＜0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

比較乙型肝炎后肝硬化和原發(fā)性肝癌患者血清中鐵、總鐵結(jié)合力、血清不飽和鐵結(jié)合力和轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度。結(jié)果顯示兩組患者間血清TIBC無(wú)顯著差異。而血清鐵和TS在肝硬化患者明顯升高，且TS明顯高于正常值；原發(fā)性肝癌患者兩者均降低，但均在正常值范圍；肝癌組UIBC顯著高于肝硬化組。肝癌組甲胎蛋白水平明顯升高，兩組血色素水平無(wú)顯著性差異[4,5]。結(jié)果見(jiàn)表1。

3 討 論

完全鐵結(jié)合力（TIBC）常與血清鐵檢測(cè)結(jié)合以評(píng)價(jià)人體是否缺鐵或鐵過(guò)多，血清總鐵結(jié)合力減去血清鐵為不飽和鐵結(jié)合力（UIBC），而轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度（TS）則是鐵與TIBC的比值。缺鐵時(shí)，血清鐵或TS降低，而TIBC或UIBC升高；鐵過(guò)多時(shí)，血清鐵或TS升高，而TIBC可降低或正常[6]。關(guān)于肝臟鐵的沉積和血鐵生化的異常在乙型肝炎病毒感染的研究并不多見(jiàn)[7]。國(guó)外報(bào)道在包括HBV感染在內(nèi)的慢性肝炎中，血清鐵升高的比例約為36%，而肝硬化被認(rèn)為是鐵超載的原因[8]。本研究也發(fā)現(xiàn)肝硬化患者存在明顯的鐵負(fù)荷增加，在肝硬化基礎(chǔ)上進(jìn)展為肝癌時(shí)，血清鐵的水平卻降低，部分患者甚至低于正常值范圍。與此類似的報(bào)道是李玲等發(fā)現(xiàn)肝癌患者血清鐵較正常對(duì)照者顯著降低[9]，但未知此類患者的肝癌是否在肝硬化基礎(chǔ)上發(fā)生。國(guó)內(nèi)謝裕達(dá)報(bào)道毛發(fā)中的鐵元素在乙型肝炎、肝硬化和肝癌患者均較正常對(duì)照組顯著升高，3組間比較無(wú)顯著差異[10]。組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)鐵在肝癌組織較之非癌的肝實(shí)質(zhì)組織降低，但在直徑大于4cm的肝癌升高[11]。在本觀察中也發(fā)現(xiàn)部分肝癌患者的血清鐵和TS高于正常值，但與肝癌病灶的大小并無(wú)關(guān)系，相關(guān)的因素尚需進(jìn)一步研究。在肝炎階段存在肝細(xì)胞的炎癥壞死，可釋放出儲(chǔ)藏的鐵元素導(dǎo)致其升高[12]，而乙型肝炎后肝硬化和部分肝癌患者的鐵超載原因尚需進(jìn)一步研究。對(duì)于肝癌缺鐵的原因，文獻(xiàn)報(bào)道認(rèn)為系癌細(xì)胞需要消耗大量的鐵來(lái)提供營(yíng)養(yǎng)，促進(jìn)其生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移[12]。

過(guò)多的鐵沉積于肝臟可導(dǎo)致肝細(xì)胞的氧化損傷，在眾多包括病毒性肝炎、酒精、吸煙等在內(nèi)的肝癌危險(xiǎn)因素中，實(shí)驗(yàn)和人體研究支持鐵超載是癌癥尤其是肝細(xì)胞癌的危險(xiǎn)因素[13,14]。目前核苷（酸）類似物已在國(guó)內(nèi)廣泛應(yīng)用，但該類藥并不能完全阻止肝癌的發(fā)生，因此對(duì)肝硬化階段的鐵超載進(jìn)行早期干預(yù)是否可降低肝癌發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)值得進(jìn)一步研究。

本臨床觀察顯示原發(fā)性肝癌患者的血清鐵水平和TS顯著低于乙型肝炎后肝硬化患者，而不飽和鐵結(jié)合力明顯高于肝硬化患者，但均值在正常范圍。兩組患者均存在輕度貧血，至少在肝硬化，貧血的原因主要為脾功能亢進(jìn)，而非缺鐵性貧血；而肝癌則兩種因素都可能存在。

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