白附子生品和不同炮制品對小鼠體內抗腫瘤作用的比較研究

劉筱清，薛雯，梁雪琰，陳專，吳靜，李艷鳳

(黑龍江中醫藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040)

白附子為天南星科植物獨角蓮(Typhonium giganteum Engl.)的干燥塊莖。辛、溫，有毒;歸胃、肝經。具有祛風痰，定驚搐，解毒散結止痛之功效［1］。艾鳳偉［2］等人研究證明，白附子水提物對小鼠S180實體瘤有一定的抑制作用，且能明顯提高S180肉瘤荷瘤小鼠的胸腺指數和脾指數。同時，李艷鳳等［3］對白附子炮制進行了綜述。本實驗就白附子生品和不同炮制品體內抗腫瘤作用進行了比較研究。

1 動物及瘤株

昆明種小鼠，雄性，18～22g，購于黑龍江中醫藥大學實驗動物中心，許可證號:SCXK黑2008004;小鼠S180實體瘤，購于哈爾濱醫科大學腫瘤防治研究所。

2 實驗藥物

白附子生品購于黑龍江省五常市(人工種植)，經黑龍江中醫藥大學都曉偉教授鑒定為天南星科植物獨角蓮(Typhonium giganteum Engl.)的干燥塊莖。

2.1 白附子藥品炮制

2.1.1 藥典法

取凈白附子，大小分檔，浸泡，每日換水2～3次，數日后如起粘沫，換水后加白礬(每100kg白附子用白礬2kg)泡1日后再換水，至口嘗微有麻舌感為度，取出。將生姜片、白礬粉置鍋內加適量水，煮沸后，倒入白附子共煮至無白心，撈出，除去生姜片，晾至6～7成干。切厚片，干燥。每100kg白附子，用生姜、白礬各12.50kg［1］。

2.1.2 礬制

取凈白附子，大小分檔，分別用清水浸泡，每日換水2～3次，浸泡數日至內無生心為度，將鍋內放入清水及白礬，加熱至沸，取泡好的白附子置鍋內同煮，不斷翻動，約煮4～5h切開內無白心，以口嘗稍有麻辣感為度，撈出晾至6成干，燜潤至內外軟硬適宜，切片，曬干或烘干。每100kg白附子，用白礬10kg。

2.2 實驗藥物的提取

分別取白附子生品、藥典法炮制品、礬制法炮制品飲片各150g，水提3次，合并濾液，濃縮至稠膏，于水浴加熱干燥，得粉末狀提取物。用蒸餾水配制成0.75g/ml和1.50g/ml的混懸液，置4℃冰箱保存備用。

3 實驗方法

3.1 實體瘤模型建立［4］

取傳代接種后7天S180瘤源小鼠，無菌條件下從腹腔抽出瘤液，用滅菌生理鹽水稀釋至細胞計數約為1×107個/ml，取質量18～22g清潔級昆明種小鼠，每鼠右腋皮下接種0.2mL。制成實體瘤型荷瘤小鼠模型。

3.2 動物分組及給藥方法

將接種腫瘤后的實驗動物隨機分為7組，分別記為藥典高劑量組、藥典低劑量組、礬制高劑量組、礬制低劑量組、生品高劑量組、生品低劑量組、空白組，每組12～13只。每天灌胃給藥1次，每次0.4ml?？瞻捉M給予相同劑量的生理鹽水。

各組給藥11天后，將小鼠脫臼處死，剖取腫瘤稱重，計算抑瘤率。

4 實驗結果

白附子生品、藥典炮制品、礬制品水提物分別給予S180肉瘤小鼠，以瘤重、抑瘤率為考察指標，經SPSS 13.0統計軟件分析處理，結果與空白組比較，各給藥組瘤重均低于空白組，具有統計學差異(P≤0.05);生品高劑量組和藥典低劑量組抑瘤率分別為46.72%和34.10%，有顯著性差異(P≤0.05)，其他各給藥組之間，抑瘤率無顯著性差異(P≥0.05)，但生品高劑量組瘤重均低于其他各組。結果詳見表1。

5 討論

5.1 本實驗首次證明，不同濃度的白附子生品、藥典炮制品、礬制品水提物均有一定的抗腫瘤作用，且生品高劑量對S180肉瘤抑制作用最強。

5.2 白附子的毒性主要表現為對眼結膜、胃黏膜及皮膚的局部刺激作用。吳連英［5］等報道，白附子混懸液給小鼠灌胃1次用量達成人用量100倍以上時，未見有明顯的毒性反應。生品冷浸液腹腔注射15g/kg(相當口服計量的125倍)，結果呈明顯的毒性反應。故白附子生品用于抗腫瘤時，建議口服給藥。

表1 白附子生品和不同炮制品對小鼠S180肉瘤抑瘤率

5.3 白附子抗腫瘤的機理尚不十分明確，張振凌［6］、單保恩［7］等人認為，可能與增加免疫器官質量、提高免疫機能有關。朱耀寰［8］等人認為，白附子能降低小鼠瘤組織中突變型p53基因的表達，抑制瘤細胞增殖、促進凋亡而發揮抗腫瘤作用。李艷鳳［9］等實驗研究認為，白附子可體外抑制胃癌SGC－7901細胞的增殖，調節Bcl－2、Bax凋亡相關蛋白的表達，啟動細胞凋亡的線粒體途徑從而誘導細胞凋亡可能是其抗腫瘤的重要作用機制之一。馬英麗［10］等人實驗研究表明，白附子木質素類化合物抗腫瘤作用機制可能與上調TRAIL及其受體TRAIL－R1和TRAIL－R2有關。

［1］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［S］.北京:化學工業出版社，2005:70.

［2］ 艾鳳偉，李艷鳳，王佳瑜，等.白附子抗腫瘤藥理作用研究［J］.吉林中醫藥，2010，30(5):442 －443.

［3］ 李艷鳳，馬英麗.白附子炮制的歷史沿革與現代研究進展［J］.中醫藥學報，2010，38(4):105 －106.

［4］ 徐叔云，卞如鐮，陳修.藥理實驗方法學［M］.北京:人民衛生出版社，2002:1786.

［5］ 吳連英，仝燕，程麗萍，等.白附子不同炮制品毒性比較研究［J］.中國醫藥學報，1992，7(11):13.

［6］ 張振凌，趙麗娜，張紅偉，等.中藥白附子炮制前后對小鼠抗腫瘤作用的影響［J］.中華中醫藥雜志，2010，25(7):1009 －1011.

［7］ 單保恩，張金艷，李巧霞，等.禹白附對人T細胞和單核細胞的調節活性［J］.中國中西醫結合雜志，2001，21(10):768 －770.

［8］ 朱耀寰，遲相林.白附子抗腫瘤作用研究［J］.中藥藥理與臨床，2006，22(3):122 －123.

［9］ 李艷鳳，唐麗萍，馬超，等.白附子提取物抑制人胃癌SGC－7901細胞增殖及誘導凋亡的機制研究［J］.中國藥學雜志，2010，44(16):1237－1240.

［10］ 馬英麗，李艷鳳，唐麗萍，等.白附子木脂素化合物調節人胃癌SGC－7901細胞TRAIL及其受體的表達［J］.中國新藥雜志，2010，19(3):225 －228.