頸痛寧丸對(duì)CSA模型家兔血漿中IL－1β和TNF－α的影響

宋春燕，王艷麗，周敏

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040)

椎動(dòng)脈型頸椎病是由于椎動(dòng)脈的直接受壓和梗阻或椎動(dòng)脈叢受刺激引起動(dòng)脈管壁痙攣，導(dǎo)致椎－基底動(dòng)脈供血不足而出現(xiàn)的一組臨床癥候群。近年來(lái)的研究顯示，IL－1β和TNF－α等細(xì)胞因子在椎動(dòng)脈型頸椎病中有一定影響。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察頸痛寧丸對(duì)椎動(dòng)脈型頸椎病模型家兔血漿中IL－1β和TNF－α的影響，從而為探討頸痛寧丸治療椎動(dòng)脈型頸椎病的作用機(jī)制奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 造模方法 健康新西蘭大耳白家兔70只，雌雄各半，體質(zhì)量2.5～3.0kg，由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。去除各家兔枕后及頸部體毛，TCD檢測(cè)各家兔椎－基底動(dòng)脈血流速度。然后抽取硬化劑消痔靈注射液(0.4g×10ml)10ml注射于兔左側(cè)C3～C5頸椎橫突側(cè)面，并于第2、4周重復(fù)注射。再次TCD檢測(cè)，選取雙側(cè)椎動(dòng)脈、基底動(dòng)脈血流速度均減小10cm/s以上者為成功模型。

1.2 分組及給藥 挑選成模家兔40只，隨機(jī)分為5組，每組8只。頸痛寧丸高、中、低劑量組每日分別給予頸痛寧丸 2g/kg(33.3%:6ml/kg)、1g/kg(25%:4ml/kg)、0.5g/kg(12.5%:4ml/kg);陽(yáng)性對(duì)照組每日給予頸復(fù)康顆粒1g/kg(25%:4ml/kg);模型對(duì)照組給予等容積生理鹽水。另取8只健康家兔作為空白對(duì)照組，正常飼養(yǎng)。各家兔采取灌胃給藥方法，每日1次，給藥4周。

1.3 藥物制備 頸痛寧丸由丹參，當(dāng)歸，川芎，桃仁，紅花，桑枝，葛根，穿山甲等組成，蜂蜜成丸，由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥理教研室提供。

1.4 儀器與試劑 離心機(jī)LDZ4－1.2(北京醫(yī)用離心機(jī)廠);恒溫水浴DGX－9143B－1(上海福碼實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司);自動(dòng)酶標(biāo)儀anthosHTⅡ型(奧地利);消痔靈注射液(吉林省集安益盛藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)0907253);頸復(fù)康顆粒(承德中藥集團(tuán)有限公司，批號(hào)090124)。

1.5 指標(biāo)檢測(cè) 末次藥后30min，各動(dòng)物空腹取下腔靜脈血。抗凝血3 500rpm離心15min，分離血漿，－80℃保存。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 13.0處理，以均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，進(jìn)行成組設(shè)計(jì)t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果 見(jiàn)表1。

表1 頸痛寧丸對(duì)椎動(dòng)脈型頸椎病家兔血漿中IL－1β和TNF－α含量的影響(±s)

表1 頸痛寧丸對(duì)椎動(dòng)脈型頸椎病家兔血漿中IL－1β和TNF－α含量的影響(±s)

注:與模型組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01。

組別 給藥量(g/kg)例數(shù)(n)IL－1β(pg/mL)TNF－α(pg/mL)高劑量組 2.0 8 22.80 ±2.63* 102.95 ±6.99＊＊中劑量組 1.0 8 24.25 ±1.09* 105.17 ±5.49*低劑量組 0.5 8 25.34 ±2.32 109.31 ±8.22陽(yáng)性對(duì)照組 1.0 8 23.04 ±1.92* 106.16 ±6.44*空白對(duì)照組 － 8 22.20±1.73＊＊100.18±7.28＊＊模型對(duì)照組 等容積生理鹽水8 29.39 ±6.50 115.55 ±8.41

由表1可見(jiàn)，頸痛寧丸高、中、低劑量組的IL－1β含量均低于模型對(duì)照組，其中頸痛寧丸高、中劑量組與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.05);頸痛寧丸高、中、低劑量組的TNF－α含量均低于模型對(duì)照組，其中頸痛寧丸高劑量組、中劑量組與模型對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.01，P＜0.05)。

3 討論

IL－1β、TNF－α是重要的炎癥促進(jìn)劑，可刺激炎癥細(xì)胞的聚集、激活和炎癥遞質(zhì)的釋放。IL－1β可以促進(jìn)TNF－α、IL－2和IL－8等因子的合成，還可誘導(dǎo)大部分趨化因子和黏附分子的表達(dá)，參與缺血缺氧后腦組織的急性炎癥反應(yīng);還可以促使內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生多種生物活性物質(zhì)而收縮腦血管、促進(jìn)血栓形成，加重腦缺血的程度。TNF－α在病理情況下既是一種有效的腫瘤殺傷因子，又是機(jī)體炎癥及免疫應(yīng)答的重要的調(diào)節(jié)因子。其激活中性粒細(xì)胞和單核－巨噬細(xì)胞，促進(jìn)炎癥反應(yīng);還能刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞和纖維母細(xì)胞合成IL－1、集落刺激因子等，增加血管內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)白細(xì)胞的粘附性等，與組織損傷密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，頸痛寧丸可抑制椎動(dòng)脈型頸椎病模型家兔體內(nèi)炎癥因子的釋放。