不同濃度的臭氧對損傷的小鼠坐骨神經的影響

王儉 張瑛 張利蘋 姬勇

坐骨神經痛是目前臨床上常見多發病，主要癥狀為坐骨神經通路及其分布的疼痛，也就是在臀部大腿后側、小腿后外側和足外側部位的疼痛。疼痛往往反復發作，時間長了會出現患側下肢肌肉萎縮，甚至會出現跛行，腰椎間盤突出是最常見的病因［1］。臭氧具有抗炎和鎮痛的作用，臭氧療法應用于臨床也已有較長的一段時間，但臭氧對坐骨神經痛是否有治療作用還未見有人報道。本研究通過觀察不同濃度的臭氧對損傷的小鼠坐骨神經熱刺激收縮反應期的差別，以此探討臭氧對坐骨神經痛的治療效果。

1 材料與方法

1.1 材料 健康的雌性BALB/c小鼠購自山東大學醫學院動物研究所;小型臭氧發生器JT-XB-5(濟南景天環境科技有限公司);熱輻射刺激儀(東西儀(北京)科技有限公司)。

1.2 慢性松結扎小鼠造模 將BALB/c小鼠用1%的戊巴比妥按35 mg/kg的計量進行腹腔麻醉，常規消毒鋪巾后于左后肢大腿中段鈍性分離股二頭肌，以便暴露坐骨神經干，用4-0鉻腸線對坐骨神經進行結扎，使坐骨神經外膜輕度縮窄又不阻斷神經外膜表面的血流。

1.3 方法 將30只造模成功的雌性BALB/c小鼠隨機分為3 組：對照組、臭氧 10 μg/ml治療Ⅰ組、臭氧 30 μg/ml治療Ⅱ組，每組各10只，在造模7 d時，分別給予對照組、臭氧10 μg/ml治療Ⅰ組和臭氧30 μg/ml治療Ⅱ組：生理鹽水、10 μg/ml臭氧、30 μg/ml臭氧1 ml注射到小鼠損傷的坐骨神經處。應用熱輻射刺激儀分別在手術前和手術后1 d、3 d、7 d、10 d、14 d測定所有小鼠熱刺激收縮反應期［2］。

1.4 統計學方法 采用SPSS 12.0軟件進行統計學處理。組內比較行配對t檢驗，組間比較采用單因素方差分析。檢驗水準α=0.05。

2 結果

手術造模后3 d起，小鼠開始出現熱痛敏癥狀，造模7 d時開始注射臭氧治療，手術前30只小鼠熱刺激收縮反應期差別無統計學意義;手術后3 d、7 d各組小鼠的熱刺激收縮反應期差別與手術前明顯增強，P＜0.05差異有統計學意義;手術后10 d 和14 d，臭氧30 μg/ml治療組與對照組、臭氧 10 μg/ml治療組相同時間點比較差異有統計學意義，P＜0.05;臭氧10 μg/ml治療組與對照組相同時間點比較差異沒有統計學意義，P＞0.05，見表1。

表1 不同濃度的臭氧在不同時間對小鼠坐骨神經熱刺激收縮反應期的影響(± s，d)

表1 不同濃度的臭氧在不同時間對小鼠坐骨神經熱刺激收縮反應期的影響(± s，d)

3 d 7 d 10 d 14 d對照組 10 0±0.12 -4.22±0.04 -6.42±0.13 -6.32±0.12 -組別 例數 手術前6.35±0.13Ⅰ組 10 -0.03±0.14 -4.12±0.03 -6.28±0.11 -6.25±0.17 -6.26±0.15Ⅱ組 10 0.13±0.34 -4.27±0.04 -6.32±0.14 -3.12±0.03 -3.15±0.23

3 討論

臭氧是一種不穩定的氣體，具有很強的氧化能力，它的藥理效應的基礎就是氧化和氧飽和作用，其氧化作用比氧氣強，更易溶于血液和組織液中，臭氧被用于治療疾病已有幾十年了，最早被用于腰椎間盤突出癥［3］，隨著對臭氧作用機制的進一步研究，臭氧被進一步應用到其他疾病的治療中，像關節炎、肩周炎、偏頭痛及周圍血管缺血性疾病的治療，其臨床療效比較確切。在其安全性方面，有研究表明，副作用率只為十萬分之七，未有傷殘、死亡報道［4］。但蠶豆病患者應禁忌臭氧治療。

本研究模型是損傷性的，坐骨神經損傷會釋放大量的炎性因子，引起周圍組織的炎癥，臭氧有抗炎作用，它的機理是釋放免疫抑制性細胞因子、刺激NO和血小板源性生長因子生成，擴張血管，局部微循環得到改善，從而減輕水腫和提高局部氧濃度，有利于有氧代謝。坐骨神經損傷后會使神經末梢釋放前列腺素、P物質、緩激肽和磷脂酶A等致痛物質［5］，從而引起疼痛。而臭氧不僅可以抑制病變部位合成與釋放以上致痛復合物而產生鎮痛作用;還可以刺激機體釋放阻斷有害信號向中樞傳遞的物質，如內啡肽等，從而使鎮痛作用更強。

雖然臭氧的安全性良好并且具有多作用的特點，它在臨床疼痛領域也受到了廣泛的關注，但事實上目前臨床上并沒有得到普遍的應用。臭氧本身的細胞毒性特點在傳統觀念中受到束縛，使臨床疼痛醫生有所顧忌;沒有系統的疼痛學基礎研究也是臭氧應用方面受限制一個原因;再者就是臭氧劑量濃度目前尚不能精確調控。但隨著對臭氧作用機制的進一步研究，基礎研究及臨床經驗的大量積累和生產技術的進步，臭氧在臨床疼痛領域會有廣闊的前景。

［1］陳裕光，李佛保，黃承達，等.牽引下腰椎間盤突出的椎間距及間盤內壓測量研究.中華理療雜志，1994，17(2)：86．

［2］Wang LX，Wang ZJ.Aninal and cellularmodels of chronicpain.Adv Drug Deliv Rev，2003，55：949-965．

［3］王助英，姜才美，王執民.經皮椎間盤醫用臭氧注射術治療腰椎間盤突出癥及適應證研究.介入放射學雜志，2006，15(2)：78-80．

［4］Bocci Velio.OZONE-A New Medical Drug.Netherlands：Springer，2005：20-28，75-83，198-208．

［5］吳聞文，侯樹勛.腰椎間盤組織中磷酯酶A2活性水平與神經根性疼痛的關系.中國脊柱脊髓雜志，1996，6(1)：5．