吉蘭－巴雷綜合征患者腦脊液中S－100 b、MBP的檢測(cè)及意義

葛繼暉 馮樹(shù)濤

鄭州人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科二區(qū) 鄭州 450000

吉蘭－巴雷綜合征（guillain－barre syndrome，GBS）是以周圍神經(jīng)和神經(jīng)根的脫髓鞘及小血管周圍炎細(xì)胞浸潤(rùn)為病理特點(diǎn)的自身免疫性疾病。其病因和發(fā)病機(jī)制尚不明確。在脫髓鞘患者的病灶處存在著復(fù)雜的免疫炎癥反應(yīng)，包括細(xì)胞免疫反應(yīng)和體液免疫反應(yīng)的共同參與，在這些反應(yīng)的過(guò)程中產(chǎn)生了各種細(xì)胞、蛋白、因子等，S－100及MBP蛋白即是其中兩種，目前對(duì)S－100及MBP蛋白的研究國(guó)內(nèi)外已成為熱點(diǎn)。我們應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測(cè)二者的水平，以初步探討脫髓鞘疾病的發(fā)病機(jī)制，了解其在其發(fā)病機(jī)制中的作用。

1 對(duì)象和方法

1.1 研究對(duì)象 32例GBS患者（GBS組）來(lái)自鄭州人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科2009－2010年急性起病的吉蘭－巴雷患者，行腦脊液及肌電圖檢查確診，診斷符合美國(guó)Asburg等［1］于1990修訂的新診斷標(biāo)準(zhǔn)，男19例，女13例；年齡（42.2±14.5）歲，根據(jù)病情參照美國(guó)Asburg等于1990修訂的新診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行臨床分級(jí)。其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病（OND組）30例，男14例，女16例，年齡（28.4±8.2）歲。正常健康者對(duì)照（NC組）29例，男16例，女13例，年齡（29.6±7.6）歲。均排除中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘疾病、感染及其他疾病患者。

1.2 標(biāo)本采集與處理 采集腦脊液均在發(fā)病后2周之內(nèi)，之前均未接受影響免疫的藥物治療，采集的新鮮腦脊液標(biāo)本，1.2×104r／min離心10 min，4℃，以去除腦脊液中的細(xì)胞和其他雜質(zhì)，存放于－80℃冰箱，待測(cè)。

1.3 S－100 b、MBP的檢測(cè) 采用ELISA法檢測(cè)腦脊液中S－100 b和MBP的含量（試劑盒均購(gòu)自Sig ma公司）。操作嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，專人操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)以（±s）表示，2組資料之間比較采用t檢驗(yàn)，多組之間比較行用方差分析，P＜0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組腦脊液中S－100 b和 MBP檢測(cè)結(jié)果 見(jiàn)表1。GBS組患者腦脊液中S－100 b和MBP的表達(dá)明顯增高，與OND組和NC組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。OND組和NC組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 各組S－100 b和MBP水平比較 （±s）

表1 各組S－100 b和MBP水平比較 （±s）

與 GBS組相比較，＊P＜0.05，＊＊P＜0.05，OND組和NC組相比較，P＞0.05

組別 n S－100b（ng／mL） MBP（ug／L）GBS 32 0.498±0.116 9.83±4.31 OND 30 0.183±0.109＊ 4.34±2.18＊NC 29 0.167±0.145＊＊ 2.60±3.22＊＊

2.2 GBS臨床分級(jí)各組腦脊液中S－100 b和 MBP檢測(cè)結(jié)果 見(jiàn)表2。1～2級(jí)GBS患者腦脊液中S－100 b和MBP的表達(dá)最低，臨床程度越重，表達(dá)越高，相互比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增殖以及鈣離子的調(diào)節(jié)，所以S－100 b是神經(jīng)的標(biāo)志性蛋白，它在腦脊液或血清中的變化是診斷和評(píng)價(jià)神經(jīng)損傷預(yù)后的重要指標(biāo)之一。S－100 b不但是神經(jīng)損傷的指標(biāo)，同時(shí)對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥還具有促進(jìn)作用［3］。而 MBP是組成髓鞘的主要蛋白質(zhì)，也是反映神經(jīng)系統(tǒng)損害的重要指標(biāo)，特別是髓鞘損傷的特異性生化指標(biāo)。Tian ZJ等［4］發(fā)現(xiàn)，脫髓鞘患者活動(dòng)期腦脊液中MBP與臨床評(píng)分和病情嚴(yán)重程度相關(guān)，說(shuō)明MBP含量高低在一定程度上反映了髓鞘損傷的嚴(yán)重程度。因此腦脊液中S－100 b和MBP測(cè)定在一定程度上反映了神經(jīng)系統(tǒng)有無(wú)實(shí)質(zhì)性損害，以及有無(wú)髓鞘脫失的特異性的生化指標(biāo)，其含量的高低反映了損害的范圍和嚴(yán)重程度。本組實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)GBS患者腦脊液中S－100 b和MBP的含量表達(dá)明顯增高，顯著高于OND組和NC組，還檢測(cè)了不同臨床分級(jí)的GBS患者腦脊液中的S－100 b和MBP，GBS患者臨床程度越重，腦脊液中S－100 b和MBP的表達(dá)越高，這與文獻(xiàn)報(bào)道一致，更進(jìn)一步表明患者神經(jīng)損傷的程度與病情一致。S－100 b蛋白越高，MBP的含量也越高，進(jìn)一步證實(shí)S－100 b蛋白本身對(duì)炎癥具有促進(jìn)作用。

表2 GBS臨床分級(jí)與腦脊液S－100 b和MBP濃度比較 （±s）

表2 GBS臨床分級(jí)與腦脊液S－100 b和MBP濃度比較 （±s）

與1～2級(jí)組相比較，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01，＊＊＊P＜0.01

臨床分級(jí) n S－100b（ng／mL） MBP（ug／L）1～2級(jí)5 0.234±0.121 7.37±2.72 3級(jí) 13 0.382±0.130＊ 8.39±3.74＊4級(jí) 8 0.478±0.205＊＊ 10.09±4.98＊＊5級(jí) 6 0.548±0.216＊＊＊ 11.92±4.21＊＊＊

3 討論

GBS是最常見(jiàn)的急性周圍神經(jīng)脫髓鞘疾病，是由體液和細(xì)胞免疫共同介導(dǎo)的自身免疫性疾病，其發(fā)病機(jī)制可能是多種發(fā)病因素共同作用的結(jié)果，且免疫因素與發(fā)病密切相關(guān)。有文獻(xiàn)報(bào)道［2］，炎性脫髓鞘疾病發(fā)病機(jī)制，可用分子模擬學(xué)說(shuō)解釋，檢測(cè)患者感染的病毒證實(shí)了病毒與髓鞘堿性蛋白（MBP）組分或少突膠質(zhì)細(xì)胞間存在共同抗原。易感機(jī)體在病毒感染后會(huì)導(dǎo)致機(jī)體免疫系統(tǒng)激活，通過(guò)血腦屏障和血脊髓屏障在神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)尋找抗原。神經(jīng)系統(tǒng)的巨噬細(xì)胞激活后大量吞噬髓鞘磷脂，并與HLA－Ⅱ類分子共同作用，將病毒和MBP共同抗原呈遞給致敏的T淋巴細(xì)胞，導(dǎo)致T淋巴細(xì)胞的激活，激活的T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子，進(jìn)一步激活并刺激免疫細(xì)胞產(chǎn)生各種細(xì)胞因子、自由基、蛋白溶解酶等產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，損傷少突膠質(zhì)細(xì)胞、施萬(wàn)細(xì)胞等方式間接造成髓鞘的損傷引起脫髓鞘反應(yīng)，同時(shí)炎癥破壞血腦屏障及血脊髓屏障，遭到破壞的細(xì)胞釋放S－100 b和MBP到腦脊液和血清中，造成二者濃度異常升高。上述結(jié)果亦為臨床通過(guò)檢測(cè)腦脊液中S－100 b和MBP的濃度以及評(píng)估GBS嚴(yán)重程度及預(yù)后提供了依據(jù)。

S－100 b是具有調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)，并參與細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳遞的神經(jīng)系統(tǒng)特異性蛋白，結(jié)構(gòu)為α和β兩種亞基。其中S－100α存在于紋狀肌中，S－100 b存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，主要功能促進(jìn)軸索生長(zhǎng)、神

綜上所述，雖然腦脊液或血液中的S－100 b和MBP濃度的高低對(duì)GBS的診斷不具有特異性，但其反映了神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)髓鞘的損害程度。同時(shí)S－100 b和 MBP也是GBS發(fā)病機(jī)制中的特異性重要生化指標(biāo)，可為臨床診斷、評(píng)價(jià)患者病情嚴(yán)重程度、干預(yù)措施以及預(yù)后提供重要信息。但本研究也有不足之處，樣本量少，沒(méi)有在多種水平上和多方面檢測(cè)，S－100 b蛋白釋放是否與神經(jīng)的修復(fù)機(jī)制有關(guān)，是否需要進(jìn)一步動(dòng)態(tài)學(xué)觀察還有待進(jìn)一步研究。治療上不應(yīng)該局限于傳統(tǒng)免疫抑制治療，應(yīng)從多種角度考慮，研究具有抑炎性因子、阻止促炎性因子的作用的藥物，為GBS的臨床治療開(kāi)拓一條新的道路。

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