金鎖固精丸質量標準研究

王憲忠

金鎖固精丸收載于《中華人民共和國衛生部藥品標準中藥成方制劑第一冊》［1］。該部頒標準中只介紹了金鎖固精丸的處方、制法、性狀和主治功能。本實驗方法根據2010版《中華人民共和國藥典》(一部)中沙苑子苷的含量測定標準［2］，在金鎖固精丸部頒標準的基礎上增加了沙苑子苷的含量測定，經過系統實用性實驗，表明該方法專屬性強，可以有效地控制和提高金鎖固精丸制劑的質量標準。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 SB3200型超聲儀(上海必能信儀器廠);2010AHT全自動高效液相色譜儀(島津);紫外檢測器，Classvp工作站。

1.2 試藥 沙苑子苷對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號10752-201021);金鎖固精丸由湖北襄樊苗泰醫藥有限公司提供(批號：20100601、20100605、20100703);乙腈為 HPLC級;乙醇為AR級;水為重蒸餾水。

2 系統實用性實驗

2.1 色譜條件 色譜柱為Dirmonsil C18(4.6 mm×250 mm，5 μm);流動相為乙腈-0.1%磷酸溶液(11∶89);進樣量為10 μL;流速為1.0 ml/min;檢測波長為266 nm。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱取沙苑子苷對照品15.01 mg，置100 ml容量瓶中，加60%乙醇至刻度，搖勻，精密量取1 ml，置10 ml容量瓶中，加60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，備用。

2.3 供試品溶液的制備 取本品研細，混勻，精密稱定3 g，置具塞錐形瓶中，精密加入60%乙醇25 ml，稱定重量，超聲處理30 min，放冷，再稱定重量，用60%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.4 空白對照溶液的制備 以相同的處方比例，制得不含沙苑子苷的空白樣品，按供試品溶液的制備方法制成空白對照溶液。

2.5 空白干擾試驗 分別精密吸取沙苑子苷對照品溶液、供試品溶液及空白對照溶液各10 μl，注入高效液相色譜儀，結果表明空白對照溶液無干擾，見圖1。

圖1 (a)對照品色譜圖，(b)供試品色譜圖，(c)空白對照色譜圖

2.6 線性關系 取濃度為150 μg/ml的沙苑子苷對照品溶液，吸取 0.5、1、2、3、5 和 10 ml，分別置于 10 ml容量瓶中，加60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標作圖，得回歸方程為Y=7354+32714X(r=0.9967)。結果表明，沙苑子苷在7.5～150 μg/ml范圍內具有良好的線性關系。

2.7 穩定性試驗 精密量取樣品3 g，按“供試品溶液的制備”項下方法同法制備，按上述色譜條件每隔3 h進行測定，共計進樣5次，測定其穩定性。結果：峰面積(A)的RSD為0.6%，表明樣品溶液在12 h內穩定。

2.8 精密度試驗 精密吸取對照品溶液，連續進樣5次，測定其峰面積，其 RSD為0.31%(n=5)，結果表明精密度良好。

2.9 重復性試驗 取同一批號的樣品(批號：20100601)5份，每份約3 g，精密稱定，按“供試品溶液的制備”項下方法同法制備，按上述色譜條件測定，每份連續進樣2次。RSD為0.5%，結果表明重復性良好。

2.10 加樣回收率試驗 精密稱定已知含量的樣品(批號：20100601)5份，每份約3 g，分別精密加入濃度為15 μg/ml的沙苑子苷對照品溶液1 ml，按樣品方法制備及測定，計算回收率，平均回收率為99.2%，RSD為0.3%(n=5)。結果表明，本法具有良好的加樣回收率。

2.11 樣品含量測定 按上述色譜條件對3個批號樣品中沙苑子苷的含量進行測定，結果批號為20100601、20100605、20100703的沙苑子苷含量分別為0.297 mg/g，0.298 mg/g，0.294 mg/g，RSD 分別為0.87%，0.75%，0.96%。

3 討論

3.1 流動相的選擇 我們考察了幾種流動相，有甲醇-水，乙腈-水等，結果還是乙腈-0.1%磷酸溶液體系分離效果好。故采乙腈-0.1%磷酸溶液體系。

3.2 溶劑的選擇 我們分別采用了70%、50%、30%的甲醇和70%、50%、30%的乙醇作為提取溶劑進行比較。結果是在我們所采用的色譜條件下，60%的乙醇作為提取溶劑提取相同的樣品所得的沙苑子苷含量較高且峰形較好。故我們采用60%乙醇作為提取溶劑。

本文利用高效液相色譜法建立了金鎖固精丸中沙苑子苷含量的測定方法，該方法簡便快捷，準確、重現性好，可用于金鎖固金丸的含量測定。