電針對椎動脈型頸椎病模型兔血漿內皮素、血清超氧物歧化酶影響的研究*

周建偉，張 昭，唐 勇，盧圣鋒

(1.四川省中醫藥科學院，四川成都610041;2.四川省綿陽市中醫院，四川綿陽621000;3.成都中醫藥大學，四川成都610075)

頸椎病是臨床常見病、多發病之一，椎動脈型頸椎病(Cervical Spondylosis of Vertebral Artery Type，CSA)是頸椎病的常見類型，一旦患有該病，往往纏綿難愈，不僅長期折磨患者，也給家庭、社會帶來負擔。筆者在開展針灸推拿治療CSA臨床研究取得滿意療效的基礎上，于2006年8月至2007年12月以椎動脈型頸椎病兔模型為對象，觀察電針對模型兔血漿內皮素(ET)和血清超氧物歧化酶(SOD)的影響，旨在探討電針治療CSA的作用機理。現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 動物

健康日本大耳白兔40只，體重2.5～3 kg，雌雄各半。由成都中醫藥大學動物房提供。

1.2 藥物、試劑及實驗器材

內皮素放射免疫測定試劑盒:解放軍總醫院科技開發中心放免所(原北京東亞免疫技術研究所)，批號040423。超氧化物歧化酶測試盒:南京建成生物工程研究所，批號040425。消痔靈注射液:北京雙鶴藥業股份公司生產，zz－4965－京衛藥準字(1998)第104094號。戊巴比妥鈉:中國醫藥(集團)上海化學試劑公司。MT－1000A型彩色多譜勒儀。G6805－1型電針儀:青島鑫生實業有限公司，編號20030561。華佗牌針灸針:蘇州醫療用品廠有限公司，規格:Φ0.30×13 mm。電熱恒溫培養箱:天津實驗儀器廠。移液管:5 μl、100 μl、200 μl、1000 μl，eppendof。電子分析天平(DF110):常熟儀器設備廠。高速冷凍離心機(CR22G):日立工機株式會社。TsT GW可見光分光光度計:上海分析儀器廠。

1.3 方法

1.3.1 造模方法 選擇體重2.5～3 kg健康成年日本大耳白兔，雌雄各半，隨機分為空白組和模型組，每組20只。空白組不予造模。模型組以脫毛劑將左側自枕后及頸部的體毛脫掉，消毒，用硬化劑10 ml注射于 C3～C5頸椎橫突側面，分別于第2、4、6、8周重復注射1次。8周后 TCD檢測造模后模型組與空白組椎－基底動脈血流動力學狀態，檢測結果顯示椎－基底動脈血流動力學出現異常者為造模成功。造模過程中，空白組2只、模型組3只動物無明顯原因死亡，空白組4只、模型組3只動物出現身體不同部位的瘡瘍，14只動物經TCD檢測示造模成功。

1.3.2 實驗分組 將造模成功的14只動物隨機分為模型組和模型加電針組(簡稱模針組)，每組7只;14只未經造模的動物隨機分為空白組和空白加電針組(簡稱空針組)，每組7只。

1.3.3 治療方法 治療從造模成功后第3天開始，模針組、空針組予以電針“百會”、“風池”(雙側)、頸1～3夾脊(雙側)(參照中國針灸學會實驗針灸分會制定的《動物針灸穴位圖譜》)，“百會”直刺0.3～0.5 cm;雙側“風池”斜向內下方刺入0.5～0.8 cm;頸1－3夾脊(雙側)直刺0.5～0.8 cm。進針后，不進行手法刺激，連接電針儀，正極連接雙側風池，負極連接雙側頸2夾脊以形成刺激回路，施以疏密波，頻率2～100 Hz，電壓2～4 V，強度至肌肉抖動而不出現嘶咬。每日1次，留針20 min，10天為一療程，間隔1天進行下一療程，共2個療程。空白組及模型組動物正常喂養。

1.3.4 指標檢測 觀察結束后第2天，用1%的戊巴比妥鈉麻醉各組動物，心前區備皮，心尖部取血，分別檢測血漿內皮素(ET)和血清超氧物歧化酶(SOD)含量，前者采用放免法，后者采用黃嘌呤氧化酶比色法，操作由實驗室專人負責，嚴格按照說明書進行。

1.3.5 數據分析 所有實驗數據均采用SPSS13.0統計軟件包進行統計，均采用(±s)表示。兩組間比較符合正態分布用獨立樣本t檢驗，非正態分布用非參數檢驗;多組間比較用單因素方差分析。

2 結果

2.1 治療后各組動物血漿ET變化比較

見表1。表1的結果提示，與模型組比較，模針組治療后動物血漿ET水平顯著下降(P＜0.05)，表明電針可顯著降低血漿ET含量。

表1 血漿ET結果

2.2 治療后各組動物血清SOD變化比較

見表2。表2的結果提示，與模型組比較，模針組治療后動物血清SOD水平顯著升高(P＜0.05)，表明電針可顯著提高血清SOD含量。

表2 血清SOD結果

3 討論

椎動脈型頸椎病(CSA)是頸椎病的常見類型，又稱頸性眩暈癥、椎－基底動脈缺血綜合癥，是由各種機械性與動力性因素致椎動脈遭受刺激或壓迫，引起血管狹窄、折曲而造成以椎－基底動脈供血不足為主要病理變化的綜合征，臨床表現以發作性眩暈為主，可伴有頭昏、頭痛、失眠、耳鳴、視物不清、惡心、嘔吐，甚至突然猝倒等癥［1］。一旦患病，往往纏綿難愈，不僅長期折磨患者，也給家庭、社會帶來負擔。CSA的臨床治療以保守治療為主，包括中西藥物、物理療法、針灸推拿等，均有一定療效。

筆者前期開展了針灸推拿治療CSA的臨床研究，結果顯示電針、推拿綜合方案治療CSA可取得滿意的臨床療效［2～3］，可顯著地改善椎－基底動脈血液動力學的紊亂［4］。但其作用機理如何，尚需進一步探討。因此本文所涉及的研究工作旨在通過電針對CSA模型兔血漿內皮素、血清超氧化物歧化酶影響的研究，試圖闡明電針治療CSA的部分機理，為臨床針刺治療CSA提供可靠的實驗依據。

既往研究業已表明，頸椎橫突孔骨性狹窄或先天發育纖細［5］，鉤椎關節增生之骨贅或頸椎不穩機械性壓迫，均可造成椎動脈狹窄［6］。長期的壓迫造成管壁的壓力持續增高，缺血、缺氧，內皮細胞產生大量內皮素(ET)釋放入血，使椎動脈持續收縮，當超過人體的代償能力時就造成椎－基底動脈供血不足，從而出現一系列臨床癥狀。SOD廣泛存在于需氧代謝細胞中，是機體內的主要抗氧化酶，可以抑制脂質過氧化反應，清除超氧陰離子而起保護細胞的作用，從而解除超氧陰離子對機體的損害。研究表明，CSA時由于頸椎及其鄰近組織因長期受壓而出現的缺血缺氧等微循環障礙，是引發體內自由基代謝紊亂的重要原因［7］，它可使SOD水平或活力下降，機體清除自由基活性降低，自由基積累過剩，引起組織損傷，同時又進一步加重對椎動脈、神經根的壓迫刺激，造成椎－基底動脈持續的缺血缺氧［8］。這些研究都表明，CSA時機體椎－基底動脈供血不足，血漿ET水平顯著增高，而血清SOD水平則明顯降低，本文及筆者既往的研究［9］也得出了一致的研究結果。

本研究結果提示，CSA造模兔血漿ET和血清SOD含量異常:模型組與空白組相比血漿ET值明顯升高(P ＜0.01)，血清 SOD 值明顯降低(P ＜0.01);電針治療后，與模型組相比，模針組血漿ET值顯著降低(P ＜0.05)，血清 SOD 值顯著升高(P ＜0.05)。結果表明，電針能降低椎動脈型頸椎病模型兔血漿ET水平，提高血清SOD水平。電針可能通過調節ET水平，緩解血管痙攣，改善組織的缺血、缺氧;通過調節SOD水平，清除機體多余自由基，抑制脂質過氧化反應的作用，保護血管內皮，減輕組織損傷，改善循環灌流，增加椎動脈血流量，而對椎動脈型頸椎病發揮治療作用。

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