α-松油醇的提取純化與穩定性實驗*

彭崢國，薛健，吳曉波，薛雯

(1.中國醫學科學院藥用植物研究所，北京 100193;2.江西中醫學院藥學院，南昌 330004)

α-松油醇是油松節揮發油的主要成分之一［1］，是《中華人民共和國藥典》2010年版新收錄的藥材品種油松節(Lignum Pini Nodi)［2］鑒別的指標性成分，筆者對油松節中α-松油醇的提取純化工藝進行了研究，采用硅膠柱色譜法從油松節揮發油中分離出純度較高的α-松油醇，對其進行了純度方面的分析，并對所得的α-松油醇做了一系列相關的穩定性研究實驗。為滿足藥材鑒別的需要，為藥材質量控制提供了有力的保證，更為α-松油醇的儲存提供了科學依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 6890氣相色譜儀(FID檢測器);電熱恒溫鼓風干燥箱(上海一恒科學儀器有限公司，DHG-9023A);梅特勒PL203型分析天平(瑞士梅特勒-托利多國際股份有限公司);硅膠;α-松油醇標準品購于和光純藥工業株式會社;硅膠預制板(青島海洋化工廠)。

1.2 試藥 油松節藥材由中國醫學科學院藥用植物研究所張本剛教授鑒定;正己烷(美國Fisher公司)為色譜純，其他試劑為分析純。

2 方法與結果

2.1 高純度 α-松油醇的制備

2.1.1 制備方法 采取水蒸氣蒸餾法，從油松節中提取揮發油約2 g。利用薄層色譜法，分析揮發油成分。選取石油醚∶乙酸乙酯作為展開系統，香草醛硫酸作為顯色劑［2］。通過調整展開系統的極性，以達到提取分離α-松油醇，最終確定展開系統為石油醚∶乙酸乙酯(20∶1)。稱取硅膠10 g，石油醚濕法裝柱。稱取揮發油0.2 g，上樣，用石油醚:乙酸乙酯(20∶1)洗脫，前50mL棄去，然后每20mL接為一個餾分，濃縮，點薄層，顯色，確定在130～170mL可以得到較純的α-松油醇。

2.1.2 α-松油醇的純度測定 取油松節揮發油適量，精密稱定，加正己烷制成濃度為0.2 g·mL-1的溶液。取分離所得 α-松油醇適量，加正己烷制成濃度為0.02 g·mL-1的供試品溶液。進樣氣相FID檢測器。

色譜條件:HP-5毛細管色譜柱(0.32mm×30 m，0.25 μm);氫火焰離子化檢測器(FID);進樣口溫度230℃ ;檢測器溫度320℃ ;柱溫以60℃為起始溫度，保持1min，以3℃·min-1升溫至140℃，再以50℃·min-1的升溫至300℃;載氣:氮氣;進樣方式為分流進樣，分流比10∶1;進樣量1 μL。見色譜圖1。圖1可知所提取分離物質為α-松油醇;比較圖1中B和C得油松節揮發油經“2.1”項方法處理后，大大提高了α-松油醇的純度;根據圖1中色譜圖C，用面積歸一化法得出分離所得α-松油醇的純度為95.2%。

圖1 3種溶液的HPLC色譜圖A.α-松油醇對照品;B.油松節揮發油;C.提取分離得 α-松油醇;1.α-松油醇Fig.1 HPLC chromatogram of 3 kinds of solutionA.reference substance of α-terpineol;B.volatile oil from pine nodular branch;C.the extract α-terpineol;1.α-terpineol

2.1.3 工藝驗證實驗 為進一步考察工藝的可靠性及穩定性，取6份藥材按上述提取分離工藝進行驗證實驗，操作方法同前述，6次實驗提取分離得α-松油醇純度的相對標準偏差(RSD)值為3.4%，表明工藝穩定可靠。

2.2 穩定性考察 取油松節中分離所得α-松油醇適量，置于干凈的稱量瓶中，攤成厚度≤5mm的薄層，然后分別置于60℃溫度和照度(4 500±500)lx條件下下放置10 d，每組實驗做2個平行。于第5天和第10天取樣，按純度分析條件測試，純度情況見表1。

表1 α-松油醇高溫及光照處理后純度Tab.1 The purity of α-terpineol treated by high temperature and light %

結果表明:α-松油醇分別在溫度60℃和照度(4 500±500)lx條件下，于第5天和第10天純度都發生了較大的變化。其中分別在高溫和強光照的條件下，均存在第10天純度變化比第5天的純度變化大。由此可以確定α-松油醇應避光低溫儲存。

3 討論

油松節在我國有大量的種植面積［3］，為生產生活中常用的藥材。不同產地的油松節所含的α-松油醇的量存在很大的差異。由于α-松油醇具有很強的揮發性，粉碎的油松節樣品應盡快進行α-松油醇的提取分離。光照實驗的過程中，應保證盛裝樣品的器皿敞口放置，且注意溫度的控制。筆者利用硅膠柱分離法，從油松節中分離得到高純度的α-松油醇，并針對分離得α-松油醇做相關的穩定性實驗，為進一步研究α-松油醇的提取和理化性質奠定了科學基礎。

［1］張林林，薛健.油松節藥材質量研究［J］.醫藥導報，2010，30(2):240－242.

［2］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)［M］.北京:中國醫藥科技出版社，2010:211.

［3］董巖，邱琴.氣相色譜/質譜聯用(GC/MS)法分析油松節揮發油化學成分［J］.理化檢驗:化學分冊，2003，12(12):718－720.