乳腺癌中人表皮生長因子受體-2的表達與血管生成的相關性*

王 剛 趙三平 朱海燕 鄒玉環 王明軍 吳禹錚 徐衛國

乳腺癌的生長和轉移依賴于新生血管生成,腫瘤微血管密度（MVD）是評價腫瘤血管生成的重要指標之一。HER-2是乳腺癌重要的分子標志物，有關HER-2與MVD及乳腺癌臨床病理學特征之間關系一直存在爭議[1-2]。本研究旨在探討HER-2在乳腺癌中的表達及其與血管生成之間的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2006年1月—2007年1月于我院就診的具有完整臨床及病理資料的乳腺癌標本（乳腺癌組）98例，患者平均年齡（48.8±11.2）歲；同時取乳腺根治術標本中癌旁乳腺組織56例為對照組，患者平均年齡（50.8±13.6）歲。患者均為女性，術前均未行抗腫瘤治療。組織學類型：浸潤性導管癌81例，黏液癌、小管癌及乳頭狀癌等其他共17例。臨床分期:Ⅰ~Ⅱ期62例，Ⅲ期36例。組織學分級:高分化17例，中分化58例，低分化23例。腋窩淋巴結狀態:淋巴結轉移陽性（淋巴轉移組）63例，淋巴結未轉移（淋巴未轉移組）35例。

1.2 方法 標本經10%福爾馬林固定，石蠟包埋，4 μm連續切片4張，行HE染色，HER-2、MVD免疫組化染色，PBS代替一抗做空白對照,實驗步驟按試劑盒說明書進行。HER-2主要為細胞膜著色，陽性腫瘤細胞數<10%（-），10%~30%（+），>30%且<50%（++），>50%（+++），其中-、+、++記為陰性表達，+++記為陽性表達。MVD計數標準：CD105陽性染色主要定位于血管內皮細胞的細胞膜和細胞質，先在100倍顯微鏡下尋找微血管密集的5個區域作為熱點，再在200倍鏡下計數MVD值，5個區域的均值為MVD值。

1.3 統計學方法 采用SPSS 11.5統計軟件處理。計量資料以±s表示，2組間均數比較行t檢驗，計數資料組間比較行χ2檢驗，檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 各組乳腺組織中HER-2陽性表達情況及MVD值比較 HER-2陽性率及MVD在乳腺癌組與癌旁組、淋巴轉移組與淋巴未轉移組中比較，差異均有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.2 不同臨床特征的HER-2陽性表達情況及MVD值比較 不同腫瘤大小、組織學分級、TNM分期乳腺癌患者組織中的HER-2陽性率比較，差異有統計學意義（P<0.05）。MVD值在不同組織學分級乳腺癌患者中差異有統計學意義（P<0.05），見表2。

表2 不同臨床特征的HER-2陽性表達情況及MVD值比較

3 討論

HER-2基因定位于染色體17q21，編碼分子質量為185 ku的跨膜蛋白，與表皮生長因子受體（EG?FR）具有高度同源性，正常情況下處于非激活狀態，參與細胞生長、分化的調節。當受到體內外某些因素的作用而激活時具有腫瘤轉化活性。其主要是通過基因擴增和蛋白過度表達，在細胞信號傳遞系統中起橋梁作用，能刺激細胞增生、浸潤和轉移，與乳腺癌等多種腫瘤的生物學行為有關。研究顯示乳腺癌中HER-2/neu蛋白的過度表達約占15%~30%[1]。本研究顯示HER-2在乳腺癌組織中陽性率為20.4%，高于癌旁組織，與上述文獻報道一致。

臨床TNM分期和腫瘤組織學分級一直是臨床評估腫瘤惡性程度和患者預后的常用指標，尤其是腋窩淋巴結狀態更為重要。本研究結果顯示，HER-2陽性表達率在不同臨床TNM分期、組織學分級和淋巴結轉移中差異均有統計學意義，提示HER-2與腫瘤的惡性增殖、進展有關，其表達水平可作為反映乳腺癌生物學行為和判斷乳腺癌預后的重要指標之一。

目前已有多種血管內皮標志物用于標記腫瘤微血管進行MVD計數，其中CD105對血管內皮細胞增生和活性具有高選擇性。有關MVD與乳腺癌臨床病理學特征及預后關系一直存在爭議。本研究應用CD105標記MVD，結果顯示乳腺癌組織中MVD值高于癌旁組織，腋窩淋巴結轉移陽性組中MVD值高于淋巴結未轉移組，低分化組中MVD值高于中、高分化組，表明MVD與乳腺癌臨床病理學特征及預后關系密切。張春玲等[2]亦得出類似結果，但Shivakumar等[3]研究認為MVD可能與早期乳腺癌存在關聯，當腫瘤進展出現壞死和出血后，MVD與乳腺癌臨床病理學特征無相關性；Kanjana?panjapol等[4]用CD34標記MVD，亦發現MVD與乳腺癌復發和轉移沒有相關性，且認為MVD不能作為預測預后不良的指標。結合本文及相關研究[5]，筆者推測選用不同的血管標志物（F-VIII、CD34、CD31、CD105）、腫瘤病理類型不同、切片選擇的差異及計數方法各異可能是造成研究結果不統一的主要原因。

“腫瘤生長依賴于血管生成”這一觀點已為廣大學者所公認。HER-2可能通過促進腫瘤血管生成而促進腫瘤細胞進展。Alicia等[6]用突變的HER-2轉化N1H3T3成纖維細胞以誘導VEGF/血管通透因子（VPF），發現其因缺氧而進一步增強；用抗HER-2抗體處理HER-2過表達的乳腺癌細胞株SKBR-3，結果顯示VEGF/VPF蛋白表達隨劑量增加而降低，且認為HER-2至少部分通過對VEGF/VPF強烈的上調作用，刺激了腫瘤新生血管生成。

[1]Shin SJ,Hyjek E,Early E,et al.Intratumoral heterogeneity of her-2/neu in invasive mammary carcinomas using fluorescenceinsitu hy?bridization and tissue microarray[J].Int J Surg Pathol,2006,14(4):279-284.

[2]張春玲,馬鴻達,白冬雨,等.乳腺浸潤性導管癌微血管生成與轉錄因子Ets1表達之間的關系[J].天津醫藥,2009,37(2):94-97.

[3]Shivakumar S,Prabhakar BT,Jayashree K,et al.Evaluation of se?rum vascular endothelial growth factor(VEGF)and microvessel den?sity(MVD)as prognostic indicators in carcinoma breast[J].J Can?cer Res Clin Oncol,2009,135(4):627-636.

[4]Kanjanapanjapol S,Wongwaisayawan S,Phuwapraisirisan S,et al.Prognostic significance of microvessel density in breast cancer of Thai women[J].J Med Assoc Thai,2007,90(2):282-290.

[5]王剛,徐衛國,鄒玉環.腫瘤微血管密度研究現狀及進展[J].中國醫藥,2008,3(2):117-118.

[6]Alicia ZS,Blanca OS,Mariana GH,et al.RaPid Production of candi?da albicans chlamydosPores in liquid media under various incuba?tion conditions[J].NiPPon Ishinkin Gakkai Zasshi,2006,47(3):231-234.