血小板源性生長因子-BB在肺癌中的表達和意義

陳基善 周秦

(永州職業技術學院附屬醫院病理科 湖南永州 425000)

肺癌是最常見的肺原發性惡性腫瘤,占全世界癌癥死因的首位,近年來我國肺癌的發病率和病死率均迅速上升。肺癌早期癥狀不明顯,往往錯過最佳的診斷和治療時機,因而提高診斷水平是延長患者存活期的關鍵。血小板源性生長因子-BB(PDGF-BB)是重要的內皮生成因子,具有促細胞分裂增殖、細胞趨化,以及血管收縮等生物效應,是決定腫瘤大小、轉移、復發和預后的重要因素[1]。筆者對我院肺癌患者及肺部良性病變患者PDGF-BB的表達水平進行檢測,以探討其在肺癌發病機制中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

肺癌患者30例,均為我院2006年12月至2010年6月收治的住院患者,經胸片、胸CT、痰脫落細胞學、纖維支氣管鏡活檢或胸腔積液脫落細胞學檢查確診,無放化療史,剔除病理診斷不明確者、高血壓病和糖尿病患者。其中男性25例,女性5例,年齡45～85歲,平均(60.7±9.4)歲。組織學分型:鱗癌11例,腺癌10例,小細胞癌9例。按1997年國際抗癌聯盟(UICC)非小細胞肺癌分期標準進行分期:Ⅱ期4例、Ⅲ期12例、Ⅳ期14例。肺部良性病變患者30例,既往無心、肝、腎、肺等重要臟器疾病。家族中無腫瘤病史。其中男性24例,女性6例,年齡50～72歲,平均(59.2±8.5)歲。肺炎16例、支氣管擴張癥8例、慢性支氣管炎6例。2組患者在年齡、性別方面無統計學方面無統計學意義,具有可比性,P>0.05。

1.2 方法

1.2.1 血清PDGF-BB濃度的測定 清晨取2組患者的空腹靜脈血3mL,在不加入抗凝劑的情況下迅速離心10min分離出血清,置-70℃冷藏貯存待檢。采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法檢測2組患者的血清PDGF-BB,PDGF-BB定量ELISA試劑盒購自上海森雄科技實業有限公司,操作步驟嚴格按照說明書進行,繪制標準曲線。

表1 2組患者血清及組織中PDGF-BB檢測比較(±s)

表1 2組患者血清及組織中PDGF-BB檢測比較(±s)

注:觀察組與對照組相比,*P<0.05

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1.2.2 免疫組織化學染色 免疫組織化學(SABC法)檢測PDGF-BB鏈的表達水平。麥默通穿刺活檢標本和術后切除標本經10%多聚甲醛固定后,石蠟包埋,制成4μm切片,將固定切片置于60℃恒溫箱中烘烤30min,切片常規脫蠟水化,3%雙氧水即用型,室溫10min滅活內源性酶;檸檬酸緩沖液進行高溫高壓抗原修復,山羊血清封閉非特異性抗原,滴加一抗濕盒內4℃過夜,依次滴加山羊抗兔IgG-HRP多聚體,蘇木素復染,脫水、中性樹膠封固。以用0.1mol/L PBS代替一抗作為陰性對照,選已知陽性的切片作為陽性對照。兔抗人PDGF-BB抗體和SABC免疫組化試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司,儀器為Elecys 2010全自動電化學發光免疫分析儀。

1.3 陽性結果判定方法

PDGF-BB的表達先在在X400倍視野下每張切片隨機觀察10個視野,根據細胞染色程度評分:染色深度以多數細胞為準,無著色為0,淺著色為1,深著色為2;再為切片中陽性著色范圍評分:無著色為0,著色<1/3為1,著色＞1/3為2,彌漫著色為3,最后將上述2項得分相加,得分≥3為陽性。

1.4 統計學方法

用SPSS 11.0統計軟件。記數資料采用均數±標準差表示,組間計量資料采用t檢驗,P<0.05差異有統計學意義。

2 結果

觀察組患者的血清PDGF-BB水平為(378.56±34.26)pg/mL、PDGF-BB鏈陽性表達率分別為66.7%(20/30),均顯著高于對照組,P<0.05,見表1。

3 討論

肺癌為肺部原發性惡性腫瘤,是最常見的惡性腫瘤之一,死亡率極高,且其發病率和死亡率均呈上升趨勢。早期肺癌不易早發現,對該病如能做到早期發現、早期診斷、早期治療,預后效果很好[2]。PDGF主要由血小板、部分腫瘤細胞、成纖維細胞、平滑肌細胞等產生,與腫瘤血管生成、腫瘤轉移密切相關。正常組織內PDGF的表達受到嚴格的調控。本研究結果表明肺癌患者血清和組織中的PDGF-BB的水平均顯著高于肺部良性病變組,P<0.05。這說明PDGF-BB參與了肺癌血管的形成,有利于形成有功能的新生血管系統,從而間接促進了腫瘤的生長。其在肺癌組織中的高表達,說明PDGF能夠促進結締組織間質細胞生長,細胞分裂增殖,誘導細胞產生V型膠原,調節Ⅲ型及Ⅳ型膠原的合成,其在加速腫瘤細胞增殖,促進腫瘤的侵襲與轉移。此外,PDGF抑制癌細胞凋亡和使5-Fu抗腫瘤敏感性降低,并與其受體結合可提高細胞外機質(ECM)的降解[3]。綜上所述,隨著肺癌發病率的不斷上升,只有不斷提高肺癌的診斷水平才能盡量使患者得到有效的治療。PDGF-BB在肺癌的發生發展中可能起著重要作用,在腫瘤的診斷和預后判斷中起作用,其表達的檢測有一定的臨床指導意義。但具體作用機制有待進一步探討。

[1]黃竹英,聶新民.血小板源性生長因子在肝細胞肝癌中的表達[J].現代醫藥衛生,2007,23(21):3167～3169.

[2]秦建文,周靜敏,馬淑萍.非小細胞肺癌血清VEGF和PDGF測定的臨床意義[J].天津醫藥,2007,35(12):897～899.

[3]周靜敏,馬淑萍,秦建文,等.肺癌患者血清細胞生長因子及受體聯合檢測的臨床意義[J].中國腫瘤臨床,2006,33(18):1054～1060.