去甲腎上腺素致狗髖關節一過性滑膜炎的機理研究

彭朝林

彭朝林:女，本科，主管護師，護士長

近期有文獻［1，2］表明，可以采用低濃度去甲腎上腺素誘導狗髖關節一過性滑膜炎的產生并推測去甲腎上腺素可能在一過性滑膜炎發病機理中起著重要作用，但其具體機理還不明確。已有研究表明［3］，去甲腎上腺素可以通過調節胞漿內鈣離子濃度而影響血壓。因此，本研究擬探討去甲腎上腺素對股骨頭局部血循環和關節滑液鈣離子濃度的影響。現報道如下。

1 材料與方法

1.1 動物與試劑

選擇年齡在2～3個月的幼狗80只(中山醫科大學動物實驗中心雜種狗)，體重5～7 kg，♂♀各半。尼群地平納米片(河北賽克藥業有限公司，批號20031201，規格:10 mg/粒)。去甲腎上腺素(NA)(國藥準字H12020621)。

1.2 動物模型建立

將80只狗隨機分為兩組，各40只。第1組(A組)，每周在一側髖關節腔內注入2‰ 低濃度NA 1 ml(2 μg)和1 ml生理鹽水，對側注入生理鹽水2 ml作對照;第2組(B組)，每周在一側髖關節腔內注入2‰低濃度NA 1 ml(2 μg)和1 ml 10 mg/L尼群地平溶液，對側注入生理鹽水2 ml作對照。

1.3 關節內壓及股骨頭血流檢測方法

應用99mTc－MDP三相骨顯像方法［4］。在注入前和注入后行關節內壓測定和99mTc－MDP三相骨顯像，隨后將狗處死進行病理組織學檢查。每組于11個時間點即為注入前、注入后即時、注入后 3、6、12、24、48、72 h 及 1、2、4 周。每只狗強制式注入99mTC Tc－MDP 1ml，隨機在股骨頭連續顯像10 min，獲得雙側股骨頭的顯像時間－放射線曲線，第1 min為血流相，第2～10 min為血相，又于180 min后再次顯像，即可獲得靜態相線代謝相，計算其核素活性計數，顯示股骨頭血流狀態。機器為法Sophy Camera D57型ECT同位顯像儀。髖關節內壓測定，置幼狗于屈曲位，經髖關節內側相當于股骨溝中點處，刺入帶側孔的6號硬膜外穿刺針頭，直達股骨頸，然后退后少許進入關節腔，連接IMC骨內壓測定儀，記錄關節內壓。

1.4 血清鈣離子測定

在注入前和注入后11個時間點抽取關節滑液100 μl，采用血清鈣甲基麝香草酚藍顯色EDTA褪色測定法［5］對關節滑液鈣離子進行測定。于抽取關節液后將狗麻醉處死行病理組織學檢查，組織石蠟包塊切片，伊紅－蘇木素染色。

1.5 統計學處理

數據處理采用SPSS 13.0軟件，重復測量資料采用方差分析。α =0.05。

2 結果

2.1 兩組股骨頭平均血流量之間的變化見表1。兩組間關節內壓的變化見表2。兩組關節滑液鈣離子濃度的變化見表3。

2.2 病理組織學檢查

A組實驗側與B組實驗側相比，注入后3 h無明顯變化，6～72 h滑膜有灶性充血，表面粗糙，關節內有積液。A組滑膜絨毛增生普遍存在，布滿關節腔，無壞死病灶;鏡下見:局部有滑膜水腫，少量血管輕度擴張;滑膜絨毛樣增生顯著，膠原大量沉積，可見透明性變，這種表現以局灶性為主而非彌漫性。B組關節大部分正常。A、B兩組無1例出現股骨頭壞死。

表1 去甲腎上腺素及尼群地平對兩組兩側股骨頭平均血流量的影響( ± s，ml·g － 1·min － 1 )

表1 去甲腎上腺素及尼群地平對兩組兩側股骨頭平均血流量的影響( ± s，ml·g － 1·min － 1 )

注:﹡與對照側相比，P ＜0.05，﹡﹡ P ＜0.01，與對照側相比，＊P＜0.05，＊＊P ＜0.01

時間 實驗側A組(n=40) B組(n=40)對照側(n=80)注藥前1758±20 1745±18 1723±26注藥后即時 2937±20﹡﹡＊ 3287±110 3559±29注藥后3 h 7492±56﹡﹡＊＊ 8634±162 8892±31注藥后6 h 1624±117﹡﹡＊ 1868±93 2027±125注藥后12 h 948±29﹡﹡ 1053±103﹡ 1197±86注藥后24 h 966±11﹡﹡ 1024±16﹡﹡ 1118±19注藥后48 h 1110±9﹡﹡＊＊ 1210±5﹡ 1278±45注藥后72 h 1131±41﹡﹡ 1234±13﹡ 1320±25注藥后1周 1173±22﹡ 1210±20 1270±13注藥后2周 3307±30 3489±34 3902±31注藥后4周1633±13 1644±45 1674±11

表2 去甲腎上腺素及尼群地平對兩組兩側關節內壓的影響 (± s，mmHg)

表2 去甲腎上腺素及尼群地平對兩組兩側關節內壓的影響 (± s，mmHg)

注:與對照側相比，﹡ P ＜0.05，﹡﹡ P ＜0.01，與對照側相比，＊＊P ＜0.01

時間 注藥側A組(n=40) B組(n=40)對照側(n=80)注藥前0.200 ±0.018 0.232 ±0.020 0.230 ±0.026注藥后即時 14.100 ±0.231 14.018 ±0.221 14.000 ±0.183注藥后3 h 2.069±0.040 ﹡﹡＊＊1.174 ±0.070 1.010 ±0.006注藥后6 h 0.800 ±0.029 ﹡ 0.500 ±0.056 0.400 ±0.014注藥后12 h 3.000 ±0.019 ﹡﹡ 0.800 ±0.070 0.500 ±0.022注藥后24 h 4.000 ±0.092 ﹡﹡ 1.400 ±0.067 ﹡1.000 ±0.039注藥后48 h 4.500 ±0.048 ﹡﹡ 1.600 ±0.078 ﹡1.300 ±0.018注藥后72 h 4.200 ±0.018 ﹡﹡ 1.200 ±0.060 1.000 ±0.013注藥后1 周 4.000 ±0.015 ﹡﹡ 1.300 ±0.056 1.200 ±0.012注藥后2 周 2.000 ±0.022﹡ 1.50 ±0.067﹡ 1.000±0.016注藥后4周0.290 ±0.019 0.26 ±0.062 0.250 ±0.008

表3 去甲腎上腺素及尼群地平對兩組兩側關節滑液鈣離子濃度測定( ± s，ml·g － 1·min － 1 )

表3 去甲腎上腺素及尼群地平對兩組兩側關節滑液鈣離子濃度測定( ± s，ml·g － 1·min － 1 )

注:與對照側相比，﹡ P ＜0.05，﹡﹡ P ＜0.01

時間 實驗側(n=4)A組(n=40) B組(n=40)對照側(n=80)注藥前2.98 ±0.54 2.97 ±0.85 2.99 ±0.95注藥后即時 2.04 ±0.81 2.06 ±0.55 2.05 ±0.84注藥后3 h 1.88 ±0.49 ﹡ 2.16 ±0.67 2.24 ±0.17注藥后6 h 1.77 ±0.55 ﹡﹡ 2.35 ±0.45 2.45 ±0.64注藥后12 h 1.89 ±0.34 ﹡ 2.45 ±0.78 2.55 ±0.76注藥后24 h 1.92 ±0.44 ﹡ 2.55 ±0.34 2.60 ±0.45注藥后48 h 1.95 ±0.46 ﹡ 2.65 ±0.65 2.68 ±0.74注藥后72 h 1.99 ±0.34 ﹡ 2.67 ±0.54 2.77 ±0.43注藥后1 周 2.10 ±0.44 2.77 ±0.89 2.87 ±0.34注藥后2 周 2.21 ±0.54 2.78 ±0.34 2.89 ±0.78注藥后4周2.13 ±0.56 2.82 ±0.78 2.79 ±0.78

3 討論

急性髖關節一過性滑膜炎又稱毒性滑膜炎、過敏性髖、急性髖關節暫時性滑膜炎，是小兒常見的髖關節疾患，其發病機理還不明確。有研究［1，6］采用低濃度去甲腎上腺素誘導一過性髖關節滑膜炎可以取得較好的效果，并推測去甲腎上腺素可能在急性髖關節一過性滑膜炎發病機理中起著重要作用。研究［3］證實去甲腎上腺素能誘導人主動脈血管平滑肌細胞增殖、細胞內鈣離子濃度升高和三磷酸肌醇受體－1(IP3R－1)蛋白表達增強，這一效應能被鈣拮抗劑維拉帕米抑制。

在本研究中，從注藥后即時起，A組與對照側相比，血流量明顯增加，隨著時間延長，血流量逐漸減少但與對照側相比仍具有統計學意義，并持續到給藥后1周時。B組與對照側相比，實驗側血流量給藥后即時增加，只在給藥后12～72 h之間有統計學意義，隨著時間延長，逐漸降低，但降低幅度遠低于A組實驗側。這說明去甲腎上腺素對髖關節血流量的影響能被鈣離子拮抗劑尼群地平部分阻斷。另從關節內壓實驗結果表明，NA注射后3 h，A組關節內壓隨之增高，與對照側相比具有統計學意義，隨著炎癥消退而逐漸恢復正常;B組關節內壓較對照側相比有所升高，但只在給藥后24、48 h和給藥后2周時才具有統計學差異，推測與其藥物代謝有關［7］，隨著尼群地平血藥濃度逐漸降低，其對去甲腎上腺素拮抗效應也逐漸降低。這一推測在關節滑液鈣離子濃度測定中進一步被證實，給藥后，A組實驗側與對照側相比，鈣離子濃度明顯降低，而B組實驗側與對照側相比，鈣離子濃度下降不明顯。從而表明去甲腎上腺素對髖關節血流及壓力的影響可能是通過調節鈣通道，使Ca2+內流增加和細胞內鈣池釋放引起〔Ca2+〕i增加有關。

總之，本實驗研究表明去甲腎上腺素可能在一過性髖關節滑膜炎中通過調節細胞內鈣離子濃度而影響關節內壓。

［1］程錦珍，盧小虎，李江林，等.低濃度去甲腎上腺素對髖關節局部組織影響的實驗研究［J］.醫學理論與實踐，2008，21(11):1241－1243.

［2］盧小虎，劉尚禮，徐忠世，等.髖關節一過性滑膜炎99mTc－MDP三相骨顯像與病理組織學變化關系的實驗研究［J］.中國誤診學雜志，2006，6(5):911 －912.

［3］王佑華，周 端，曹 敏，等.三七花總皂普對去甲腎上腺素誘導人主動脈血管平滑肌細胞增殖的影響及機制［A］.第三屆世界中西醫結合大會論文摘要集［C］.北京:中醫中西醫結合學會，2007:755.

［4］梁九根，呂 斌，盧小虎，等.三相骨顯像對髖關節一過性滑膜炎動物實驗研究［J］.中華核醫學雜志，1994，14(4):200 －202.

［5］尹濟群，張新暖，馮敬池，等.血清鈣甲基麝香草酚藍顯色EDTA褪色測定法［J］.臨床檢驗雜志，1996，14(5):247 －249.

［6］盧小虎，肖德明，林博文，等.去甲腎上腺素誘導髖關節一過性滑膜炎與股骨頭缺血性壞死關系的動物實驗［J］.中國臨床康復，2004，8(32):7340 －7341.

［7］楊明世，崔福德，岳 鵬，等.尼群地平緩釋膠囊在家犬體內的藥動學與相對生物利用度［J］.沈陽藥科大學學報，2003，20(2):84 －87.