ACL TOP凝血分析系統(tǒng)的性能評價(jià)

翟艷紅，樊 瑾，趙 娟*

(1首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院，北京100026;2衛(wèi)生部北京醫(yī)院)

ACL TOP全自動(dòng)凝血分析儀是美國IL公司生產(chǎn)的最新型多參數(shù)凝血分析儀，可以同時(shí)進(jìn)行凝固法、發(fā)色底物法和免疫比濁法的檢測，目前在我國應(yīng)用比較廣泛［1］。我院于2009年引入該儀器，儀器正式使用前，根據(jù)NCCLS相關(guān)文件的要求，對儀器的性能進(jìn)行評價(jià);同時(shí)與我科原來使用的ACL 9000型全自動(dòng)凝血分析系統(tǒng)進(jìn)行比對，判斷兩種檢測體系是否有相關(guān)性，檢驗(yàn)結(jié)果能否具有延續(xù)性;在此基礎(chǔ)上建立了適用于本實(shí)驗(yàn)室的參考區(qū)間。

1 材料與方法

1．1 材料 ACL TOP全自動(dòng)凝血功能分析儀、ACL 9000全自動(dòng)凝血功能分析儀(IL公司，美國)。凝血檢測均使用IL公司提供的配套試劑、質(zhì)控品(正常水平、異常水平)和校準(zhǔn)品。隨機(jī)選取40例新鮮標(biāo)本進(jìn)行抗干擾及比對實(shí)驗(yàn);收集300例健康受試者血漿標(biāo)本建立本實(shí)驗(yàn)室的參考區(qū)間，其中女280例(13～78歲)、男20例(14～55歲)。全血標(biāo)本用枸櫞酸鈉(109 mmol/L)抗凝真空采血管采集，抗凝劑和血漿比例1∶9，采集完畢于3 000 r/min離心10 min，4 h內(nèi)上機(jī)完成檢測。

1．2 方法

1．2．1 檢測項(xiàng)目及方法 凝固法選取凝血酶原時(shí)間(PT)、活化的部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、凝血酶時(shí)間(TT)、纖維蛋白原(Fib);免疫比濁法選取D-二聚體(D-dimer);發(fā)色底物法選取纖溶酶原(PLG)。

1．2．2 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 用正常水平和異常水平質(zhì)控品在ACL TOP血凝儀上分別測定 PT、APTT、TT、Fib、PLG;D-dimer采用正常水平質(zhì)控和校準(zhǔn)品進(jìn)行檢測。日內(nèi)重復(fù)性實(shí)驗(yàn)連續(xù)測定20次，2 h內(nèi)完成檢測，計(jì)算均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)。日間重復(fù)性實(shí)驗(yàn)每天測定1次，連續(xù)測定20 d，計(jì)算均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)。

1．2．3 比對實(shí)驗(yàn) 選取凝血時(shí)間正常和異常的住院患者血漿40例，分別在ACL TOP血凝儀和ACL 9000 血凝儀上平行檢測 APTT、PT、TT、Fib、D-dimer，對檢測結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析。

1．2．4 建立參考區(qū)間 取300例健康受試者抗凝血漿，在 ACL TOP 血凝儀上檢測 PT、APTT、TT、Fib，計(jì)算各項(xiàng)目參考區(qū)間［2］。

1．2．5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS15．0軟件分析包對重復(fù)性實(shí)驗(yàn)和參考區(qū)間建立結(jié)果進(jìn)行描述性分析，比對實(shí)驗(yàn)結(jié)果用配對t檢驗(yàn)。以P≤0．05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果

2．1 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 見表1。各項(xiàng)目日內(nèi)及日間CV值均＜6%。

2．2 與 ACL 9000的比對 對 PT、APTT、TT、Fib和D-dimer的相關(guān)性分析，結(jié)果表明項(xiàng)目APTT的相關(guān)性較差(r=0．834)，PT、TT、Fib 和 D-dimer的相關(guān)性較好(r分別 =0．992、0．927、0．989、0．977)。經(jīng)配對t檢驗(yàn)，F(xiàn)ib和APTT的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．01)。

表1 ACL TOP血凝儀日內(nèi)及日間精密度測定結(jié)果(n=20)

2．3 本實(shí)驗(yàn)室參考區(qū)間的建立 經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)各項(xiàng)檢測結(jié)果均呈正態(tài)分布(P＞0．05)，根據(jù)均值±1．96×SD得出本實(shí)驗(yàn)室的參考區(qū)間，PT為8．8～12．8 s，APTT 為 26 ～37 s，TT 為 12 ～16 s，F(xiàn)ib 為2．0 ～4．0 g/L，D-dimer為0 ～400 ng/ml。

3 討論

隨著常規(guī)凝血功能檢測標(biāo)本的逐漸增多和臨床對于凝血功能檢測項(xiàng)目的需求日益增加，對臨床凝血功能檢測儀的要求越來越高，檢測速度快、平均成本低、結(jié)果可靠的凝血儀的臨床需求越來越高［2］。近年來，涌現(xiàn)出一定數(shù)量的符合這些條件的全自動(dòng)凝血分析儀，ACL TOP就是其中一員，它采用凝固法、免疫比濁法和發(fā)色底物法檢測數(shù)十個(gè)凝血相關(guān)指標(biāo)，具有高度自動(dòng)化、快速檢測和操控界面先進(jìn)的特點(diǎn)。鑒于我科一直使用IL公司的ACL 9000全自動(dòng)凝血分析儀，為了在提高檢測能力的同時(shí)，保證檢驗(yàn)結(jié)果的延續(xù)性，我科引進(jìn)了ACL TOP全自動(dòng)凝血分析儀。安裝調(diào)試后，工程師已經(jīng)設(shè)定了儀器、項(xiàng)目的諸多參數(shù)，并進(jìn)行了初步的性能驗(yàn)證，為了確保檢測系統(tǒng)平穩(wěn)的更換，在此基礎(chǔ)上，我們對其進(jìn)行了進(jìn)一步的評估，并建立了適合于本檢測系統(tǒng)的參考區(qū)間。

本研究中，各個(gè)評估項(xiàng)目的批內(nèi)變異系數(shù)在0．69% ～4．32%之間，日間變異系數(shù)在 1．07% ～5．62% 之 間，與 其 他 檢 測 系 統(tǒng)，如 CA 7000［3］、STAR［4］的評估結(jié)果類似，也符合 CLIA’88的要求，可見該血凝分析儀的3種檢測方法均具有良好的精密度。由于我科一直使用IL公司的ACL 9000型全自動(dòng)凝血分析儀，關(guān)于檢測系統(tǒng)更改對常規(guī)凝血檢測項(xiàng)目的影響未見深入報(bào)道，為了保證受試者(尤其是口服華法令的患者)凝血檢驗(yàn)結(jié)果的延續(xù)性，我們進(jìn)行了新舊兩種檢測系統(tǒng)的相關(guān)性研究。結(jié)果表明，兩種檢測系統(tǒng)對同一項(xiàng)目的相關(guān)性尚可(相關(guān)系數(shù)在0．834～0．992之間)，然而APTT和Fib兩項(xiàng)的斜率和截距并不好，經(jīng)配對t檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)兩種檢測系統(tǒng)得到的APTT和Fib檢測結(jié)果的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這和唐寧等［5］的報(bào)道不同，可能是由于ACL 9000系統(tǒng)檢測原理與ACL TOP不同、抗干擾能力也不如ACL TOP，也可能是由于我們所選標(biāo)本以婦科和產(chǎn)科居多造成，需要下一步實(shí)驗(yàn)來證實(shí)。鑒于新老系統(tǒng)之間的這種差異，針對我們實(shí)驗(yàn)室婦科和產(chǎn)科患者居多的特點(diǎn)，我們建立了適合本實(shí)驗(yàn)室的參考區(qū)間。本文通過對300例健康體檢人群的調(diào)查，建立了基于本醫(yī)院特色的參考區(qū)間。結(jié)果類似于儀器本身提供的參考區(qū)間，但有部分的調(diào)整。

綜上所述，ACL TOP全自動(dòng)凝血分析儀具有很高的精密度和檢測速度，但其與IL公司此前一些型號的自動(dòng)凝血儀的部分檢測項(xiàng)目不具有可比性，如果更換系統(tǒng)的話，必須對新系統(tǒng)進(jìn)行一定的評估，并建立針對自己實(shí)驗(yàn)室的參考區(qū)間。只有這樣才能保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，為臨床提供可靠的結(jié)果。

［1］Appert-Flory A，F(xiàn)ischer F，Jambou D，et al．Evaluation and performance characteristics of the automatedcoagulation analyzer ACL TOP［J］．Thromb Res，2007，120(5):733-743．

［2］Monagle P，Barnes C，Ignjatovic V，et al．Developmental haemostasis［J］．Thromb Haemost，2006，95(2):362-372．

［3］Fischer F，Appert-Flory A，Jambou D，et al．Evaluation of the automated coagulation analyzer Sysmex CA 7000 ［J］．Thromb Res，2006，117(6):721-729．

［4］Flanders MM，Crist R，Safapour S，et al．Evaluation and performance characteristics of the STA-R coagulation analyzer［J］．Clin Chem，2002，48(9):1622-1624．

［5］唐寧，曹文靜，夏汛生，等．ACL TOP全自動(dòng)分析系統(tǒng)的性能評價(jià)［J］．醫(yī)療設(shè)備信息，2007，22(2):48-51．