野生及雜交盤羊的電刺激采精技術研究

高俊杰，潘永斌，陳海軍，王東軍，劉永祥，張 冰，王 瀟，張居農

（1.內蒙古通遼市畜牧獸醫科學技術研究所，通遼 028000；2.新疆兵團農九師170團；3.內蒙古博恩藥業；4.新疆醫科大學基礎醫學院；5.解放軍第474醫院；6.石河子大學動物科技學院，新疆 832003）

精液采集是人工授精的重要環節，常用方法主要有假陰道法和按摩法，已在牛、馬、羊、豬和雞等畜禽上成功應用［1］。而在野生動物或人工馴養的野生動物上，由于其野性強、性情暴烈，常采用電刺激法采集精液，如海貍鼠［2］、大熊貓［3-4］、鹿［5］、猴［6-7］、林麝［8］、黑熊［9］、烏蘇里貂等［10-11］，而國內對于盤羊的相關研究未見報道［12］。

盤羊（Ovis ammon），別名大頭羊、大角彎羊，屬于哺乳綱、偶蹄目、牛科、羊亞科的綿羊屬，是國家瀕危滅絕的II級重點保護動物，已經列入《聯合國瀕危動物植物名錄》，主要分布在我國的內蒙古、甘肅、青海、新疆和西藏以及亞洲的蒙古、印度北部、錫金等地［12］。為開發利用特種品種資源，本實驗于2008年7月—2009年12月，分別在新疆和內蒙古對野生盤羊及雜交后代進行了電刺激采精技術的研究與探討，現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 公羊的飼養及管理 選用舍飼條件下15只體質較好的1～5歲成年公羊。平均體重70 kg，舍飼時間超過1年，對飼養人員具有一定的親和性。供試羊的日糧組成主要為青貯、干草、玉米等，1日喂2次，清潔飲水。采精前對公羊禁食24 h，不禁水。

1.2 儀器及藥品 DZCJ-4型電子采精儀（吉林大學生產，輸出電壓 0～20V）；OLYMPUS 生物顯微鏡；5～20mL一次性注射器；載玻片和蓋玻片；靜松靈注射液（蘭州正豐制藥有限責任公司，5mL∶100 mg），蘇醒靈。

1.3 公羊的生殖保健 采用張春禮、張居農等的公羊生殖保健的技術程序［13］，對參加本實驗的野生及雜交盤羊實施生殖保健。

1.4 麻醉與保定 采精前對公羊進行麻醉，麻醉方法采用肌肉注射靜松靈（2 mg/kg）。數分鐘后，迅速將其推倒，側臥保定，頸部下墊草袋，1人保定頭部。剪盡包皮和尿道口周圍的被毛，用生理鹽水洗凈擦干，溫水灌腸，排出肛門中的積糞。

1.5 電刺激采精 將涂有凡士林的電子采精器探棒緩慢插入直腸內8～12cm，使探棒線圈貼緊腰椎腹側面。打開電刺激采精儀電源開關，調節輸出電壓，由低至高，先后順序為2～20V，每檔刺激持續時間3～5 s（秒），每次間歇3～1 s，逐步篩選出能適宜采精的輸出電壓和刺激時間。用集精杯分段接精液，并迅速送檢。采精結束時，將采精儀各調節旋鈕逐檔回零，切斷電源，然后拔出電極棒。

取出探棒，洗凈、消毒。直腸內涂抹普魯卡因油劑青霉素，注射0.3～0.5mL蘇醒靈，解除保定。

1.6 精液品質檢查 按常規的精液檢查方法（目測評定法）檢查精液的顏色、精液量、精子活力和密度。

2 結果與分析

2.1 生殖保健對盤羊電刺激采精成功率的影響 本實驗分別在3—5月非繁殖季節和8—12月繁殖季節對未經生殖保健的4只野生公盤羊電刺激采精，結果如表1。實驗發現，未經生殖保健的盤羊對各種電刺激的輸出電壓均有不同程度的反應。其中，對低電壓的電刺激反應不十分敏感，陰莖勃起緩慢，很少出現射精動作；采用高電壓和長時間的電刺激，公羊有比較強烈的肢體反應（強直反應）和間斷的陰莖勃起反應，有時出現射精動作。

表1 未經生殖保健的盤羊電刺激采精情況

本實驗在3—4月份對未經生殖保健的公羊均未能采出精液，這種現象與張居農等［14-16］在綿羊上觀察的情況相同。而在8—9月份，對可以電刺激采精的1、9、10號公盤羊的精液鏡檢發現，只有極個別的精子在輕微擺動，精子活力極差。造成這種現象的原因可能與野生盤羊不適應舍飼環境，公羊未進行生殖保健等有關。

針對以上問題，本實驗對4只野生公盤羊采用張春禮等的“低劑量睪酮+促卵泡素”公羊生殖保健的技術程序［13，17］進行處理，電刺激采精結果如表2。從表2可見，經過短期生殖保健處理，隨著采精次數的增加，公羊對電刺激采精變得越來越敏感，并逐漸形成了在6～8V電壓的刺激下，就能迅速發生陰莖勃起和射精等現象。本實驗結果表明，公羊生殖保健不僅恢復了生殖機能，而且也為成功電刺激采精奠定了基礎。

表2 經生殖保健的盤羊電刺激采精情況

2.2 靜松靈麻醉保定對公羊電刺激采精的影響 采用張春禮等［13］的公羊生殖保健方法處理后，公盤羊的電刺激采精情況如表3。從表3可以看出，采用靜松靈麻醉保定后，4只公盤羊除10號外，電刺激采精均能采出正常精液，其精液品質達到正常人工授精標準。

表3 靜松靈麻醉保定后公盤羊電刺激采精情況

3 討論

本實驗注意到，在采精過程中如果輸出電壓過高，電刺激持續時間過長，間歇時間過短，都會造成公羊的肢體強直而影響采精效果。所以在電刺激采精過程中，對公羊要遵循電刺激電壓由低到高、刺激時間由短到長、間歇時間由長到短、反復刺激、循序漸進的原則，使公羊逐漸適應并建立起對電刺激和射精的條件反射，王玉珠等［18］和張居農等［19］在犬和狼的麻醉與電刺激采精應用研究中亦有此經驗與體會。

4 結論

采用公羊生殖保健的技術程序處理后，以DZCJ-4型電子采精儀對野生及雜交盤羊進行電刺激采精，實施合適劑量的靜松靈麻醉保定，采集的精液品質可以達到正常人工授精的標準并用于生產實踐。

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