方斑東風螺配合飼料中硒的添加量研究

譚燕華 王冬梅 沈文濤 方 哲 鮑時翔

硒具有多種重要的生物功能，是動物生命活動所必需的元素，硒的缺乏或其含量的不足都會影響動物正常的生理機能。1973年聯合國宣布“硒是生命的必需，硒是生命的火種”，足見硒對生命的重要性。硒作為動物體內谷胱甘肽過氧化物酶和硒蛋白、硒核酸的組成成分來發揮生理功能。有關硒在人體和陸生動物體內的生理功能的研究較多，在水產動物上的研究報道較少。近些年，硒對水產動物的影響引起了人們的高度重視，有很多研究報道證明，硒能夠影響水產動物的生長性能、抗氧化能力和免疫功能。在飼料中添加硒，能夠顯著提高鱸魚的特定增長率、成活率、組織蛋白含量、氧化酶活力。幼鯉在飼料中硒含量0.4 mg/kg時達到最大增重率、成活率和最低餌料系數，在硒含量0.3 mg/kg和0.5 mg/kg時免疫功能和抗病力最強。飼料中硒含量顯著影響皺紋盤鮑血清中各類抗氧化酶的活力，并且和VE有交互作用。適宜含量的硒能夠促進水產動物的生理機能，長期硒攝入不足會引起大西洋鮭（Salmo salar）生長遲緩、谷胱甘肽轉移酶活性降低等缺乏癥，餌料硒不足和過量都會引起暗紋東方鲀魚苗的成活率降低，硒過量還會產生畸形率較高的中毒癥狀。因此，硒在水產動物飼料中的添加量的研究具有非常重要的意義。

方斑東風螺，俗稱花螺，是近幾年東南沿海新興的養殖品種，其肉質鮮美、營養豐富，養殖技術簡單、利潤高，是海南省第一大養殖貝類。當前以小雜魚為餌養殖東風螺，存在很多不便和弊端，急需人工配合飼料的供給。市場上曾出現過商品配合飼料，但由于養殖效果差、物理性能不能滿足生產要求，不能被養殖戶接受而退出市場。品質優良的飼料不僅各種營養素全面，而且各種營養素的含量要適宜。飼料中各種營養素適宜含量的確定有賴于嚴謹的科學試驗，因此，要想生產出優質的方斑東風螺飼料，必須全面開展方斑東風螺各種營養素需求的研究。東風螺的營養需求研究剛剛起步，僅有東風螺蛋白質、脂肪、糖、鈣和磷需求量的報道，關于微量礦物元素和維生素的需求研究未見報道，故遠遠不能滿足科學配制飼料的需要。本實驗在前期營養研究的基礎上，擬研究硒在東風螺配合飼料中的添加量，以期為東風螺礦物添加劑和人工配合飼料的研制和開發提供依據。

1 材料和方法

1.1 材料

實驗采用海南省海峰育苗場生產的同一批螺苗，用實驗基礎飼料馴化2周，使之適應配合飼料，饑餓2 d后，選擇體重(2.7±0.15)g的螺用于實驗。

以魚粉和豆粕為主要蛋白源、魚油為主要脂肪源配制基礎飼料，飼料配方及營養成分見表1。所有固體原料粉碎過80目篩后，按配比稱量在混合機中混合均勻。在基礎飼料中分別添加Na2SeO30.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg/kg，配制 6 種濃度梯度的實驗飼料，編號分別為 F1、F2、F3、F4、F5、F6。按比例加入魚油和水，攪拌均勻，制成飼料顆粒，冷凍保存。經測定6種實驗飼料硒的含量分別為 1.5、1.7、1.9、2.1、2.3、2.5 mg/kg。

表1 基礎飼料配方及營養成分

1.2 方法

1.2.1 東風螺養殖管理

實驗于2009年10月6日至12月16日在海南省文昌市龍樓鮑魚養殖場進行。每個實驗組設3個平行。養殖實驗在42 cm×48 cm×40 cm的塑料箱中進行，流水養殖，支架上鋪3～4 cm厚度的細沙，水深25 cm，每箱放養50只幼螺。自然海水養殖，不調節鹽度和溫度，養殖期間，鹽度變化范圍24‰～29‰，水溫變化范圍 19.1～30 ℃，pH 值 8.0～8.5，每天 17：00 投餌，1 h后收集殘餌，每天10：00測定水溫和鹽度。

1.2.2 實驗餌料及組織營養成分分析

飼料營養成分分析以不添加魚油和水分的干物質為材料，東風螺組織以去殼后的新鮮軟體部為材料測定。分析方法為水分含量的測定采用105℃烘干恒重法，粗蛋白的測定采用凱氏定氮法，粗脂肪的測定采用索氏抽提法，粗灰分的測定采用馬福爐550℃灰化法，硒含量委托中國熱帶農業科學院分析測試中心檢測，采用GB/T13883—2008方法測定。

1.2.3 實驗數據計算與統計

式中：W0——試驗初始體重(g)；

Wt——試驗結束時體重(g)；

L0——試驗初始殼高(cm)；

Lt——試驗結束時殼高(cm)。

實驗數據用SPSS11.0軟件Tukey進行顯著性分析，P＜0.05為顯著差異,實驗數據用平均數±標準誤差表示。

2 結果

2.1 飼料中硒的添加量對方斑東風螺生產性能的影響(見表2)

表2 飼料中硒的添加量對方斑東風螺生長、成活率及餌料系數的影響

從表2可知，隨著飼料硒添加量的增加，東風螺增重率和殼增長率逐漸增大，F5組達到最大值，比對照組提高17.8%和14.6%，但差異不顯著（P＞0.05），硒添加量繼續增加，增重率和殼增長率有所降低。F5組的餌料系數顯著低于對照組（P＜0.05），其他各組間無顯著差異（P＞0.05）。方斑東風螺的成活率都很高，各組間沒有顯著差異（P＞0.05），說明本實驗硒的添加范圍對成活率沒有構成影響。

2.2 飼料中硒的添加量對方斑東風螺品質的影響(見表3)

由表3可知，飼料中硒的添加量對肥滿度無顯著影響（P＞0.05），但對軟體組織營養成分的含量有很大影響。粗蛋白含量F3組顯著低于對照組（P＜0.05），F6組顯著高于對照組（P＜0.05），其他實驗組與對照組相比差異不顯著（P＞0.05）。粗脂肪含量F3組高于對照組，其他實驗組低于對照組，所有實驗組與對照組相比較差異極顯著（P＜0.01），其中添加0.6 mg/kg的F4組脂肪含量最低，比對照組低37.36%?？偦曳治奶砑恿枯^低的實驗組（0.2～0.6 mg/kg），與對照組相比無顯著差異，添加量較高的0.8 mg/kg和1.0 mg/kg兩組，灰分含量顯著高于對照組（P＜0.05）。隨著硒添加量的增加，軟體部組織水分含量呈降低趨勢，其中F4～F6與對照組相比差異顯著（P＜0.05）。在飼料中添加硒使軟體組織的硒含量呈現降低趨勢。當添加量達到1 mg/kg時，組織硒含量劇烈降低，與對照組相比差異極顯著（P＜0.01）。

表3 飼料中硒的添加量對方斑東風螺肥滿度和營養成分的影響

3 討論

3.1 硒的添加量對方斑東風螺生長和成活率的影響

關于硒促進動物生長的生理機制，有報道稱硒是谷胱甘肽過氧化物酶的組成成分，能防止過氧化物在細胞內的蓄積，保護細胞免受損傷，增強免疫功能，降低死亡率，促進動物生長。還有研究證明,硒可以提高血漿中三碘甲腺原氨酸的水平,促進生長激素合成與分泌,從而加快動物的生長和蛋白質合成。但是硒濃度過高或過低，都會抑制動物的生長。動物對硒的營養需求有一個適宜范圍，在這個范圍內動物才會達到最佳生長狀態，這種關系是硒的Weinberg原理。因此，研究動物對硒的適宜需求量或飼料中的適宜添加量，對科學配制飼料具有重要的實際意義。梁萌青等在純化飼料中添加不同濃度的硒（0.0～1.0 mg/kg）喂養鱸魚，結果表明，添加量在0.4 mg/kg飼料時鱸魚成活率最高、特定增長率最大、餌料系數最小，飼料中硒缺乏和過量均對鱸魚的生長和成活產生不利影響。蘇傳福等報道，在飼料中添加0～4.8 mg/kg硒能促進草魚的生長，提高飼料效率，但對草魚成活率沒有顯著影響，添加量在0.6 mg/kg時特定生長率、增重率和飼料效率達到最大值，硒濃度高于或低于0.6 mg/kg的實驗組草魚生長受到抑制。王安利等報道，中國對蝦飼料中硒含量在0.44 μg/g時獲得最佳生長效果，當硒含量達到1.25 μg/g時，對蝦狀態出現異常，可能是因硒過量而致。由于本實驗側重實用性，所以采用飼料生產原料，而沒有采用純化飼料，飼料中魚粉含量為51%，基礎飼料中含1.5 mg/kg的硒。試驗結果表明，在飼料中添加硒，與對照組相比，硒能夠促進增重率和殼增長率的提高，但差異不顯著。其原因可能是：飼料誘食性不好，東風螺耐饑餓能力強，有些東風螺長時間不攝食，體重和螺高標準相差較大。趙吉偉等在含65%魚粉的虹鱒配合飼料中添加硒，添加組與對照組的生長和抗氧化酶活力無顯著差異，實驗結果表明，基礎飼料中的硒含量1.0 mg/kg完全能滿足虹鱒生長的需要。雖然本實驗中殼增長率和增重率與對照組相比無顯著差異，但是，在飼料中添加硒0.8 mg/kg時，增重率和殼增長率比對照組提高17.8%和14.6%，此時餌料系數最低（P＜0.05）?？紤]到養殖生產的實際情況，認為在飼料中添加硒0.8 mg/kg比較適宜。

3.2 硒的添加量對方斑東風螺軟體營養成分的影響

本實驗研究結果表明，在飼料中添加硒不同程度影響了軟體組織營養成分含量。隨著硒添加量的增加，軟體組織粗脂肪、水分含量呈現逐漸降低趨勢，粗蛋白和總灰分含量呈現由低到高的變化。蘇傳福等報道，硒對草魚營養組分也具有顯著影響，隨著硒添加量的提高，肌肉灰分含量增加、水分降低、蛋白質含量先升高后降低、脂肪含量先降低后升高。梁萌青等報道，添加硒對鱸魚魚體脂肪、灰分、水分無顯著影響，但添加0.4 mg/kg硒顯著提高了魚體蛋白含量。胡先勤等報道，酵母硒對鯽魚體組織成分無顯著影響。這些實驗結果有些差異，可能是由實驗配方、硒添加量、實驗動物不同等因素造成的。硒對動物營養成分的代謝機制和影響規律有待研究。根據本實驗結果，F4、F5兩組粗蛋白及F4總灰分含量和對照組相比較無顯著差異，F5總灰分含量顯著高于對照組，F4、F5的粗脂肪和水分含量極顯著或顯著低于對照組，從螺肉營養成分可知這兩組螺品質較好，從而建議飼料中應添加0.6～0.8 mg/kg的硒。

本實驗結果表明，隨著硒添加量的增大，組織硒含量逐漸降低，這與王安利等報道的中國對蝦頭胸部和腹部肌肉中硒含量隨硒的添加量增加而降低的結果一致。胡先勤等則報道，隨著飼料中酵母硒濃度的增加，鯽魚血清和肝臟中的硒含量呈增加的趨勢。然而，魏文志等在飼料中無論添加無機硒還是有機硒，全血硒含量和谷胱甘肽過氧化物酶活性都沒有顯著性差異。梁萌青等在飼料中添加硒，促進了鱸魚肝臟和血液中硒含量的顯著增加，隨著硒添加量的增加，肝臟和血液中的硒含量出現了Weinberg原理描述的曲線形變化。從上述結果推測，梁萌青等的硒添加量范圍使鱸魚硒含量涵蓋了從低上升到高然后再降低的完整曲線，而其他研究只呈現了曲線的一部分。飼料中的硒如何在水產動物體內代謝以及影響組織硒含量，有待進一步研究。

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