高效液相色譜法測定羅庫溴銨含量的不確定度評定

董軍杰 龐文哲 宋更申 姜建國

(河北省醫(yī)學(xué)情報(bào)研究所，河北 石家莊 050071)

高效液相色譜法測定羅庫溴銨含量的不確定度評定

董軍杰 龐文哲1宋更申△姜建國2

(河北省醫(yī)學(xué)情報(bào)研究所，河北 石家莊 050071)

高效液相色譜法;不確定度;羅庫溴銨

羅庫溴銨(rocuronium bromide)是一種新型非去極化神經(jīng)肌肉阻滯劑，適用于全身麻醉，可使骨骼肌松弛［1］。含量測定是藥品質(zhì)量控制中的重要內(nèi)容，高效液相色譜法(HPLC)是藥典中常用的方法，我們采用HPLC法對羅庫庫溴銨含量進(jìn)行測定，并參考有關(guān)文獻(xiàn)［2-4］對其測量不確定度進(jìn)行了分析，以期找出影響測定不確定度的因素，對測量不確定度進(jìn)行探討，確定測量結(jié)果的可信程度。這有助于我們在藥品檢驗(yàn)工作中做好儀器的維護(hù)保養(yǎng)，嚴(yán)格按儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作儀器，消除其他的不確定因素。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥 Agilent 1200高效液相色譜儀(美國安捷倫公司);Sartorius BP 211D型電子天平，Sartorius PB-21型pH計(jì)(德國塞多利斯公司);羅庫溴銨對照品:河北省藥品檢驗(yàn)所標(biāo)定(批號:LK-2008001，含量100.0%);羅庫溴銨原料(河北柏奇藥業(yè)有限公司提供，批號:070101，含量 99.6，水分 0.1%)，四甲基氫氧化銨、乙腈為色譜純(瑞士Fluka公司);磷酸為分析純(北京化工廠)，水為超純水(由美國Millipore超純水器制備)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 測定法 色譜柱:Agilent Zorbax NH2柱 (250 mm×4.6 mm，5μm)，流動相:0.04 mol/L 的四甲基氫氧化銨溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH值至7.4)-乙腈(10∶90)為流動相，柱溫為35℃，檢測波長為207 nm，流速1.0 mL/min，進(jìn)樣量為10μL。

精密稱取羅庫溴銨約50 mg，置于50 mL容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取羅庫溴銨對照品適量，同法測定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。1.2.2 數(shù)學(xué)模型 含量計(jì)算公式為:

2 結(jié)果

2.1 各量值不確定度的識別和分析

2.1.1 A樣的不確定度 UC［A樣］Agilent1200高效液相色譜儀檢定證書給出的定量測量重復(fù)性RSD=0.1%，查JJF1059-1999概率分布情況的估計(jì)為矩形分布，則引用不確定度等于，故標(biāo)準(zhǔn)偏差S=，因此有 UC［A樣］==0.000 58。

2.1.2 A對的不確定度 UC［A對］UC［A對］同 UC［A樣］=0.000 58。

2.1.4 P對的不確定度 UC［P對］羅庫溴銨對照品純度為100.0%，純度標(biāo)準(zhǔn)偏差約為0.3%，按矩形分布，取包含因子 k =，羅庫溴銨對照品純度的標(biāo)準(zhǔn)不確定度UC［P對］= 0.003/=0.001 8。

2.1.5 W樣稱量的不確定度UC［W樣］W樣的稱樣量為50.11 mg。稱量不確定度來自2個方面:①稱量變動性，在50 g以內(nèi)，變動性標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.07 mg;②天平校正產(chǎn)生的不確定度，按檢定證書給出的在95%置信概率時為:±0.15 mg，換算成標(biāo)準(zhǔn)偏差為 0.15/1.96=0.077 mg。

2.1.6 50 mL容量瓶體積的不確定度 UC［V(50mL)］其不確定度來源為:①50 mL容量瓶體積的不確定度，按河北省計(jì)量院給定為±0.006 mL，按均勻分布換算成標(biāo)準(zhǔn)偏差為:0. 0 06/=0.0035 mL;②讀數(shù)的不確定度，重復(fù)10次統(tǒng)計(jì)出標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.009 1 mL;③容量瓶和溶液溫度與校正溫度不同引起的不確定度，校正溫度為26.0℃，使用時溫度為26.1℃，相差0.1℃，對水體積膨脹系數(shù)為2.1×10-4/℃，則95%置信概率時體積變化的區(qū)間為:100×0.1 ×2.1 ×10-4=0.002 1 mL，轉(zhuǎn)換成標(biāo)準(zhǔn)偏差為:0.002 1/1.96=0.001 1 mL。

2.1.7 水分的不確定度UC［G］本品具有引濕性，本品的水分為0.1%，水分報(bào)告給出的標(biāo)準(zhǔn)不確定度UC［G］約為 0.000 58。

2.2 各量值的合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度 見表1。

表1 羅庫溴銨含量測定的有關(guān)量值

U［含量(%)］=0.003 7 ×1.00=0.003 7

2.3 不確定度各分量來源分析 見圖1。

圖1 不確定度各分量來源分析圖

2.4 含量(%)的擴(kuò)展不確定度 實(shí)驗(yàn)結(jié)果一般用擴(kuò)展不確定度表示。取包含因子k=2(置信概率為95%)，則含量測定擴(kuò)展不確定度為:2 ×0.003 7=0.007 4≈0.8%，含量測定結(jié)果表達(dá)為:含量范圍為99.6% ±0.8%(k=2)。

3 討論

分析評估不確定度時，首先要盡量考慮產(chǎn)生不確定度的所有來源，因?yàn)楹铣刹淮_定度的數(shù)值幾乎完全取決于重要的不確定度分量。由以上的評定也可以看出，HPLC法測定羅庫溴銨的含量，合成不確定度的數(shù)值幾乎完全取決于重要的不確定度分量，W對和W樣貢獻(xiàn)最大，P對次之，A樣和A對最小。這提示我們在羅庫溴銨含量測定的過程中，尤其要關(guān)注對照品和樣品稱量的準(zhǔn)確性，以減小該不確定度分量對測定結(jié)果不確定度的影響，從而減小測定結(jié)果的不確定度。

測量不確定度是在藥品定量分析的結(jié)果上，對分析結(jié)果的可信范圍的把握。通過不確定度的評定，能夠分析出測定過程中影響結(jié)果準(zhǔn)確性的主要因素，有利于檢測結(jié)果可信程度和檢測質(zhì)量的提高。測量不確定度與藥品檢驗(yàn)工作密切相關(guān)，它將在藥品檢驗(yàn)中起到重要的作用。同時，必須嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件，并規(guī)范實(shí)驗(yàn)操作。測量不確定度用于評估定量方法的可靠性和測量結(jié)果的可信程度，對于藥品檢驗(yàn)具有重要意義。

［1］裴凌，盛卓人.羅庫溴銨歐洲研討會綜述［J］.國外醫(yī)學(xué):麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊，1995，16(4):219-222.

［2］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:二部［M］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:579.

［3］EURACHEM/CITAC GUIDE.量化分析測量不確定度指南［M］.北京:中國計(jì)量出版社，2003:129.

［4］宋更申，周麗，姜建國，等.HPLC法測定羅庫溴銨原料的含量［J］.國際藥學(xué)研究雜志，2010，37(2):127-129.

R927.2

A

1002-2619(2011)12-1913-02

△通訊作者:河北省藥品檢驗(yàn)所抗生素室，河北 石家莊 050011

1 河北省藥品檢驗(yàn)所抗生素室，河北 石家莊 050011

2 河北省藥品檢驗(yàn)所化學(xué)室，河北 石家莊 050011

董軍杰(1973—)，男，編輯，學(xué)士。從事醫(yī)學(xué)編輯工作。

2011-09-15)