尋常型銀屑病患者血清中8-異前列腺素F2α、皮質醇及腫瘤壞死因子-α的檢測

蔓小紅，李 锘，楊頂權，張 衛，葛崇華，白彥萍

銀屑病是一種由多基因遺傳決定的、多環境因素刺激誘導的免疫異常性慢性炎癥性皮膚病[1]。目前，關于本病的發病機制尚未完全清楚。氧化應激及神經、內分泌、免疫網絡（neuro-endocrineimmunoregulatory network，NEI）失調可能與銀屑病的發生有密切關系[2,3]。8-異前列腺素F2α（8-isoprostaglandin F2α，8-isoPGF2α）是花生四烯酸代謝產物，能靈敏的反映體內氧化應激水平。皮質醇（cortisol，CORT）及腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）是神經免疫內分泌網絡代表性產物。本文通過檢測尋常型銀屑病患者血清中8-異前列腺素F2α、皮質醇及腫瘤壞死因子-α的水平，探討其在銀屑病發病中的作用。

1 材料與方法

1.1 材料

選取我科2007年1月～2009年12月門診進行期尋常型銀屑病患者30例為實驗組，其中男性16例、女性14例，平均年齡（36.11±1.12）歲，平均病程（1.5±1.09）個月。所有病例均經臨床和病理確診。所選尋常型銀屑病患者病情嚴重程度根據《銀屑病皮疹面積和嚴重程度評分法》（PASI）為中度。無其他系統疾病史，就診前3個月未進行系統治療。另隨機選取15例健康人為對照組，其中男7例、女8例，平均年齡（34.55±1.07）歲。兩組年齡、性別比差異無統計學意義（P＞0.05）。本研究經院倫理委員會批準和患者知情同意。

1.2 試劑

8-異前列腺素F2α、皮質醇及TNF-α試劑盒均購自北京北方生物技術研究所；XH-6010γ放射免疫計數器（西安262廠）。

1.3 方法

1.3.1 標本采集 實驗組與治療組成員均晨起空腹采靜脈血4ml，加入事先準備好的含有乙二胺四乙酸（EDTA）的空白管中，2000 rPmin 離心5 min，取血清，置于-70 ℃冰箱中保存待檢。

1.3.2 檢測方法 所有樣品采用放射免疫法檢測。嚴格按照放射免疫試劑盒要求操作。按順序加入試劑，充分搖勻后，室溫放置15min，3800 rPmin離心15min，棄上清，測各沉淀管的放射性計數（cpm）。

1.3.3 結果計算方法 計算標準管與樣品管結合的cpm數（B）及與零標準管結合的cpm數（B0）的百分比值（B/B0×100%）。用半對數紙，以標準管的B/B0為縱坐標，以各標準管含量為橫坐標，繪制標準曲線。根據樣品的結合率（B/B0×100%），從標準曲線中查出被測樣品的含量。

1.3.4 統計學處理

2 結果

尋常型銀屑病患者血清中8-異前列腺素F2α、皮質醇和腫瘤壞死因子-α水平均高于與正常對照組，差異均有統計學意義（表1）。

3 討論

神經免疫調節機制在多種皮膚病的發生中起重要作用。皮膚內神經纖維能分泌神經遞質；皮膚細胞可分泌多種神經介質和神經激素并表達相應受體；短時間內存在于皮膚的免疫細胞由神經介質通過受體進行調節。皮膚病，特別是炎癥性皮膚病使神經-免疫-內分泌系統變得不穩定，銀屑病尤為典型[2]。

氧化應激是體內自由基產物超過抗氧化防御代謝時的一種不平衡狀態，可導致脂質過氧化、膜蛋白損傷及DNA損害，在銀屑病發病過程中可能發揮著重要作用[3]。8-異前列腺素F2α是自由基催化生物膜上的花生四烯酸發生脂質過氧化（非酶促反應）后的特異性產物，能靈敏的反映體內氧化應激水平并與疾病嚴重程度相關[4]，是評價氧化應激和脂質過氧化反應理想的生物指標。本研究結果顯示進行期銀屑病血清中8-異前列腺素F2α水平明顯高于正常對照組，提示尋常型銀屑病患者氧化應激水平增強。我們推測機體長期處于氧化應激狀態時免疫功能失調，機體免疫應答及炎癥反應受到影響，一些炎癥介質及細胞因子釋放，可能會介導角質形成細胞異常增殖，從而引起銀屑病的發生。

皮質醇是神經內分泌與免疫相互調節的重要介質，可抑制白介素-2的活性，促進Th1細胞凋亡。應激還可引起神經內分泌免疫網絡平衡的破壞，可引起以交感-腎上腺髓質和下丘腦-垂體-腎上腺皮質（HPA）軸興奮為主的神經內分泌反應，引起血清中皮質醇水平的升高。本研究發現尋常型銀屑病患者的血清皮質醇水平明顯高于正常對照組。銀屑病患者血清皮質醇水平升高可能是高氧化應激狀態下的一種適應性反應，有利于抑制Th1-Th2細胞失衡。持續的應激可導致皮質類固醇受體數量及親和力都下降，繼而皮質醇水平出現反饋性增高[5]。我們推測銀屑病患者血清皮質醇水平升高，可能引起一些炎癥介質和細胞因子表達異常和活性改變，導致機體免疫應答、炎癥反應失衡，從而可能會導致銀屑病的發生。

表1 尋常型銀屑病患者與正常人血清中8-異前列腺素F2α、皮質醇和腫瘤壞死因子-α水平比較（ ±s ）

表1 尋常型銀屑病患者與正常人血清中8-異前列腺素F2α、皮質醇和腫瘤壞死因子-α水平比較（ ±s ）

注：*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.05

組別 例數 8-異前列腺素F2α（ng/ml）皮質醇（ng/ml）腫瘤壞死因子-α（ng/ml）實驗組 30 6.63±2.02* 201.94±61.89** 6.14±2.79***對照組 15 4.62±1.59 136.30±64.40 3.72±2.72

TNF-α在銀屑病的發病機制中有著重要的作用，很可能是銀屑病炎癥反應的始動因素[6]。目前研究表明，銀屑病患者血清中TNF-α水平明顯高于正常對照。雖然TNF-α在銀屑病發病中的作用機制還不完全清楚，但抗TNF-α治療在銀屑病治療中是非常有效的[7]。本實驗結果與國內外文獻報道一致，尋常型銀屑病患者血清中TNF-α的水平明顯高于正常人，我們的結果表明TNF-α可能參與了銀屑病的發生。

神經、內分泌、免疫系統通過共同的化學信號分子和受體,有機地整合在一起，對內外環境變化發生協調一致的反應。本研究發現銀屑病中氧化應激代謝產物8-異前列腺素F2α、神經內分泌激素皮質醇、免疫炎癥介質TNF-α明顯升高。我們推測銀屑病的發病過程中，由于精神或感染等因素刺激機體，可引起以交感-腎上腺髓質和下丘腦-垂體-腎上腺皮質（HPA）軸興奮為主的神經內分泌反應，激素水平升高，激活的免疫細胞產生一系列炎癥介質；持續的氧化應激狀態下，前列腺素水平表達失衡。銀屑病的發病機制與神經免疫調節有相關性，而且氧化應激又可引起銀屑病中神經內分泌免疫網絡平衡的破壞。但是三者的相互關系及其具體作用機制目前尚不完全清楚，值得進一步深入研究。

[1]鄭敏. 銀屑病發病機制研究中若干問題的思考 [J]. 中華皮膚科雜志, 2006, 39(3):121-123.

[2]孫葳, 陸大祥. 神經-內分泌-免疫調節網絡與疾病 [J]. 中國病理生理雜志, 2000, 16(8):761-763.

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[4]Milne GL, Musiek ES, Morrow JD. F2-isoprostanes as markers of oxidative stress in vivo: an overview [J]. Biomarkers, 2005,10 Suppl:S10-23.

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[6]Arican O, Aral M, Sasmaz S, et al. Serum levels of TNF-alpha,IFN-gamma, IL-6, IL-8, IL-12, IL-17, and IL-18 in patients with active psoriasis and correlation with disease severity [J].Mediators Inflamm, 2005, 24(5):273-279.

[7]Abanmi A, Al Harthi F, Al Agla R, et al. Serum levels of proinflammatory cytokines in psoriasis patients from Saudi Arabia [J]. Int J Dermatol, 2005, 44(1):82-83.