HPLC法測定消栓通絡分散片中蘆丁的含量

黃偉 郭潔

(1.陜西國際商貿學院;2.陜西中醫(yī)學院 陜西咸陽 712046)

消栓通絡分散片是由:川芎、丹參、黃芪、澤瀉、三七、槐花、桂枝、郁金、木香、冰片、山楂等11味藥制成的中藥復方制劑,本品原劑型為普通糖衣片或薄膜衣片劑[1～2]。

具有活血化瘀,溫經(jīng)通絡的功效。用于血脂增高,腦血栓引起的精神呆滯、舌質發(fā)硬、言語遲澀、發(fā)音不清、手足發(fā)涼、活動疼痛。本試驗參照有關文獻[3],采用高效液相色譜法對制劑中的槐花中的蘆丁(C27H30O16)進行了定量控制,測定快捷、準確、可靠。

1 儀器和試藥

儀器:島津SCL-10AVP高效液相色譜儀:Shimadzu LC-10ATVP輸液泵;Shimadzu SPD-M10AVP檢測器;Class-vp工作站。島津UV-2401PC紫外分光光度計。TSK-GEL DDSC18(5μm,4.6mm×250mm)色譜拄。塞多利斯BP211D電子天平。

試劑:甲醇為色譜純(美國TEDIA公司);乙酸為分析純;水為二次蒸餾水;其余試劑為分析純(西安化學試劑廠)。

試藥:蘆丁對照品,批號:100080-200306(供含量測定用),中國藥品生物制品檢定所。

2 方法與結果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適應性試驗

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲醇-水-乙酸(45∶53∶2)為流動相;檢測波長355nm;理論板數(shù)按蘆丁峰計算應不低于1500;流速0.5mL/min;柱溫30℃;進樣量10μL。此條件下蘆丁峰計算與其它成份峰能達到基線分離,基線平穩(wěn)。

2.2 測定方法

對照品溶液的制備:取在120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品適量,精密稱定,加甲醇制成每1mL含無水蘆丁0.2mg的溶液,即得。

供試品溶液的制備:取樣品20片,研細,取細粉約3g,精密稱定,置100mL具塞錐形瓶中,加甲醇40mL,密塞,超聲處理40min,過濾,藥渣再加甲醇30mL,密塞,超聲處理30min,濾過,濾液置100mL容量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得。

測定法:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μL,注入液相色譜儀,測定,即得。

2.3 檢測波長的選擇

取蘆丁對照品適量,加甲醇配制成濃度為0.228μg/mL的溶液,結果表明:蘆丁在355nm處有最大吸收。

2.4 提取條件的篩選

取裝量差異項下的樣品品60片(批號100805),研細,取細粉約3.0g,共9份,分別精密稱定,分為3組。按表1設計方案進行試驗:

各組超聲處理完后濾過,濾液置100mL容量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液;

分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μL,注入液相色譜儀,照上述色譜條件測定,即得。結果見表1、表2。

表1 供試品超聲方法考察結果

表2 不同超聲時間蘆丁含量方差分析表

由表2可看出,供試品經(jīng)不同超聲時間處理,對蘆丁含量有顯著影響。

2.5 精密度試驗

取本品樣品一批(批號:100805),按供試品溶液的制備方法制備供試品溶液。各精密量取5μL,注入高效液相色譜儀,共測定6次,結果供試品峰面積平均值為4165378,RSD%=1.10。表明本測定方法精密度良好。

2.6 溶液的穩(wěn)定性試驗

取精密度試驗供試品溶液,在不同間隔時間(0、1、2、3、4、5、6h)各精密吸取5μL測定1次,共測定7次,結果供試品峰面積平均值為4184199,RSD%=1.31。表明供試品溶液在6小時內基本穩(wěn)定。

3 結語

采用高效液相色譜法測定消栓通絡分散片中蘆丁的含量,方法可靠、簡便、準確、靈敏、重現(xiàn)性好,回收率等均符合要求,可作為該制劑的質量控制方法。

[1]國家藥典委員會.消栓通絡片質量標準[S].中國藥典(一部)[M].北京:化學工業(yè)出版社,2000.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學工業(yè)出版社,2000.

[3]苗明三,李振國.現(xiàn)代實用中藥質量控制技術[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2000.