單管高靈敏度等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)快速檢測(cè)甲型H1N1流感病毒
2011-04-12 00:00:00成思佳陳之遙初亞男崔侖標(biāo)史智揚(yáng)馬寅姣周?chē)?guó)華
分析化學(xué) 2011年3期
摘 要 建立了單管逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法（RT-LAMP）快速檢測(cè)甲型H1N1流感病毒的方法。針對(duì)甲型H1N1流感病毒的M基因和HA基因的保守區(qū)，設(shè)計(jì)了兩組特異性引物，分別用于篩選甲型流感病毒及鑒定甲型H1N1流感病毒。對(duì)反應(yīng)體系中的關(guān)鍵因素進(jìn)行優(yōu)化，反應(yīng)結(jié)果可直接通過(guò)濁度或者SYBR Green Ⅰ 熒光進(jìn)行判定。本方法最低可檢測(cè)到10拷貝/管的甲型H1N1流感病毒。為驗(yàn)證方法的可行性，對(duì)30例臨床樣本進(jìn)行了檢測(cè)，與美國(guó)疾病控制與預(yù)防中心（CDC）的TaqMan方法進(jìn)行對(duì)比，檢測(cè)的靈敏度和特異性分別為92%和100%。本方法實(shí)現(xiàn)了單管快速檢測(cè)甲型H1N1流感病毒，為甲型H1N1流感病毒的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)提供了新方法。
關(guān)鍵詞 甲型H1N1流感病毒； 逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增； SYBR Green I
