摘 要 研究了鈣黃綠素-熒光桃紅體系的熒光共振能量轉(zhuǎn)移機(jī)理及其在蛋白質(zhì)測定中的應(yīng)用。實驗表明: 在聚乙烯醇存在下,于HAc-NaAc緩沖液(pH 5.30)中,鈣黃綠素與熒光桃紅之間能發(fā)生有效的能量轉(zhuǎn)移。根據(jù)Frster理論,探討了鈣黃綠素與熒光桃紅分子間能量轉(zhuǎn)移機(jī)理。結(jié)果表明: 蛋白質(zhì)的加入使鈣黃綠素-熒光桃紅體系發(fā)生熒光猝滅,而且蛋白質(zhì)的濃度與體系的熒光猝滅強(qiáng)度在一定范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系,據(jù)此建立了鈣黃綠素-熒光桃紅-蛋白質(zhì)體系測定蛋白質(zhì)的新方法。在優(yōu)化條件下,蛋白質(zhì)的線性范圍為0.4~84 mg/L; 檢出限為0.2 mg/L(n=11)。方法應(yīng)用于人血清樣品中蛋白質(zhì)含量的測定,其RSD≤1.8%(n=6); 回收率為96.9%~102.1%。
關(guān)鍵詞 鈣黃綠素; 熒光桃紅; 熒光共振能量轉(zhuǎn)移; 蛋白質(zhì)