甲胎蛋白異質體檢測在肝癌診斷中的應用

馬端葉 于麗梅 封建凱 盛麗

甲胎蛋白（AFP）作為肝癌的腫瘤標志物在臨床上應用已久，但是一些良性肝病，如慢性肝炎、肝硬化患者甲胎蛋白也會呈低濃度升高，這給臨床上鑒別肝癌和良性肝病帶來困難。研究發(fā)現(xiàn)，肝細胞壞死再生時產生的AFP與肝細胞癌產生的AFP在糖鏈結構上有差異，如用小扁豆凝集素（LCA）作為外源性凝集素，AFP可以LCA非結合型(AFP-L1,AFP-L2)和LCA結合型（AFP-L3）3種異質體，其中AFP-L1主要存在于良性肝病中，AFP-L2來自孕婦，而AFP-L3為肝細胞癌所特有[1]。目前認為，通常所說的AFP異質體實際是指與LCA結合的AFP-L3[2]，1999年在第四屆肝癌學術會議上，被指定為原發(fā)性肝癌臨床診斷的肝癌標志物之一。

1 對象與方法

1.1 對象

170例血清標本來自我院2010年2月～2011年3月門診或住院患者，患者年齡11～82歲，全部病例AFP檢測陽性。證實所有肝癌患者均為本院門診及住院患者，均是臨床病理B超、CT檢查確診，部分經(jīng)術后病理證實。

1.2 試劑與儀器

AFP檢測使用羅氏E170電化學發(fā)光分析系統(tǒng)配套試劑，AFP-L3快速分離微量離心柱法由北京熱景生物技術有限公司提供。

1.3 方法

采用微量離心柱方法。親和吸附離心柱內裝有耦聯(lián)凝集素微球，可以特異結合AFP-L3,當血清流過離心柱時，與LCA親合力強的AFP-L3結合于柱中，經(jīng)過清洗除去不結合的AFP,再經(jīng)過浸泡洗脫離心獲得AFP-L3。然后應用羅氏E170電化學發(fā)光法檢測總AFP和AFP-L3的含量并計算AFP-L3占AFP總量的百分比，以AFP-L3≥10作為AFP-L3異常升高的標準。

1.4 經(jīng)統(tǒng)計學處理

用SPSS 10.0統(tǒng)計軟件，對各組的腫瘤標志物濃度和陽性率進行t檢驗或x2檢驗。

2 結果

75例肝癌組患者血清中，AFP-L3陽性率為82.6%，肝硬化組陽性為25.5%，慢性肝炎組為20%，見表1。經(jīng)x2檢驗，AFP-L3陽性率在肝癌組與肝硬化和慢性肝炎組比較，P＜0.05，差異均有統(tǒng)計學意義。

表1 各組患者AFP-L3陽性率比較（例）

肝癌、肝硬化和慢性肝炎患者AFP-L3的平均水平見表2，經(jīng)t檢驗，肝癌患者與肝硬化和慢性肝炎患者比較，P＜0.01，均具有顯著性差異。

表2 各組患者AFP-L3測定結果比較

3 討論

肝癌是我國常見的惡性腫瘤之一，在惡性腫瘤中的死亡排位中居第三，僅次于胃癌和肺癌。我國每年因肝癌死亡的人數(shù)占全世界肝癌死亡人數(shù)的40%，是一種嚴重威脅人民生命健康的疾病[3]。至今為止，AFP仍是原發(fā)性肝癌最特異指標，但AFP在一些良性肝病患者中也會有不同程度的升高[4]。因為在肝細胞再生過程中會產生一定量的AFP，這給臨床診斷帶來一定的困難，尤其是AFP低濃度的肝癌，單檢測AFP很難與肝硬化、慢性肝炎鑒別。此時AFP異質體檢測就有良好的臨床意義，尤其對于AFP在20～400ng/ml之間具有較好的價值。與鄭穎、胡敏華等報道一致[5-7]，本研究結果顯示：AFP-L3≥10%作為肝癌的診斷標準敏感性為82.6%，與慢性肝病鑒別診斷的特異性為76.8%，肝癌患者的AFP-L3均值及陽性率均高于肝硬化組和慢性肝炎組，差別具有統(tǒng)計學意義，提示檢測AFP-L3有助于鑒別原發(fā)性肝癌與非原發(fā)性肝癌患者。尤其在甲胎蛋白低濃度組AFP＜400ng/ml,AFP-L3≥10%為鑒別診斷指標時，肝癌與良性肝病可得到明顯區(qū)分。

我們在臨床檢測工作中已發(fā)現(xiàn)很多患者血清AFP為20～100ng/ml，AFP-L3陽性，從而使肝癌得到及時早期診斷。因此，AFP-L3非常適用于AFP低濃度升高的患者，對鑒別肝細胞癌與慢性肝炎、肝硬化等肝病患者是很有幫助的，特別對AFP低濃度升高的慢性肝炎、肝硬化等肝病患者，定期復查AFP-L3，動態(tài)觀察其值變化可及時發(fā)現(xiàn)疾病的惡變傾向，明確診斷。尤其對AFP-L3≥10%的患者進行隨訪和嚴密的監(jiān)控是很有必要的。

本文采用國產的微量離心柱法試劑，可以快速簡便地獲得AFP-L3的組分，用化學發(fā)光法進行定量測定，具有操作簡單、用時短、穩(wěn)定性高、經(jīng)濟性好等特點，利于臨床推廣。

[1] 孫艷虹，姜儻.腫瘤標志物在臨床上的應用（上）[J].新醫(yī)學，2008，39（2）：121-123.

[2] 鄭小華，曹穎平.甲胎蛋白異質體的檢測與臨床應用的研究進展[J].醫(yī)學綜述，2008，14(18)：2808-2811.

[3] 彭承宏，李松崗，劉穎斌，等.肝癌研究現(xiàn)狀[J].肝膽外科雜志，2001，9⑸：386-388.

[4] 屠振興，吳孟超，崔貞福.甲胎蛋白異質體對原發(fā)性肝癌早期診斷的研究[J].第二軍醫(yī)大學學報，1985，4⑹：193-196.

[5] 鄭穎，單曉潔，任茗睿，等.微量離心柱法檢測甲胎蛋白異質體對原發(fā)性肝癌診斷的意義[J].浙江實用醫(yī)學，2009，14（1）：3-4.

[6] 胡敏華，陳燕，梁亞嘉，等.新微量離心柱法測定甲胎蛋白異質體對原發(fā)性肝癌診斷的價值[J].福建醫(yī)藥雜志，2009，31（4）：95-96.

[7] 熊彪，蔡其浩，蒙凱.三項生化指標聯(lián)合甲胎蛋白診斷原發(fā)性肝癌的研究[J].當代醫(yī)學，2008，14(14)：37-38.