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白術黃芪湯及有效成分對潰湯性結腸炎的療效

2011-03-09 02:31:22亓國鋒
當代醫學 2011年17期
關鍵詞:小鼠模型

亓國鋒

白術黃芪湯用于瀉痢恢復期的治療[1]。潰瘍性結腸炎屬中醫瀉痢等范疇,病程遷延時間較長[2]。本實驗使用三硝基苯磺酸致小鼠潰瘍性結腸炎模型,觀察白術黃芪湯單藥提取成分組方對潰瘍性結腸炎小鼠的療效,現將結果匯報如下。

1 材料

1.1 動物 NIH雄性小鼠,SPF級,購自上海BK公司,月齡4~5周,體重大約25~30g。各組小鼠進行單籠飼養。

1.2 試劑及藥物 菊科植物白術(Atractylodes, rocephala Koidz.)的根莖、豆科植物蒙古黃芪(Astragalus mongholicus Bge.)的根。白術黃芪湯按原方比例白術(體積比):藥材與蒸餾水比例為1:8,黃芪:甘草=10:7:3,按此比例浸泡4h,煮沸后,用紗布過濾藥液;第2次和第3次分別按照1:6和1:4的比例煮沸,紗布過濾,合并3次濾液。本實驗按此比例將中藥各成分加蒸餾水混勻研磨配成所需濃度。所用原材料中三硝基苯磺酸(TNBS),十六烷基三甲基溴化胺和鄰聯二茴香胺由Sigma公司提供。戊巴比妥鈉和無水乙醇為國產分析純。

1.3 儀器 紫外可見光分光光度計、D型水浴鍋、電子分析天平、電熱恒溫真空干燥箱。

2 方法

2.1 動物造模、分組及給藥 40只雄性小鼠,禁食24h后,使用1%戊巴比妥鈉(45mg/kg)進行腹腔注射麻醉。隨機分為4組,為正常對照組、模型對照組、白術黃芪湯組、有效成分組。動物肛門注入TNBS藥液(劑量為100mg/kg),倒立30秒使藥液達全結腸,將動物放回原籠待其自然蘇醒。其中,正常對照組首先注入等量的50%乙醇,造模24h后開始灌胃給藥。正常對照組和模型對照組灌蒸餾水;白術黃芪湯組灌水煎劑(10g/kg),有效成分組灌提取物(0.4g/kg),每天一次,連續7天。

2.2 MPO活性檢測:各組小鼠分別取100mg結腸組織并切碎,置入2mL十六烷基三甲基溴化胺(HTAB)緩沖液中,冰浴中勻漿3次,每次30 S,超聲振蕩10S,凍溶3次,4000 r/min離心15min,取上清液0.1mL,加入50mmol/L的PBS2.9mL中于460 nm處測吸光率A值,于3min后再次測定吸光率A值。該樣品的MPO單位即兩次A值差值除以3。

3 結果

各組MPO活性比較。模型組小鼠MPO活性較正常組明顯升高,白術黃芪湯組和有效成分組與模型組比較MPO活性明顯降低(P<0.01),有效成分組效果略優。

注:**:與正常組相比,模型組MOP活性明顯升高,P<0.01,有統計學意義。##:與模型組相比,MOP活性明顯降低,P<0.01,有統計學意義。

4 討論

潰瘍性結腸炎以急性發作的患者為多見,病初邪實,濕熱蘊結腸腑;病程較長,反復發作,形成虛實夾雜證,虛為脾虛血虧,實為濕熱留戀,腸絡瘀阻[3]。《景岳全書·泄瀉》曰:“泄瀉之本,無不由于脾胃……脾胃受傷,則水反為濕,谷反為滯,而瀉痢作矣”。在中醫學上,脾虛濕勝在發病及病變過程中有著至關重要的地位,因此,在潰瘍性結腸炎特別是恢復期的治療中,益氣健脾利濕等治法自然是重中之重的治療方法[4]。在瀉痢治療中,下列療法充分體現了“泄瀉之本,無不由脾胃”的中醫理論:治療濕熱毒邪郁蒸腸道而致的下痢,瀉痢去除后服白術黃芪湯健脾利濕,益氣補中[5]。

本實驗中,TNBS所致的小鼠潰瘍性結腸炎模型組小鼠MPO活性較正常組明顯升高。與模型組相比,白術黃芪湯組和有效成分組MPO活性明顯降低(P<0.01),而有效成分組效果略優。從藥材提取有效組分是中藥現代研究的常用方法,但其中需要探討的問題仍然很多,這是需要我們以后進一步學習的方向。

[1]李茹柳,遲莉,石忠峰.白術黃芪湯及其單藥提取成分組方對潰瘍性結腸炎的治療作用[J].2007,21(3):223-228.

[2]孫洪鳳,李云峰.中藥氧灌腸治療潰瘍性結腸炎[J].當代醫學,2010,16(25):146-147.

[3]陳江.潰瘍性結腸炎中醫病機演變特點探析[J].遼寧中醫學院學報,2005,7(3):197.

[4]石忠峰,陳慰文,李茹柳,等.白術黃芪湯及其有效成分組方對小鼠潰瘍性結腸炎的療效觀察[J].中藥新藥與臨床藥理,2007,18(2):87-89.

[5]Shi ZF, Chen WW, Li WM, Gao Y.Purification on total astragalosides by macroporous adsorptive resin[J].Chin Tradit Herb Drugs (中草藥), 2005, 36(9): 1322-1325.

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