注射用地塞米松磷酸鈉中細菌內毒素的檢測

鄭劍峰 王育紅

沈陽綠洲制藥有限責任公司（沈陽 110300） 遼寧廣播電視大學（沈陽 110034）

注射用地塞米松磷酸鈉中細菌內毒素的檢測

鄭劍峰 王育紅

沈陽綠洲制藥有限責任公司（沈陽 110300） 遼寧廣播電視大學（沈陽 110034）

建立注射用地塞米松磷酸鈉的細菌內毒素檢查方法。使用兩個廠家的鱟試劑和自制的3批注射用地塞米松磷酸鈉樣品進行干擾試驗。注射用地塞米松磷酸鈉濃度稀釋至0.3125 mg/mL時無干擾。注射用地塞米松磷酸鈉可按內毒素限值6 Eu/mg進行細菌內毒素檢查。

注射用地塞米松磷酸 鱟試劑 細菌內毒素

地塞米松磷酸鈉為腎上腺皮質激素類藥，主要用于過敏性與自身免疫性炎癥性疾病。本研究參照中國藥典2005年二部有關要求及應用指導原則，進行了地塞米松磷酸鈉凍干粉針細菌內毒素檢查法的可行性研究。

1 儀器和試藥

內毒素工作標準品（中國藥品生物制品檢定所，規格：180 EU/支，批號：2004-5）。鱟試劑：福州新北生化工業有限公司（標示靈敏度：0.25 EU/mL，規格：0.1mL/支，批號：04101411）；湛江安度斯生物有限公司（標示靈敏度：0.25 EU/mL，規格：0.1 mL/支，批號：0411121）。細菌內毒素檢查用水：湛江安度斯生物有限公司（規格：5 mL/支，批號：0409230）。注射用地塞米松磷酸鈉（自制，規格：2 mg/支，批號：20080501、20080502、20080503）。

2 方法與結果

2.1 靈敏度復核

鱟試劑按中國藥典2005年規定方法進行靈敏度復核試驗，結果均符合規定。

2.2 細菌內毒素限值（L）的確定

USP28版、中國藥典2005年版只收載地塞米松磷酸鈉注射液標準，未見本品的收載。美國USP28版規定的地塞米松磷酸鈉注射液限度為：31.3 EU/mg。地塞米松磷酸鈉注射液說明書表明，臨床最大可靜脈推注50 mg。根據L=K/M，其中K=5 EU（Kg·h）-1，計算限度為：L=6 EU/mg，參照臨床最大劑量規定本品的限度為6 EU/mg。

2.3 有效稀釋濃度（MVD）的計算

公式MVD（λ=0.25）=λ/L，其中L為地塞米松磷酸鈉細菌內毒素限值6 EU/mg，λ為鱟試劑標示靈敏度。取樣品配成2.5 mg/mL，則MVD=6×2.5÷0.25 =60倍（即0.04 mg/mL）。

2.4 供試品干擾預試驗

取供試品，加細菌內毒素檢查用水，配成2.5 mg/mL，作為供試品貯備液；再用細菌內毒素檢查用水稀釋成系列濃度的供試樣品，參照細菌內毒素檢查法進行干擾預試驗，結果表明本品2.5mg/mL液的1：8稀釋液無干擾。結果見表1。

2.5 干擾確證試驗

根據預試驗結果，對以上兩批鱟試劑，取供試品貯備液（2.5 mg/mL）稀釋8倍（0.3125 mg/mL）進行干擾確證試驗。結果表明，本品對兩批鱟試劑均無干擾，0.5λs<λt<2.0λs，符合中國藥典2005年版對細菌內毒素檢查有效性的規定，進行細菌內毒素檢查。見表2和表3。

2.6 樣品細菌內毒素檢查

按中國藥典2005年版細菌內毒素檢查法，使用兩批不同廠家的鱟試劑分別對樣品進行細菌內毒素檢查，同時設樣品陽性對照管，結果3批樣品均呈陰性。結果見表4和表5。

表1 注射用地塞米松磷酸鈉干擾預試驗結果

表2 干擾確證試驗結果（鱟試劑批號：04101411）

表3 干擾確證試驗結果（鱟試劑批號：0411121）

表4 細菌內毒素檢查結果（鱟試劑批號：04101411）

表5 細菌內毒素檢查結果（鱟試劑批號：0411121）

3 結論

由干擾預試驗結果可初步判斷，當樣品稀釋至0.3125 mg/mL時與鱟試劑無干擾，且兩個廠家的鱟試劑反應結果相當。正式干擾試驗用0.3125 mg/mL樣品濃度，且兩個廠家的鱟試劑反應結果均為0.5 λs<λt<2.0 λs，確證無干擾影響，細菌內毒素限值定為6 Eu/mg。注射用地塞米松磷酸鈉可適用細菌內毒素檢查法，但供試品濃度應在0.3125 mg/mL或以下，鱟試劑靈敏度在0.5 Eu/mL以上均可。

[1]國家食品藥品監督管理局.地塞米松磷酸鈉注射液說明書.國家藥品標準化學藥說明書內容匯編第一冊.

[2]國家藥典委員會.地塞米松磷酸鈉質量標準.中華人民共和國藥典二部（2005）.北京:化學工業出版社,2005.

[3]國家藥典委員會.細菌內毒素檢查法.中華人民共和國藥典二部（2005）.北京:化學工業出版社,2005.

齊婷婷）