糖尿病合并肺結核患者外周血白細胞及T細胞亞群的變化

劉 偉,呂曉紅,錢東華

（吉林大學第一醫院呼吸科,吉林長春 130021）

近年來由于結核耐藥性逐年增加和免疫損害致使糖尿病患者并發肺結核逐年增多[1],本文通過對24例糖尿病合并肺結核感染者外周血白細胞計數和T淋巴細胞亞群,探討H1N1流感感染對機體細胞免疫的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本院2009年10月至2009年12月收治24例糖尿病合并肺結核患者,入選病例均經病理證實為肺結核感染者,符合2型糖尿病診斷標準。其中經支氣管鏡肺活檢（TBLB）證實者14例;經開胸肺活檢證實 10例;男10例,女 14例;年齡 28.73±9.24（16-57）歲;正常對照組25例為健康獻血者,男10例 ,女15例,年齡15-53（26.45±7.86）歲 。

1.2 方法 檢查血常規,主要試劑異硫氰雙（FITC）熒光抗體抗CD3、CD4、CD8,藻紅蛋白（PE）熒光抗體抗CD3購于美國Pharmingen公司,均為小鼠抗人IgG抗體。用美國BD公司FACScalibur流式細胞儀檢測H1N1患者外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細胞;用美國雅培公司全自動血細胞分析儀檢測糖尿病合并肺結核患者外周血白細胞計數及分類。用直接免疫熒光標記法[2]檢測外周血淋巴細胞亞群,取外周抗凝血50μl,加上以上相應的抗體10μl,搖勻,避光4℃放置10min。加氯化銨裂解液2ml,避光室溫放置10min。待紅細胞完全溶解后1,1 000 r/min離心10min,棄上清,PBS洗2次,加多聚甲醛固定液450 μl固定,待上機檢測。以流式細胞儀配套軟件（cell quest）獲取樣本中1×104個細胞中淋巴細胞的相應標記陽性表達率。每個樣本都用FITC和PE標記同型IgG作為相應的陰性對照。CD45FITC/CD14PE作輔助設門。

2 結果

見表1,2,3。

表1 糖尿病合并肺結核患者外周血白細胞計數及分類的變化（±s±s）組別 n WBC（×109/L）L（%）L（×109/L）N（%）N（×109/L）急性期 24 3.55±1.46* 28.46±11.87* 0.94±0.36* 61.95±13.93* 2.31±1.30*對照組 25 6.76±1.42 33.53±6.03 2.28±0.61 54.36±6.18 3.68±0.97*與對照組比較:P＜0.05

表2 糖尿病合并肺結核患者外周血T淋巴細胞亞群百分數和CD4+/CD8+比值（±s±s）組別 n CD3+（%） CD4+（%） CD8+（%） CD4+/CD8+急性期 24 62.73±11.06# 31.66±11.70# 23.32±6.14# 1.46±0.78#對照組 25 60.01±10.47 31.12±8.06 23.31±6.46 1.44±0.56#與對照組比較:P＞0.05

?

3 討論

多種慢性疾病如糖尿病的患者,其肺結核病潛伏感染再燃或重新感染的機率增高。T淋巴細胞亞群是機體免疫系統內功能最重要的一群細胞,主要由CD4+和CD8+兩群細胞組成。正常情況下淋巴細胞亞群之間相互協調、相互平衡,使機體處于免疫穩定狀態,可抵抗外界病原體的入侵。因此,T淋巴細胞在機體免疫系統對抗病毒感染中起關鍵作用[3,4]。本研究通過檢測正常人和糖尿病合并肺結核患者T淋巴細胞亞群,進一步了解糖尿病合并肺結核感染者T細胞免疫的變化。研究結果表明與正常組比較,糖尿病組白細胞總數顯著下降,淋巴細胞百分數和絕對數顯著下降,粒細胞絕對數下降,粒細胞百分數顯著增加;CD3+、CD4+、CD8+細胞百分數和CD4+/CD8+比值無顯著性差異,但CD3+、CD4+、CD8+細胞絕對數均顯著下降。來自墨西哥報告糖尿病合并肺結核死亡患者的骨髓增生減低,有核細胞,尤其粒細胞和淋巴細胞明顯減少,本文的研究結果和尸檢組織的臨床病理觀察一致,提示結核分支桿菌進入呼吸道后,激活免疫系統,機體在清除分支桿菌的同時,免疫器官嚴重受損,尤其是本身患有糖尿病的患者其淋巴細胞特別T淋巴細胞大量死亡,細胞免疫功能下降,細胞免疫功能下降,可能會導致某些條件致病原的繼發感染,因此,糖尿病合并肺結核患者應適當使用免疫調節劑,預防繼發感染。

[1]陳幟賢.實用放射學[M].北京:人民衛生出版社,1998.189-191.

[2]魏 菁,張丙忠,梁蔚文.化療對卵巢癌患者細胞免疫功能的影響[J].中國腫瘤臨床與康復,2002,9（4）:58.

[3]Nichols JE,Niles JA,BobertsNJJr.Human lymphocyte apoptosisafter exposure to influenza A virus[J].JVirol,2001,75:5921.

[4]HengelRL,Nicholson JK,Carbone J.An updateon the use of flow cytometry in HIV infection and AIDS[J].Clin Lab Med,2001,21（4）:841.