潘秀南 廖泰全
(海南省澄邁縣人民醫院檢驗科,海南 澄邁 571900)
尿干化學(dry chemistry)檢測具有檢測項目多、所需尿量少、結果檢測精密度高等優點,擴大了尿液檢查的內涵,極大提高了工作效率。但是,由于尿液成分復雜,干化學項目繁多,其檢測原理各不相同,所以影響因素很多[1,2]。現根據筆者多年來的工作實踐和相關文獻報道,將尿干化學檢測中的常見影響因素總結如下。
最好收集中段尿,女性患者尿液標本中應避免混入經血和陰道分泌物,男性患者如同時進行前列腺和精液檢查,必須先收集尿液標本。干化學檢查不可應用加入抑制劑(如氟化鈉)和防腐劑(如甲苯、甲醛)的尿液,這些化學試劑會對某些成分的測定形成直接的影響。
干化學檢查要求尿液應新鮮,標本留取后越早檢查越好,從尿液的排出到檢驗應在2h內完成。尿液放置時間過長,不僅可分解破壞尿液中的管型、紅細胞,白細胞等有形成分,造成這些有形成分干化學陽性而鏡檢陰性的所謂假陽性。還可因細菌等各種因素引起尿液化學成分的改變,如由于尿中細菌的大量繁殖使葡萄糖和蛋白質的分解;細菌分解尿素,使尿液PH值增高;久置使尿中尿素分解和鹽類析出形成結晶,以致尿比重下降;膽紅素在陽光照射下成為膽綠素,使膽紅素含量減少或呈假陰性;尿膽原見光分解成尿膽素,以致尿膽原減少或呈假陰性;乙酰乙酸是酮體的主要形式,尿標本的長時間放置,會降低酰乙酸含量逐漸,而逐漸升高β-羥丁酸和丙酮的含量,由于三種酮體物質檢測的靈敏度差異甚大,可造成檢測結果很多大的差異。
由于同一項目不同廠家的試紙反應原理也不盡相同,尿試紙帶各項目的反應原理不同,所以應選擇與尿液分析儀相配套的試紙條,同時各實驗室不可頻繁更換試紙廠家。尿液試紙開封后應一周內用完,且每次使用后必須塞緊筒蓋,避免放入冰箱保存,以導致其吸水變質或空氣氧化。室溫保存在15 ℃~25 ℃的通風干燥處為宜。一般試紙浸濕時間要求控制在1~2s的時間內,室內溫度增高和浸濕時間的延長,會增強蛋白質、葡萄糖、尿膽原和膽紅素的陽性,減弱酮體陽性,導致PH降低。浸濕后的試紙帶不宜甩動,以免互相污染影響結果,同時禁止用手觸摸試紙帶上任何一個測試模塊。
藥物具有生物活性,藥物本身及其代謝產物干擾尿液測定的現象并非少見。臨床治療中濫用抗生素的現象時有發生,許多新藥對臨床檢驗的干擾還尚未發現。藥物因素對檢驗結果的影響始終困擾著檢驗工作者,有時甚至是難以避免的。青霉素是臨床最常用的抗生素,滴注后76%于6 h內以原形從尿中排出。青霉素結構中含有的肽鍵與蛋白質分子結構類似,可增強磺柳酸法結果,減弱干化學法結果。干化學法的原理是試紙帶膜塊上pH值的變化。青霉素分子結構中的-COOH可電離出H+,該離子可導致pH值的變化而減弱尿蛋白的陽性。因此,對于靜脈滴注青霉素治療的患者,尿液檢查最好選擇在5~6 h后,應考慮到不同的測定方法應的不同干擾作用,干化學法減弱結果甚至為假陰性。氧哌嗪是青霉素的衍生物,其分子結構中含有兩個牢固結合的肽鍵,與磺柳酸可發生明顯的結合,可產生類似尿蛋白的假陽性反應。氧哌嗪青霉素不影響干化學法的檢測,而影響磺柳酸法尿蛋白的測定。因此,臨床檢驗時在遇到磺柳酸法尿蛋白強陽性,與顯微鏡檢查或儀器檢測結果明顯不符時,應了解用藥史,詳細詢問病情,及時反饋給臨床。另外,尿中含大量慶大酶素和頭孢時,可降低白細胞的檢測結果,出現與鏡檢結果不符的現象。尿液中含有呋喃坦啶和大量膽紅素時,可對白細胞的顯示色反應形成干擾,升高白細胞的測定結果。
維生素C是最常用的維生素類藥物。本藥口服或滴注后體內代謝快,水溶性好,尿中濃度迅速升高。高濃度的維生素C可使尿中葡萄糖、隱血、膽紅素和亞硝酸鹽的結果減弱或出現假陰性。維生素C具有較強的還原性,對尿液成分測定的影響機制可理解為競爭性抑制反應。維生素C通過還原過氧化氫,在一定程度上降低了過氧化氫的濃度,從而影響到葡萄糖的測定。維生素C對尿隱血的影響與葡萄糖類似,通過對試紙帶膜塊上過氧化物的還原,使亞鐵血紅素還原過氧化物釋放出的[O]減少,影響到色原(鄰連甲苯胺或四甲基聯苯胺)的氧化。高濃度的維生素C抑制偶氮反應和重氮化反應,從而干擾膽紅素和亞硝酸鹽的測定。一般認為,常規劑量口服維生素C不會影響實驗結果,但大劑量口服特別是靜脈滴注時,可在30min迅速升高尿中維生素C的濃度,并且隨著尿液的濃縮其濃度不斷上升。不同批號的試紙抗維生素C的干擾不同,不同濃度的維生素C對尿液檢查的影響不同,同樣濃度的維生素C對尿液中不同成分的影響也不相同。從事尿液分析的檢驗人員,應參照本實驗室的試紙和儀器,建立健全維生素C在多大濃度范圍內才對以上實驗影響程度及產生的影響如何,選擇維生素C滴注后的最短取尿時間。
尿液如被他氧化性污染物,如:84消毒液污染,試紙帶與污染物起氧化反應可致潛血出現假陽性結果。尿液如受季胺類化合物污染,可導致蛋白出現弱陽性。
除了干化學試紙帶受諸多因素的影響外,不同尿液分析儀檢測的靈敏度也有所不同。目前,任何一臺尿液分析儀對顯微鏡檢查的起到過篩實驗的作用,即使可進行胞分布直方圖及無玻片鏡檢細報告的電腦遙控顯像尿液分析儀,也不能完全取代顯微鏡。基于以上原因,實驗室需要常規鏡檢的情況至少應包括:①標本留取前使用了對尿液檢查有影響的藥物紅細胞、亞硝酸鹽、白細胞、尿蛋白有陽性者或四項均陰性而尿維生素C(++)以上;②泌尿系統或可疑泌尿系統疾病的患者;③近期內尿檢異常正在治療觀察的患者。④尿液混濁或尿色異常者;⑤可疑尿中有腎上皮細胞、管型、病理性結晶、亞硝酸鹽還原酶陰性的細菌等異常成分。
以上所述各種影響因素都是在日常檢驗工作中經常遇到的,所以我們要高度重視,必要時在報告中注明,為臨床提供客觀、準確的檢驗依據。
[1]葉應嫵,王毓三.全國臨床檢驗操作規程[M].3版.南京:東南大學出版社,2006.
[2]黃山,許健,鄧小林.醫學實驗室全面質量管理理論與實踐[M].貴州:貴州科技出版社,2009.