楊 柳
(吉林市婦產醫院,吉林 吉林132000)
TORCH是一組病原微生物的英文首寫字母的縮寫。TORCH檢驗包括對弓形蟲、風疹病毒、巨細胞病毒、單純皰疹病毒和其他相關病毒的血清學和核酸檢驗。
臨床實踐證明,孕婦在妊娠早期如果感染TORCH這些病原體,均有可能引起胚胎或胎兒流產、早產、宮內發育遲滯,嚴重的可造成胎兒畸形、死胎或新生兒死亡的后果。對感染TORCH的患者,目前尚缺乏有效的治療方法,因此,對孕婦進行臨床監測具有十分重要的意義。
對妊娠婦女進TORCH檢驗主要包括血清免疫學和核酸檢驗兩大類。血清免疫學項目通常包括特異IgM、IgG做親和力IgG、IgA抗體等,目前在國內應用最廣泛的是特異IgM抗體,其次還有IgG抗體,個別實驗室,還進行做低和力特異IgG抗體的檢測。TORCH核酸檢驗在國內目前基本上很少開展,除個別檢驗項目如CMV DNA以外,TOXO和HSV核酸試劑盒均沒有經過國家食品藥品監督管理局批準。
對TORCH檢測具體說有以下幾方面臨床意義:
一是特異IgM、IgA和IgG抗體的臨床意義。特異IgM抗體是病原體感染后出現最早的抗體,特異IgM抗體檢測陽性,尤其是高滴度特異IgM抗體,提示可能有相應病原體的急性感染。隨著感染后進展,特異IgM抗體滴度逐步降低,直至消失。特異IgG抗體出現,且滴度逐步增加,如果發生在前后不同時間的2次特異IgG抗體檢測中,第2次檢測較第1次檢測的滴度增加4倍以上則提示為近期感染。在目前的特異IgM和IgG抗體ELISA檢測方法中前者多使用捕獲法,后者多使用間接法。特異IgA抗體也是較早出現的抗體之一。
二是特異的低親和力IgG抗體的臨床意義。檢測此類抗體的目的是在特異IgG抗體陽性的情況下,驗證是否為近期感染的一種方法。其基本原理是,當機體感染病原體后,初次免疫應答后產生的抗體,通常為低親和力(有功能的親和力)抗力,經過數周或數月的親和力成熟過程后,其與抗原的互補更好,而成為高親和力抗體。在免疫測定中,臨床檢查中加入尿素或其他變性劑,則可測出可耐受及不能耐受尿素等變性劑作用的抗體,不能耐受的則為低親和力抗體,該類抗體的出現反映的是急性或近期感染。特異IgG抗體親和力的測定的意義是,可排除患者前4-5個月內發生的感染,其對第1個月的特異IgM和IgG抗體均陽性的妊娠婦女尤其有用,如果此時特異IgG抗體為高親和力抗體,則說明為孕前感染對胎兒影響不大。但是,特異IgG抗體親和力測定結果也有一定的局限性,即由于低親和力抗體有可能持續達1年之久。因此,在IgM抗體存在的同時,其并不一定意味著近期感染。有些患者會出現臨界或“灰區”結果。出現此類情況時,可與其他血清學試驗(特異的IgA和IgE抗體)聯合檢測,可作為近期感染的確認試驗,而單獨檢驗結果不能作為確認試驗結果。
三是母嬰成對樣本IgG和IgG抗體的蛋白印跡試驗的臨床意義。IgG抗體可通過胎盤由母體進入胎兒而IgA和IgM抗體則不能,但在出生過程中,卻可能發生特異的IgA和IgM抗體從母體進入胎兒體內的情況。一般胎兒體內來自母體的IgA和IgM抗體持續時間短,只有數天。因此為判斷嬰兒是否感染特定的病原體,可進行母嬰成對樣本IgG和IgM抗體的WB。如果嬰兒血液循環中的特異抗體并非來自母體,則可在進行母體和嬰兒血清進行WB時,可出現不同的條帶,其原因可能為對病原體的免疫應答在胎兒和母體間不一樣。單用IgA抗體的WB最不敏感,聯合IgG和IgM抗體的WB最敏感。
四是病原體核酸檢驗的臨床意義。用于TORCH病原核酸測定的臨床樣本主要有血液、羊水、尿液、腦脊液等。采用PCR法測定病原體核酸是判斷特定病原體急性感染的最直接的證據。采用羊水進行PCR測定。以孕婦是有一定的侵害性。因此建議,應在血清學檢測陽性或有疑問時,方可運用此方法。
關于TORCH檢驗程序的建立及檢測結果的認識。
建立一個切實可行的TORCH檢測程序和報告程序,對于避免錯誤解釋檢驗結果,防止發生臨床醫生錯誤引導孕婦選擇不當的流產、引產具有重要意義。如何建立一個合適的檢驗程序并進行準確的結果解釋,主要應該堅持以下幾個原則:一是檢測時使用高質量的IgM、IgA、IgG特異抗體檢測試劑。二是使用高質量的特異IgG親和力檢測試劑。三是使用高質量的病原體核酸檢測試劑。
不同的檢測結果分為原發感染和復發。區分原發感染和復發感染是很重要的。IgM抗體陽性并不能確定是原發感染,IgM抗體可在原發感染后持續數月或在復發后出現,原發感染的檢測并無“金標準”,目前可用IgG抗體親和力來區別原發還是復發感染,原發感染IgG抗體親和力低,而復發感染或過去感染IgG親和力高。對于IgG+IgM+且IgG抗體低親和力者,認為是有高度傳染性,需要進一步檢查羊水病毒來確認胎兒是否受到病原體感染,以決定是否終止妊娠。對不確定檢測結果者或IgM+IgG-的婦女,應該在3周后重新檢測以確定血清狀態。所有CMV IgM+IgG+的患者樣本都需測CMV IgG抗體親和力,孕期>20周的患者回顧性檢測前3個月的血液。這個檢測程序最重要的,是可以判斷孕婦感染病毒的時間,以區分原發還是復發感染。
RV的篩查方法與CMV相似,如果母體血IgM+,那么IgG抗體結果決定該婦女是血清陽性(免疫)或者血清陰性(未免疫)。該婦女如果未免疫,那就應該每月重復檢測血清標本直到妊娠的第5個月末期。如果母體血是IgM+IgG+,下一步應檢測同一血樣的IgG抗體親和力來估算感染的時間。低親和力表示近期感染高親和力提示既往感染或重新感染。中等親和力無法下結論,需在2~3周后重新采血檢測。如果母體血IgM+IgG-,懷疑原發感染,需在2-3周后重新采血檢測。若結果還是一樣(IgM+IgG-)可以為IgM結果是非特異性的,表示該婦女未感染過(盡管她的血清為陽性仍應按照上述方法跟蹤檢測,直到妊娠的第5個月末期)。若該婦女發生了血清轉化(IgM+IgG+),可以確定為原發感染,如果她希望繼續妊娠則應做產前診斷。檢測臍帶血IgM抗體是比較好的方法,因為它有最好的預見價值。產后診斷則應選擇新生兒血清學診斷(6~12個月測IgM抗體,IgG抗體可在6個月后檢測),也可選擇利用新生兒呼吸道分泌物免疫病毒的分離方法。
臨床實踐證明,對于孕婦血樣中RV IgM抗體檢測的結果需要認真的分析,任何皮疹或皮疹接觸史,受孕前RV的檢測和接種史都需要進行考慮,否則很容易得出錯誤的解釋。不僅對RV是如此,對于TORCH感染的所有病原體檢測都要按照合適的檢驗程序檢驗,并對結果進行恰當的解釋,以避免錯誤診斷和不必要的終止妊娠。TORCH檢驗項目頗多,目前尚不能依靠單一項目確定診斷。以特異IgM抗體為例,其原因之一是特異IgM抗體檢測常會由于臨床樣本中可能存在的類風濕因子、非特異IgM抗體等干擾因素的影響而出現假陽性的結果。原因之二是檢驗操作失誤所致假陽性結果。原因之三是特異IgM抗體在急性感染期過后仍持續存在,不能做為近期的感染指數。原因之四是實驗室對檢驗結果解釋不當,檢驗項目開展不夠,因此容易造成臨床的錯誤決策。綜上所述,作為臨床實驗室,可以參考上述程序,建立一個實際可行的TORCH臨床檢驗程序,并對結果進行合理的解釋。