快速檢測NDM-1基因的環介導恒溫擴增技術的建立與評價

張苑怡，武娜，朱寶利，陳蕾，朱玉琢

1 吉林大學 遺傳學教研室，長春 130021

2 中國科學院微生物研究所 中國科學院病原微生物與免疫學重點實驗室，北京 100101

3 北京藍譜生物科技有限公司，北京 100101

抗生素是由微生物 (包括細菌、真菌、放線菌屬) 或高等動植物在生活過程中所產生的具有抗病原體或其他活性的一類次級代謝產物，能干擾其他生物細胞發育功能的化學物質。抗生素可以通過抑制細菌細胞壁的合成、抑制細菌蛋白質的合成、抑制核酸的復制和轉錄以及干擾細菌代謝通路等多種藥理途徑殺滅細菌。由于一種抗生素只能針對一種或幾種細菌產生抑制作用，因此醫務人員在使用抗生素時，往往在用藥劑量及抗生素類型方面具有多種選擇，為臨床抗生素污染埋下隱患[1-2]。近年來由于抗生素的不合理使用等多種原因，細菌耐藥現象日益嚴重，大量耐藥菌的出現使人們的生命健康又一次面臨巨大挑戰[3]。

據 2010年 8月 11日出版的英國 The Lancet Infectious Diseases期刊報道，目前有一種新的耐藥基因在一些國家流行，一些西方醫學家稱其為NDM-1基因[4]。同時以blaNDM-1來命名編碼NDM-1的基因。blaNDM-1已發現于肺炎克雷伯式氏菌的180 kb的質粒和大腸埃希氏菌的140 kb的質粒上，由NDM-1基因編碼的酶全長269個氨基酸，與現有的其他金屬-β-內酰胺酶 (Metallo-β-Lactamase) 比對，氨基酸序列的一致性不足33%，且在酶活性位點附近經常伴有獨特的氨基酸殘基及插入序列，并能與碳青霉烯類抗生素緊密結合[5]。在blaNDM-1基因上游的2個區域中還存在能夠抵抗鏈霉素、紅霉素、氯霉素、利福平等抗生素的基因以及消毒劑和磺胺藥物的多種耐藥基因[6-7]。……