環保透明脫蠟液替代二甲苯在病理制片中的應用

姜紅飛

(九江市第一人民醫院病理科,江西九江332000)

二甲苯作為傳統的透明脫蠟溶劑,被長期廣泛應用于常規石蠟制片中,然而二甲苯是一種毒害性較大的試劑,早已引起環保部門的重視。國家有關部門規定室內空氣中二甲苯最高允許濃度為100 mg·m-3[1],而醫院病理技術室的二甲苯室內空氣含量往往會超標數倍。二甲苯對人體的毒害主要通過呼吸道吸入和皮膚接觸進入體內,損害神經系統和血液系統,長期接觸引起神經衰弱綜合征和植物神經紊亂以及皮膚黏膜刺激癥狀,還可引起免疫功能低下、貧血、白細胞減少、皮炎、濕疹和皮膚干燥,尿中也可以出現蛋白管型等。2009-2010年九江市第一人民醫院使用環保透明脫蠟液對組織進行透明、脫蠟,取得了良好效果,報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

本院送檢的病理組織標本,包括胃、腸、肝、脾、腎、淋巴結、乳腺、子宮等組織,選取環保透明脫蠟液和二甲苯制片各1 000張。環保透明脫蠟液:江原@牌,無錫江原實業技貿總公司生產;二甲苯:重慶市天府精細化學品廠生產。

1.2 方法

按照常規操作程序使用全自動脫水機進行固定、脫水、透明、浸蠟。透明采用二甲苯和環保透明脫蠟液各2缸,時間均為20 min·缸-1。將處理好的組織常規包埋,在專用病理組織切片機上切成3～4 μ m,烘片、脫蠟。組織脫蠟分別采用環保透明脫蠟液和二甲苯各2缸,每次15 min。最后通過HE染色用光學顯微鏡觀察。

根據常規石蠟包埋-HE染色質量的基本標準[2]進行效果判定。脫蠟后組織切面完整,透明度好,厚薄均勻:細胞核與細胞質染色對比清晰的切片為優質片,稍差的為良片,不好的定為差片。優良率=(優質片數+良片數)/總制片數×100%。

2 結果

2種制片方式的效果比較見表1。由表1可見,環保透明脫蠟液與二甲苯制片優良率差異無統計學意義(P＞0.05),優良率(均≥90%)達到了常規石蠟包埋-HE染色基本標準。

表1 環保透明脫蠟液與二甲苯制片效果比較張

3 討論

二甲苯價格低廉,制片效果好,長期以來在病理組織透明和制片中被廣泛應用,但它屬于芳香族化合物,折光率1.495,沸點144℃,氣味難聞,毒性較強,易揮發,在空氣中最高濃度為100 g·m-3[3]。長期吸入皮膚會危害健康、污染環境,而且制片過程中二甲苯的透明時間如果掌握不好,易使組織收縮、變硬、變脆[4],影響制片質量。

本科使用的一種新型試劑——環保透明脫蠟液是專門為組織病理學和細胞學樣品處理設計的無色無味的有機溶劑,不含芳香族化合物,是一種環保的二甲苯替代物,可用于組織脫水及染色過程中,對儀器無腐蝕性,且無須改變原有程序;安全無毒,無異味符合GB18583-2001《室內裝飾裝修材料粘劑中有害物質限量》標準,透明效果與二甲苯相同,長時間浸泡組織不會使組織變脆,還能增強浸蠟效果,反而有利于切片;不與水混合,即使在潮濕的環境下使用,也不會因吸收水汽而濃度下降;對于脂肪類組織脫水效果更優于二甲苯,其高純度、高穩定性可確保實際應用的質量,是二甲苯的理想代替品。

當然,相對于二甲苯低廉的價格來說,環保透明脫蠟液價格偏高,溶解中性樹膠速度較慢,有時還需要放在烤箱中加熱以加速其溶解;但透明脫蠟液試劑能很好地應用于外檢常規制片工作中,同時也適用于冷凍切片、特殊染色、免疫組織化學,并完全能夠達到滿意的效果,尤其它具有安全性、環保、無毒的優點,為了病理工作人員的健康和保護環境,可以取代毒性較大的二甲苯而應用于臨床。

[1] 中華人民共和國衛生部.工業企業衛生標準[M].北京:人民衛生出版社,1979:11-12.

[2] 中華醫學會.臨床技術操作規范:病理學分冊[M].北京:人民軍醫出版社,2004:3.

[3] 譚常蘭,劉付華,賀美華,等.松節油代替二甲苯快速脫蠟在病理切片中的應用[J].懷化醫專學報,2003,2(1):91.

[4] 龔志錦,詹镕洲.病理組織制片和染色技術[M].上海:上海科學技術出版社,1994:19.