CyclinE和 P27、P53在皮膚癌中的表達及相關性

曹婉維 劉少璇 郭永誼 王曉鴻

CyclinE和 P27、P53在皮膚癌中的表達及相關性

曹婉維 劉少璇 郭永誼 王曉鴻

目的 探討細胞周期蛋白 E(CyclinE)和 P27、P53在皮膚癌中的表達及相關性。方法 應用免疫組化法檢測30例皮膚癌組織中 CyclinE和P27、P53的表達情況。分析三者與皮膚癌Broders標準分級之間的關系,以及 CyclinE與 P27、P53的相關性。結果 皮膚癌組織 CyclinE、P27表達與對照組比較顯著升高(χ2=12.05;χ2=25.15,P＜0.05)。在各級鱗癌組織間比較,CyclinE和 P53表達差異明顯(χ2=9.84;χ2=8.85,P＜0.05);P27在鱗癌組織中的陽性率較對照組低(χ2=3.98,P＜0.05),P27在鱗癌組織各級間比較,差異無統計學意義(χ2=1.16,P＞0.05)。結論 CyclinE、P27、P53在皮膚鱗癌中有異常表達,在皮膚鱗癌中的發生發展中可能起一定作用。

細胞周期蛋白 E;P27;P53;皮膚癌

皮膚鱗狀細胞癌(skin squamous cell carcinoma,SCC)是從正常皮膚的基底細胞發生的惡性腫瘤,其發生是多基因多步驟積累損害的結果,其中基因的異常表達起著非常重要的作用[1]。細胞周期調控基因在腫瘤細胞發生與發展中起重要作用。我們應用免疫組織化學法研究細胞周期蛋白E(CyclinE)在皮膚鱗狀細胞癌(皮膚鱗癌)的表達,以及 P27、P53表達的相關性,探討三者與皮膚鱗癌的發生、發展的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取中山大學附屬第五醫院 2008年 1月到2010年 1月收治,經病理組織學確診且術后標本蠟塊保存完好的皮膚鱗狀細胞癌患者的組織標本蠟塊 30例。男 20例,女 10例,年齡為 35～72歲,平均年齡 53.1歲。按 Broders標準分級:I級 16例,II級 12例,III級 2例。所有病例術前均未接受過化療和放射治療。外科手術中切除的正常人皮膚組織24例作為對照組。

1.2 檢測試劑 CyclinE、P27、P53及 S-P(廣譜)免疫組化試劑盒均購于福州邁新生物技術開發公司。

1.3 檢測方法 采用免疫組織化學 SP法,高溫修復(枸椽酸)抗原,操作方法按試劑盒說明書進行,DAB顯色。以 PBS代替一抗作陰性對照。

1.4 結果判斷標準 顯色后陽性細胞為細胞核內出現棕黃色或棕褐色顆粒為陽性。顯微鏡下找陽性最強的視野檢測10個獨立高倍視野(×400倍),根據陽性腫瘤細胞染色程度及所占百分比,判為陰性(-),細胞不著色;低表達(+),細胞呈淡黃色,細胞數≤25%;中度表達(++),細胞呈黃色,細胞數 26%～50%;高表達(+++),細胞見棕黃色顆粒,細胞數＞50%。

1.5 統計學方法 采用SPSS 13.0軟件進行分析,CyclinE與P27、P53在皮膚鱗狀細胞癌組織的表達及其相關性采用 χ2檢驗和Spearman等級相關法。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 CyclinE與P27、P53在皮膚鱗狀細胞癌組織中表達及與Broders標準分級之間的關系 CyclinE在正常人皮膚鱗狀細胞細胞核內未見陽性表達。CyclinE和 P53在鱗癌組織中表達較對照組高,兩者比較差異有統計學意義(χ2=12.05;χ2=25.15,P＜0.05)。同時在各級鱗癌組織間比較,CyclinE和P53表達差異有統計學意義(χ2=9.84;χ2=8.85,P＜0.05)。P27在鱗癌組織中的陽性率較對照組低,兩者差異有統計學意義(χ2=3.98,P＜0.05),P27在鱗癌組織各級間比較,差異無統計學意義(χ2=1.16,P＞0.05)。見表 1。

2.2 皮膚鱗狀細胞癌組織 CyclinE與 P27、P53表達的相關性分析 30例皮膚鱗癌中,CyclinE與P27表達呈負相關性(r=-0.823,P＜0.05);CyclinE與 P53呈正相關性(r=0.768,P＜0.05)。

表 1 皮膚鱗狀細胞癌組織中周期蛋白 E、P27、P53免疫組化結果(例數)

3 討論

皮膚癌的發生率在近幾十年有所增加。紫外線照射在人皮膚腫瘤中的作用已得到流行病調查的確認。此外,也與種族、電離輻射、經常接觸砷、瀝青等有關。皮膚癌的發生發展是一個多基因多步驟的過程,在分子水平上有癌基因的激活,抑癌基因的失活,腫瘤抑制基因的異常,凋亡機制發生缺陷等,這在皮膚癌的預防、早期診斷及治療的分子策略方面提供新的思路[2,3]。

Bito等[4]檢查了CyclinE在正常人皮膚、鱗癌中的表達,發現在角化不良細胞內較高表達,而在鱗癌中的表達較少,認為 CyclinE表達下調在角化細胞腫瘤形成方面起一定作用。然而有研究[5]發現,CyclinE在皮膚鱗癌組織中高表達。

本研究顯示,CyclinE在皮膚鱗癌組織中的陽性表達率較正常人對照組高,且與分化和度呈相關性,分化程度越低,陽性表達率越高,提示 CyclinE在皮膚鱗癌組織分化轉化中起作用。這與李靈等[6]的研究結果相同。

本研究顯示,P27在皮膚鱗癌組織中的陽性表達較正常人對照組低,提示可能組織在癌變過程中 P27的陽性表達及表達程度在衰減,從而失去對細胞增殖的負性調控作用,導致腫瘤的發生。在皮膚鱗癌組織分級間表達強度差異無統計學意義,提示P27可能與皮膚鱗癌組織腫瘤細胞分化無關。

P53在正常人皮膚組織中的陽性表達率為 100%,表達強度較低,但較正常人對照組高,表明 P53在分級間表達強度差異有統計學意義,是反映皮膚鱗癌腫瘤細胞的惡性程度的指標。

本研究進一步證實了 CyclinE、P27、P53在皮膚鱗癌中有異常表達,在皮膚鱗癌中的發生發展中可能起一定作用。三者的相關性,有待進一步研究。

[1] 耿國軍,劉林嶓.C-erbB-2、P16、nm23-H1與皮膚鱗狀細胞癌的關系.河南腫瘤學雜志,2005,18(1):74-76.

[2] 馬文麗,鄭文嶺.分子腫瘤學.北京:科學出版社,2003:76-80.

[3] 李明鳴,劉林嶓,馬長路.NF-κb/p65,p-IκBa,IκKa在皮膚 SCC和BCC中的表達和意義.中國美容醫學,2006,15(12):1339-1341.

[4] Bito T,Ueda M,Ito A.etal.Less expression of Cyclin E in cutaneoussquamous cell carcinomas than in begnign and premalignant keratinocytis lesions.Jcutan pathol,1997,24:305-308.

[5] 曲才杰,史同新,林桂銘.P27和細胞周期蛋白 E在Bowen病及皮膚鱗狀細胞癌中的表達.中華皮膚科雜志,2006,39(2):71-73.

[6] 李靈,李利,張誼芝.細胞周期蛋白 E、P27、增殖細胞核抗原在皮膚鱗狀細胞癌中的表達.中華皮膚科雜志,2006,39(11):656.

Correlation of CyclinE,P27 and P53 protein expressions in skin cancer

CAOWan-wei,LIU Shao-xuan,GUO Yong-yi,et al.Department of Pathology,The Fifth Affiliated Hospital of Syb Yat-sen University,Zhuhai 519000,China

Objective To investigate the expression and their relationship of CyclinE,P27,P53 skin cancer.Methods Theexpression of CyclinE,P27,P53 in cancer tissueswereassessed by immunohistochemical method.The relationship between these three and the Broders standard classification,and the correlation of CyclinE and P27,P53WEREANALYZED.Results Expression of CyclinE,P27 in skin squamous cell carcinoma was significantly higher than in control group(χ2=12.05;χ2=25.15,P＜0.05).P27 in squamous cell carcinomawas lower than those in the controlgroup(χ2=3.98,P＜0.05).Compared between squamous cell carcinoma atall levels,expression of CyclinE and P53 was significantly different(χ2=9.84;χ2=8.85,P ＜0.05)and expression of P27 was notsignificantly different(χ2=1.16,P＞0.05).Conclusion There is abnormalexpression of CyclinE,P27 and P53 in skin squamous cell carcinoma.The abnormal expression p lay a role in the development of squamous cell carcinoma in the skin.

CyclinE;P27;P53;Skin cancer

王曉鴻 E-mail:david_20070424@126.com

519000中山大學附屬第五醫院病理科(曹婉維劉少璇 王曉鴻),檢驗科(郭永誼)