乳酸環丙沙星注射液細菌內毒素檢驗方法分析

陳萬勝

(河南省許昌市食品藥品檢驗所 河南許昌 461000)

乳酸環丙沙星注射液細菌內毒素檢驗方法分析

陳萬勝

(河南省許昌市食品藥品檢驗所 河南許昌 461000)

目的 探討研究乳酸環丙沙星注射液細菌內毒素檢驗方法。方法 采用鱟試劑細菌內毒素檢查法進行乳酸環丙沙星注射液細菌內毒素檢驗。結果 0.1%乳酸環丙沙星注射液對細菌內毒素檢查無干擾;5批樣品家兔熱原檢查結果均為陰性,與細菌內毒素檢查法檢查結果相同。結論 乳酸環丙沙星注射液采用細菌內毒素檢查法(BET)進行熱原檢查,該方法簡便快速,可以取代家兔法檢查熱原。鱟試劑檢驗方法更簡便、快速、靈敏、準確。

乳酸環丙沙星注射液 細菌內毒素 檢驗方法 分析

乳酸環丙沙星注射液是臨床常用的廣譜抗生素,已得到臨床廣泛應用。根據鱟試劑能與細菌內毒素發生非常靈敏的特異性反應機理[1],我們對0.1%乳酸環丙沙星注射液的細菌內毒素檢測方法進行了研究。

1 臨床材料

1.1 一般材料

鱟試劑(動態濁度法專用),福建省福州東方鱟試劑廠生產的批號:990820,靈敏度:0.5EU/mL,裝量:0．5mL/支。細菌內毒素檢查用水,批號:000313,裝量:2mL/支,湛江海洋生物制品廠生產。細菌內毒素國家標準品,批號:981,裝量:9000EU/支,中檢所制。乳酸環丙沙星注射液:廣西裕源藥業有限公司國藥準字H20033501,批號:201012856 201035846 201052321 201003656 201045741,每瓶100mL。

1.2 實驗材料

器皿自動旋渦混合器:天津藥典標準儀器廠;DC-3型干式恒溫器:南京三愛斯技術有限開發公司;試管、吸管等所需器皿均經250℃lh除去外源性內毒素。

2 方法與結果

2.1 細菌內毒素限值的確定

乳酸環丙沙星注射液熱源檢查劑量按家兔體重每1kg注射3mL。靜脈給藥時無任何不良反應的內毒素閾劑量K=5Eu/Kg,依據2000年版藥典規定本品熱原檢查注射液劑量M=12mL/kg[2],本品細菌內毒素理論限值L=0.417Eu/mL。

2.2 最大有效稀釋倍數

L值確定后,根據所用鱟試劑的λ b值確定樣品的稀釋倍數。最大有效稀釋倍數MVD=L/λ b[3],本實驗采用λ b為0.5Eu/mL的鱟試劑,0.1%乳酸環丙沙星注射液MVD=1.2。

2.3 抑制增強試驗

我們采用λ=0.5.5Eu/mL的鱟試劑做抑制增強試驗[4]。用細菌內毒素檢查用水將乳酸環丙沙星注射液稀釋3.2倍;將內毒素工作標準品用乳酸環丙沙星注射液稀釋液樣品溶液溶解,在旋渦混合器上進行混合15min,然后制備成合適的稀釋濃度,1.0Eu/mL, 0.5Eu/mL,0.25Eu/mL,0.125Eu/mL;進行抑制增強試驗,乳酸環丙沙星注射液稀釋液樣品溶液代替水為陰性對照,測的了批樣品的反應結果一致;說明0.1%乳酸環丙沙星注射液對細菌內毒素檢查無干擾,具體見表1。

表1 抑制增強試驗結果

2.4 樣品的細菌內毒素檢測

將5批樣品與0.5Eu/mL鱟試劑混合后,按細菌內毒素檢查法檢查,均為陰性。5批樣品家兔熱原檢查結果(按照中國藥典1995年版操作)均為陰性,與細菌內毒素檢查法檢查結果相同。

3 結語

中國藥典200年版規定,乳酸環丙沙星注射的熱原檢查采用家兔檢查法[5];通過我們對本次實驗結果表明,0.1%乳酸環丙沙星注射液采用細菌內毒素檢查法(BET)進行熱原檢查,該方法簡便快速,可以取代家兔法檢查熱原。鱟試劑檢驗方法更簡便、快速、靈敏、準確[6]。

[1]曲道杰．20%、25%、50%葡萄糖注射液細菌內毒索檢驗方法的試驗研究[J]．藥物分析雜志,2006,15(3):305～308．

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M]．北京:化學工業出版社,2005:附錄86,204．

[3]中國藥品生物制品檢定所．中國藥品檢驗標準操作規范[M]．北京:中國醫藥科技出版社,2001:389．

[4]黃俊.乳酸環丙沙星注射液細菌內毒素檢查法的建立［J］.廣西醫學,2009,31(5):875.

[5]陳銘軍.鱟實驗法檢查乳酸環丙沙星注射液的細菌內毒素限量［J］.廣西中醫學院學報,2000,17(1):53.

[6]黃清泉,夏振民.藥品細菌內毒素檢查的實驗設計［J］．中國藥學雜志,2007,32(2):72.

R927

A

1674-0742(2011)05(a)-0129-01

2010-11-30