腦脊液常規(guī)檢查對(duì)隱球菌性腦膜炎的診斷意義

[摘要] 目的 分析腦脊液常規(guī)檢查對(duì)隱球菌性腦膜炎的診斷意義。方法 細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接觀察和墨汁染色法確認(rèn)。結(jié)果 23例隱腦患者腦脊液中均在腦脊液常規(guī)檢查中找到隱球菌，后經(jīng)墨汁染色確認(rèn)。結(jié)論 腦脊液常規(guī)檢查找到隱球菌即可診斷隱球菌性腦膜炎。

[關(guān)鍵詞] 腦脊液常規(guī)檢查; 新型隱球菌; 墨汁染色; 隱球菌性腦膜炎

[中圖分類號(hào)] R512.3 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701(2010)07-135-01

新型隱球菌腦膜炎是真菌直接侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)引起的腦或腦膜炎癥，常呈亞急性或慢性起病。由于臨床表現(xiàn)及腦脊液檢查與結(jié)核性腦膜炎極為相似，所以早期容易被誤診。新型隱球菌腦膜炎病程長(zhǎng)，治療困難，預(yù)后較差，即使是正規(guī)的治療，病死率仍高達(dá)20%～30%[1]。因此為臨床提供早期的診斷依據(jù)是治療的關(guān)鍵。依據(jù)近幾年來的工作經(jīng)驗(yàn)，筆者認(rèn)為腦脊液的常規(guī)檢查是診斷隱球菌性腦膜炎的快速、簡(jiǎn)便、檢出率極高的一種方法，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

我院2004～2009年6月腦膜炎住院患者共328例，其中隱球菌性腦膜炎23例中男15例，女8例。年齡8～65歲，平均51歲。診斷標(biāo)準(zhǔn):首發(fā)癥狀為頭痛，常伴有惡心、嘔吐及發(fā)熱，多為不規(guī)則發(fā)熱，多數(shù)患者早期腦膜刺激征陽性，顱內(nèi)壓增高，腦脊液墨汁染色查隱球菌陽性。

1.2 方法

腰穿抽取患者腦脊液2～4mL，分2管送檢。第一管分別進(jìn)行物理檢驗(yàn)(顏色、透明度)、化學(xué)檢驗(yàn)(蛋白、糖和氯化物含量)及細(xì)胞計(jì)數(shù)。在低倍鏡下調(diào)節(jié)到光線最暗，然后調(diào)整微調(diào)，可見到菌體的雙層反射光圈，在轉(zhuǎn)至高倍鏡下，有時(shí)可見到啞鈴狀菌體。另一管做墨汁染色，3000r/min離心10min，取沉淀加入適量的墨汁，鏡下觀察可見黑色背景下一圓形透亮菌體，外包一層透明的莢膜。

1.3 器材

雙目電光源生物顯微鏡、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、離心機(jī)、墨汁。

2 結(jié)果

23例隱球菌性腦膜炎患者均在腦脊液常規(guī)檢查中找到隱球菌，后經(jīng)墨汁染色法證實(shí)。

3 討論

一般情況下，因?yàn)殡[球菌性腦膜炎在臨床的腦膜炎病例中還占少數(shù)，檢驗(yàn)技術(shù)人員對(duì)隱球菌鏡下形態(tài)識(shí)別的經(jīng)驗(yàn)不足，加上隱球菌性腦膜炎與結(jié)核性腦膜炎的臨床癥狀極為相似，臨床醫(yī)生很少會(huì)單獨(dú)開出墨汁查隱球菌的申請(qǐng)單，這是臨床上隱球菌性腦膜炎漏診、誤診的主要原因。所以，臨床醫(yī)生應(yīng)加強(qiáng)與檢驗(yàn)人員的溝通，在臨床經(jīng)結(jié)核性腦膜炎的藥物治療無好轉(zhuǎn)后，應(yīng)考慮隱球菌性腦膜炎的可能性，在開出隱球菌申請(qǐng)單的同時(shí)主動(dòng)與檢驗(yàn)人員聯(lián)系，使檢驗(yàn)人員在做腦脊液常規(guī)檢查注意辨別隱球菌。

計(jì)數(shù)池中隱球菌的形態(tài)特點(diǎn):低倍鏡下白細(xì)胞的折光性強(qiáng)且略帶熒光，紅細(xì)胞折光性弱，略帶橙紅色，而隱球菌介于兩者之間。高倍鏡下菌體大小不等，多數(shù)小于白細(xì)胞，約為白細(xì)胞的1/4，甚至更小。菌體呈圓形，周邊清楚有圓形環(huán)，調(diào)節(jié)微調(diào)可見到較清楚的莢膜，有時(shí)可見到啞鈴狀菌體，它是隱球菌芽生孢子的特征性結(jié)構(gòu)。菌體內(nèi)還可見到點(diǎn)狀折光性強(qiáng)的結(jié)構(gòu)。而白細(xì)胞略帶淺黃色，胞體內(nèi)均勻分布顆粒狀，周邊無清楚的圓環(huán)狀邊界，無莢膜等特點(diǎn)，與隱球菌不同。我們通過觀察發(fā)現(xiàn)隱球菌與細(xì)胞在高倍鏡下形態(tài)明顯不同，不難區(qū)別，而且直接計(jì)數(shù)與墨汁染色隱球菌陽性率相比并無差別。因此，直接在計(jì)數(shù)池中對(duì)隱球菌計(jì)數(shù)是準(zhǔn)確、可行的，再需墨汁染色加以確證就可以診斷隱球菌性腦膜炎。

另外，在工作中我們還發(fā)現(xiàn)腦脊液中隱球菌的數(shù)量與病情有著直接的關(guān)系，因此，建議臨床醫(yī)生在治療的過程中多次復(fù)查、計(jì)數(shù)隱球菌，以指導(dǎo)臨床用藥。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 萬均成，文芳. 在細(xì)胞計(jì)數(shù)板中直接識(shí)別腦脊液隱球菌的方法及臨床意義[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2006，21(6):508.

(收稿日期:2009-12-30)