呂氏美蘭染色法與PCR法檢測淋病奈瑟菌結(jié)果比較

[摘要] 目的 比較兩種淋病奈瑟菌檢測方法的優(yōu)缺點(diǎn)。方法 對臨床114例疑似淋病患者進(jìn)行呂氏美蘭染色法和PCR法進(jìn)行淋病奈瑟菌檢測。結(jié)果 PCR法檢出率比呂氏美蘭染色法高出10.5%。二者相比，有顯著性差異(P<0.01)。結(jié)論 呂氏美蘭染色法方便、價廉，便于基層醫(yī)院開展，但檢測率低。PCR法具有極高的靈敏度和準(zhǔn)確性，但操作略繁瑣，費(fèi)用較高。

[關(guān)鍵詞] 淋病奈瑟菌; 呂氏美蘭染色法; PCR法

[中圖分類號] R759.2;R446 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-9701(2010)13-130-01

淋病奈瑟菌俗稱淋球菌(gonococcus)，是人類淋病的病原菌。人對該菌有易感性，是其唯一的天然宿主。主要引起人類泌尿生殖系統(tǒng)黏膜的急性或慢性化膿性感染[1，2]，是危害比較大的性傳播疾病。如何提高淋球菌的檢出率和檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，對于性病患者的治愈起到很大作用。我所采用呂氏美蘭染色法和PCR法對114例疑似淋病奈瑟菌感染患者進(jìn)行對比檢測，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 臨床資料

1.1 標(biāo)本來源

我所門診疑似淋病奈瑟菌感染患者生殖器分泌物標(biāo)本，共計114例。其中前列腺液標(biāo)本52例，宮頸或陰道分泌物標(biāo)本62例。

1.2 方法和試劑

1.2.1 呂氏美蘭染液(自配) 美蘭酒精飽和溶液30mL和氫氧化鉀溶液70mL混合即成。染色方法，分泌物涂片固定后，滴加呂氏美蘭染液染色1min，小水沖洗后吸干鏡檢[3]。

1.2.2 PCR NG-DNA檢測 PCR NG-DNA診斷試劑和PCR基因擴(kuò)增儀均購自廣州達(dá)安基因公司。嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行PCR擴(kuò)增檢測。

1.3 質(zhì)量管理

檢驗(yàn)科醫(yī)務(wù)人員均為具有中級以上本專業(yè)技術(shù)職稱的在崗人員。檢驗(yàn)人員必需參加實(shí)驗(yàn)前PCR檢測專門培訓(xùn)及微生物細(xì)菌形態(tài)檢測培訓(xùn)。

2 結(jié)果

見表1。

檢測后發(fā)現(xiàn)PCR法檢出率比呂氏美蘭染色法高出10.5%，二者相比，有顯著性差異(P<0.01)。28例呂氏美蘭染色法陽性者除1例外PCR法檢測全部陽性，可能標(biāo)本中含有抑制聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)物質(zhì)所致。

3 討論

呂氏美蘭染色法操作簡便，檢測時間短，試劑成本低廉，患者負(fù)擔(dān)也輕，便于基層實(shí)驗(yàn)室開展。本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果也表明呂氏美蘭染色法查處淋病奈瑟菌基本可以確診為淋病，準(zhǔn)確率也較高，十分利于淋病快速診斷治療。但檢出率相較PCR法要低10.5%，容易漏診。有文獻(xiàn)報道，女性患者由于其特殊的生理結(jié)構(gòu)，尿道口與陰道口相距較近，且女性尿道短而直。因此，當(dāng)女性患上感染性疾病(如淋病等)時，就很容易波及到尿道及周圍組織、腺體等從而導(dǎo)致炎癥。又因?yàn)榱懿《嗍怯缮车澜佑|傳染，所以女性尿道一般不是淋病的首發(fā)部位，卻是淋病的好發(fā)部位，70%的女性淋病患者存在尿路感染。女性淋病檢驗(yàn)多由宮頸取材而很少從女性尿道取材，可能是檢出率低的原因[4]。在中青年男女中發(fā)病率更為顯著，加之抗青霉素淋病菌株增多影響了治療效果[5]。PCR法，中文譯為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一種DNA的快速擴(kuò)增技術(shù)，其擴(kuò)增效率之高就象核裂變的“鏈?zhǔn)椒磻?yīng)”那樣。PCR技術(shù)通過兩個短的稱為引物的DNA小片段和一種耐熱的酶的作用，可以在3h內(nèi)把特定的DNA量提高1000萬倍。這種技術(shù)一問世，立刻引起了分子生物學(xué)研究的一場革命，PCR方法不但有極高的靈敏度和準(zhǔn)確性，而且可以同時一次做幾十個擴(kuò)增反應(yīng)，省時省力，檢出率高。本文實(shí)驗(yàn)也可以看出，檢出率相較呂氏美蘭染色法高出10.5%。但也有操作繁瑣、實(shí)驗(yàn)條件要求高、患者負(fù)擔(dān)較高的缺點(diǎn)。綜上所述，兩種實(shí)驗(yàn)方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，各臨床實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)各自的實(shí)際情況選擇適合的方法。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 劉運(yùn)德，樓永良. 微生物學(xué)檢驗(yàn)[M]. 第2版. 北京:人民衛(wèi)生出版社，2008:178.

[2] 何大源，向華國，楊波，等. 涂片與培養(yǎng)及PCR/RLB檢測淋病奈瑟菌的比較研究[J]. 實(shí)用醫(yī)技雜志，2007，14(28):137-139.

[3] 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜. 全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M]. 第3版. 南京:東南大學(xué)出版社，2006:458.

[4] 秦采蓮. 女性淋病檢驗(yàn)取材方法探討[J]. 北京:中國民康醫(yī)學(xué)雜志社，2007，12(19):96.

[5] 劉世香. 24例嬰幼兒淋病的發(fā)病特點(diǎn)與治療體會[J]. 中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2008，5(4):190.

(收稿日期:2010-03-02)