斯蒂芬牌伊力勉膠囊對兔免疫功能促進作用實驗研究

[摘要] 目的 觀察斯蒂芬牌伊力勉膠囊對新西蘭兔免疫功能的影響。方法 新西蘭白兔60只，隨機分組給藥，斯蒂芬牌伊力勉膠囊組分為低、高劑量組，分別口服給予斯蒂芬牌伊力勉膠囊，胎盤片組口服給予胎盤片，人胎盤組織液組肌肉注射人胎盤組織液，陽性對照組給予貞芪扶正膠囊，對照組口服給予空膠囊，給藥結束檢測各組免疫功能指標。結果 斯蒂芬牌伊力勉膠囊高低劑量組胸腺、脾臟指數及單核巨噬細胞吞噬指數相較于對照組均有提高，其血清半數溶血值顯著升高。結論 斯蒂芬牌伊力勉膠囊具有促進兔免疫功能的作用。

[關鍵詞] 斯蒂芬牌伊力勉膠囊; 胎盤; 免疫增強

[中圖分類號] R392 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701(2010)11-13-02

胎盤(placenta)又名“紫河車”，為常用中藥，1578年李時珍《本草綱目》就有記載:人、羊、豬、牛等哺乳動物的胎盤皆可入藥，安神養血，益氣補精。現代醫學研究表明:胎盤含有多種免疫球蛋白、活性肽、激素等生物活性物質及氨基酸、礦物質等成分，是一種機體免疫功能的調節劑和營養、美容保健品，具有促進新陳代謝及延緩衰老等作用[1-3]。斯蒂芬牌伊力勉膠囊以胎盤為主要成分，由邯鄲康業制藥有限公司利用雙層膠囊專利技術研發，為了進一步研究斯蒂芬牌伊力勉膠囊對免疫功能的影響，本研究進行了多項相關免疫學實驗。

1 材料與方法

1.1 試驗藥物

斯蒂芬牌伊力勉膠囊，由河北邯鄲康業制藥有限公司提供，樣品編號:TS-200805，含量:1mg/粒、2mg/粒、5mg/粒，保存條件:低溫避光。陽性對照品:貞芪扶正膠囊，樣品批號:20070808，含量:0.35mg/粒，保存條件:低溫避光。

1.2 試驗動物

種屬:新西蘭白兔;數量:60只;性別:雌雄各半;體重范圍:2.0～2.5kg;來源:河北省實驗動物中心;動物合格證號:806060。

飼養條件:中央空調調控溫度和濕度，在籠內飼養，每籠2只。溫度20～25℃，相對濕度 40%～70%，控制光照明12h，暗12h。動物自由攝食及飲水。

1.3 實驗方法

1.3.1 脾臟、胸腺器官重量系數測定 新西蘭白兔試驗前適應性飼養7d后開始試驗，按性別、體重隨機分為6組，每組10只，斯蒂芬牌伊力勉膠囊組分為低、高劑量組，分別口服給予斯蒂芬牌伊力勉膠囊5、10mg/kg，胎盤片組口服給予胎盤片150mg/kg，人胎盤組織液組肌肉注射人胎盤組織液0.1mL/kg，陽性對照組口服給予貞芪扶正膠囊1.25g生藥/kg，對照組口服給予空膠囊，每天給藥一次，連續7d。末次給藥后次日稱重處死，無菌條件下取胸腺、脾臟稱重并計算出重量系數(臟器質量/ 體重)[4]。

1.3.2 單核細胞吞噬功能測定 參考小鼠碳粒廓清實驗[5]，分組及給藥方法與1.3.1項相同，末次給藥30min后靜脈注射5mg/kg 中華牌墨汁，分別于注射后1、5min 眼眶取血，各20μL，分別加入2mL 0.1mol/L Na2CO3溶液，混勻后用紫外分光光度計于波長600nm檢測OD值，計算廓清指數K(K=lg OD1-lg OD2/t2-t1)。

1.3.3 血清溶血素測定 同上分組及給藥方法，給藥第3天，兔腹腔注射20%綿羊紅細胞(SRBC)0.6mL /只，于末次給藥(第7天)后1h耳動脈取血2mL，2000rpm離心10min。取血清，生理鹽水稀釋500倍，加入綿羊紅細胞稀釋液以及1︰10豚鼠血清稀釋液，然后37℃水浴保溫30min，冰浴終止反應，1500rpm離心5min，取上清液1mL加都氏試劑3mL，搖勻放置10min，于540nm波長比色讀取吸光度值。按下列公式計算每只動物半數溶血值HC50。

HC50=(樣品的吸光度值/SRBC半數溶血時的吸光度值)×稀釋倍數

注:取5% SRBC 0.25mL加都氏試劑至4mL，比色讀取吸光度值，即為SRBC半數溶血時的吸光度值。

1.3.4 統計學方法 試驗結果經Instat(Ver3.0)統計軟件包處理，經方差齊次性檢驗差異無顯著性后，采用t檢驗進行組間比較。

2 結果

2.1 斯蒂芬牌伊力勉膠囊對兔免疫器官重量的影響

從表1可見，斯蒂芬牌伊力勉膠囊高低劑量組的脾臟、胸腺重量系數均明顯高于對照組，尤其對脾臟影響更為明顯。

2.2 斯蒂芬牌伊力勉膠囊對兔單核細胞吞噬功能的影響

從表2可見，斯蒂芬牌伊力勉膠囊高低劑量組碳廓清指數K均高于對照組，顯示斯蒂芬牌伊力勉膠囊能夠增強兔的單核巨噬細胞吞噬功能。

2.3 斯蒂芬牌伊力勉膠囊對兔血清半數溶血值的影響

與對照組相比，斯蒂芬牌伊力勉膠囊5mg/kg、10mg/kg連續給藥7d均可顯著升高兔血清半數溶血值，表明斯蒂芬牌伊力勉膠囊具有增強體液免疫作用，陽性對照貞芪扶正膠囊亦明顯升高兔血清半數溶血值，見表3。

3 討論

胎盤含有豐富的氨基酸、活性肽、激素等生理活性物質，早已是大家公認的機體免疫功能的調節劑和營養、美容保健品，從胎盤中提取的胎盤素在抗氧化和美容化妝品方面已經得到了廣泛的應用[6]。隨著現代分子生物學以及生物技術的發展，人們對于胎盤中發揮功效的活性分子的研究以及對于胎盤活性物質提取工藝的研究方興未艾。

本實驗結果表明，以胎盤為主要原料的斯蒂芬牌伊力勉膠囊增強了新西蘭兔單核巨噬細胞的吞噬功能及胸腺、脾臟指數，并表現出一定劑量效應，提示斯蒂芬牌伊力勉膠囊對兔非特異性免疫有增強作用。與對照組相比，斯蒂芬牌伊力勉膠囊高低劑量組均顯著升高了兔血清半數溶血值HC50，HC50越大表明抗體產生越多，體液免疫功能越強，由實驗結果可見，斯蒂芬牌伊力勉膠囊對綿羊紅細胞所致兔特異性抗體生成有明顯促進作用，且其作用比常規胎盤片及人胎盤組織液分別提高兔血清半數溶血值8倍和9倍。

研究結果顯示，斯蒂芬牌伊力勉膠囊對兔免疫功能有一定的促進作用，尤其增強了受試動物的特異性體液免疫功能，其作用效果優于常規胎盤片及人胎盤組織液(臨床常用高劑量)，可能是斯蒂芬牌伊力勉膠囊采取了更為先進的胎盤活性物質提取工藝，同時其采用的雙層膠囊專利技術對于胎盤中有效物質的活性保存具有一定優越性。本研究對于將胎盤做為一種免疫促進劑的開發應用具有相當借鑒意義，其臨床效果有待于進一步研究探討。

[參考文獻]

[1] 李黎. 胎盤活性因子基礎研究及臨床應用進展[J]. 醫學研究通訊，1993，22(6):10-12.

[2] 陸暉，閆小梅，張雙全. 羊胎盤活細胞素微量元素和氨基酸組成分析[J]. 南京師大學報(自然版)，2001，24(1):79-82.

[3] 陳新霞，石根勇，呂中明，等. 羊胎素抗氧化作用的研究[J]. 中國生化藥物雜志，2002，23(6):291-292.

[4] 李儀奎. 中藥藥理實驗方法學[M]. 上海:海科學技術出版社，1991:155.

[5] Rittie A，Monboisse JC，Gorisse MC，et al. Malondialdehyde binding to proteins dramatically alter s fibroblast functions[J]. J Cell Physiol，2002， 191(2):227-236.

[6] 董泉洲，尚爾和，王小慧. 羊胎盤營養液的制備及其在化妝品中的應用[J]. 日用化學工業，1998，28(1):12-13.

(收稿日期:2010-02-23)