臨床化學檢測系統比色杯攜帶污染檢測及其處理措施

李清祥,雷 震,鐘以文

(1.南昌市第三醫院檢驗科,南昌 330009;2.南昌市第九醫院檢驗科,南昌 330002;3.上猶縣婦幼保健院檢驗科,江西 上猶 341200)

全自動化學分析儀是臨床化學檢測系統的重要組成部分,其比色杯的攜帶污染是臨床化學檢測不正確度的來源之一。筆者對南昌市第三醫院檢驗科2009年11-12月開展的41項檢測項目進行了比色杯攜帶污染檢測,對嚴重污染項目進行了處理,取得了滿意的效果,報告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器及檢測前準備

日本OLYMPUS公司的AU640全自動化學分析儀。檢測前樣品探針、試劑探針、混勻棒用10%的次氯酸鈉及10%鹽酸各浸泡20 min,用去離子水沖洗后用擦鏡紙擦拭干凈。比色杯經儀器W2沖洗程序用10%的次氯酸及10%鹽酸各浸泡沖洗1遍,然后進行光電校準。

1.1.2 試劑與分析方法

ALT、AST、ALP、GGT、CHE、MAO、AFU、ADA 、CK 、α-HBDH 、LDH 為酶動力法 ,Urea、CRE、UA 、CO2、TC 、TG 、HDL-C、LDL-C 為酶法 ,GLU為葡萄糖氧化酶法,TBA為循環酶法,FRU為NBT法,AMY為糖苷底物法,CK-MB為抗體抑制、酶動力法,TP、ALB、Ca、Mg為化學比色法,P為紫外法,PA 、ApoA1、ApoB、Lp(α)、β2-MG 為免疫比濁法,以上產品均由山東濰坊三維生物工程集團有限公司提供;TBIL、DBIL為化學氧化法,由寧波美康生物科技有限公司提供;5′-NT為酶動力法,由寧波瑞源生物科技有限公司提供;GPDA、LAP、AAP為酶動力法,由長春匯力生物技術有限公司提供;RBP為免疫比濁法,由上海景源醫療器械有限公司提供;共41項檢測項目。

1.2 混合血清

選取混合血清40 mL,充分混勻備用。

1.3 比色杯攜帶污染的篩檢

以去離子水為試劑和樣本檢測10個單項,再檢測41項檢測項目各1遍,如此重復3次。儀器共153個比色杯全部使用1次,然后檢測3項(如A、B、C項目)檢測項目各連續檢測 51次(如 A 1、A 2…A 51,B 1、B 2…B 51,C1、C 2…C 51)。各檢測項目使用的比色杯前1次對應的檢測項目分別是:前10個(如A1-A10)對應去離子水為參比項,后41個(如A11-A51)對應41項檢測項目為篩檢項。參比項前3個(如A1-A3)有試劑探針及混勻棒的攜帶污染,選擇后7個(如A4-A10)測定值計算均值作為參比值(認為未受污染的對照值)。根據以下公式計算各項目攜帶污染率:

比色杯攜帶污染率=[(篩檢項測定值-參比值)/參比值]×100%

比色杯攜帶污染率絕對值小于該項目室內質控變異系數(CV),被認為攜帶污染可接受;大于該項目室內質控變異系數,則需對污染進行確認。

1.4 比色杯攜帶污染的確認檢測

以A項目為例,假如A項目要對來源于B、C、D、E項目的污染進行確認。以去離子水為試劑和樣本檢測 10個單項,連續檢測B、C、D、E項目各10次(B1-B10、C1-C10、D1-D10 、E1-E10),再檢測其他項目的污染來源項目,直到153個比色杯全部使用1次,然后連續檢測A項目50次。以A4-A10的測定結果計算均值作為參比值;以A11-A20的測定結果計算均值作為污染來源于B項目的測定值,記為AB;以A21-A30的測定結果計算均值作為污染來源于C項目的測定值,記為AC;以A31-A40的測定結果計算均值作為污染來源于D項目的測定值,記為AD;以A41-A50的測定結果計算均值作為污染來源于 E項目的測定值,記為AE。根據以下公式計算攜帶污染率:

N為污染來源項目:比色杯攜帶污染率絕對值小于該項目室內質控變異系數(CV),被認為攜帶污染可接受;大于該項目室內質控變異系數,被認為攜帶污染嚴重,需進行處理。

1.5 比色杯攜帶污染的處理

進入全自動化學分析儀使用程序,設置比色杯前1次檢測污染來源項目,下1次用于被污染項目檢測時增加沖洗次數,沖洗液用去離子水、酸性洗液或堿性洗液。然后再用攜帶污染的確認檢測方法檢測處理效果。

2 結果

2.1 比色杯攜帶污染檢測結果

在41項檢測項目比色杯攜帶污染檢測中,有2項攜帶污染率絕對值大于其室內質控CV,認為攜帶污染不能接受(表 1)。其余項攜帶污染率-2.1%～1.9%,絕對值均小于室內質控CV,認為攜帶污染可以接受。

2.2 比色杯攜帶污染的處理后檢測結果

2項攜帶污染嚴重項,經設置增加2次去離子水沖洗后,攜帶污染率均降至可接受范圍。見表1。

表1 攜帶污染嚴重項處理前后攜帶污染檢測結果

3 討論

臨床化學檢測系統試劑攜帶污染主要包括試劑探針、混勻棒及比色杯的攜帶污染(試劑探針及混勻棒攜帶污染檢測另文報道)。因比色杯數量多(153個比色杯),嚴重污染常單個發生,重現性差,日常工作中不易被發現,必須設計特定的檢測實驗才能被檢出[1]。

比色杯的攜帶污染不僅與化學分析儀的沖洗效率有關,同時還與相關檢測項目的檢測方法及試劑成分有關[2-3]。對于污染嚴重項目,可以通過加強沖洗,或者更換試劑或實驗方法以減少污染,也可以通過固定比色杯使用范圍避免污染[1]。但調整檢測順序的方法不能解決比色杯污染問題。

臨床化學檢測系統,隨著使用時間的延長,比色杯內表面的黏附作用會增加,沖洗能力也會下降,其攜帶污染就會相應地增加[1]。因此,攜帶污染的檢測與處理不是一勞永逸的。筆者認為可用如下方法監測:選擇1個嚴重污染項目(如B項目對A項目產生污染),取消處理措施后進行攜帶污染的確認檢測,以第一次攜帶污染的確認檢測結果AB1、AB2…AB10分別計算攜帶污染率,然后計算攜帶污染率的均值)和標準差(s),以本次攜帶污染的確認檢測結果分別計算攜帶污染率(x1、x2… x10),如果 x-2 s＜xn＜+2 s(xn表示 x1、x2… x10)認為攜帶污染率在可接受范圍。總之,比色杯的攜帶污染可以實驗檢測,采用科學的處理方法可有效地降低攜帶污染的影響程度。

[1]邱玲,程歆琦,劉茜,等.自動生化分析儀攜帶污染來源檢出及處理[J].醫學研究雜志,2007,36(6):64-67.

[2]顧光煜,張葵.臨床化學自動分析的攜帶污染與解除[J].臨床檢驗雜志,2007,25(6):401-403.

[3]沈振亞,李智,左玫,等.M odular-PPI全自動生化分析儀試劑攜帶污染及其解決措施[J].臨床檢驗雜志,2008,26(3):219-220.