小兒對乙酰氨基酚灌腸液質量標準研究

陳 濱 楊飛雪

黑龍江省哈爾濱市紅十字中心醫院藥劑科（150076）

對乙酰氨基酚為苯胺類解熱鎮痛藥[1]，具有良好的解熱鎮痛作用，臨床用于發熱頭痛、風濕痛、神經痛等，其毒性低于非那西丁，且對NSAID過敏的哮喘患者和兒童也比較安全。對乙酰氨基酚的胃腸不良反應較少，近幾年對其毒副作用的研究和新用途的研究在不斷深入，穆兆英等[2]報道1例對乙酰氨基酚致胃出血病例；王士凡等[3]曾報道此藥可引起血小板減少性紫癜，停藥后患者恢復正常。此藥物過量或長期服用可引起肝臟損害，嚴重者可致肝昏迷甚至死亡，所以使用時應注意[4]。市場上出現的解熱鎮痛藥“小兒對乙酰氨基酚灌腸液”退熱效果好，毒副作用小，避免口服所致的胃腸道不良反應，適合兒科患者使用，而該藥的工藝簡單清楚，含量測定準確，我們仿制的制劑所做的加速穩定性和長期穩定性試驗結果都符合標準規定，仿制此藥有理論依據和試驗依據。高效液相色譜法對對乙酰氨基酚進行了定量分析，為該制劑質量標準的制定提供了方法和依據。一些對乙酰氨基酚高效液相色譜法的質量標準控制方法的參考，如下：

色譜條件一[5]：色譜柱：ZORBAX SB2C18（416mm×250mm，5μm）；流動相：甲醇-水（10∶90）；流速：1.0mL/min；檢測波長：249nm；進樣量為20μL；理論板數按對乙酰氨基酚峰計算應不低于3000。

色譜條件二[6]：以Kromasil-C18柱（150mm×416mm，5μm），乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液-三乙胺（10∶90∶0.12）為流動相，流速1.0mL/min，檢測波長222nm。

色譜條件三[7]：色譜柱為C18柱（150mm×4.6mm，5μm），流動相為甲醇-水（73∶27），檢測波長為264nm。

1 材料與儀器

1.1 藥品

對照品：對乙酰氨基酚（C8H9NO2）（110754-200219）購于中國藥品生物制檢定所。供試品為黑龍江省醫藥工業研究所分析室制備（批號20061201）。

1.2 試劑

甲醇：色譜純；醋酸溶液：分析純；水為重蒸水，用前經0.45μm微孔濾膜濾過。

1.3 儀器

美國PE200-235高效液相色譜儀（三維紫外檢測器、TC4色譜工作站）；色譜柱：YMC- C18色譜柱（150×4.6mm，5μm）；AS3120超聲儀（Autoscience）；AEU-201電子分析天平（日本島津）。

2 方法與結果

2.1 處方

對乙酰氨基酚100g，偏重亞硫酸鈉1g，苯甲醇20mL，丙二醇適量，水適量，全量1000mL。

2.2 含量測定方法學考查

照高效液相色譜法（中國藥典2005年版二部附錄ⅤD）測定。

2.2.1 對照品來源及純度

對乙酰氨基酚（C8H9NO2）（110754-200219）對照品購于中國藥品生物制檢定所。含量測定：取105℃干燥到恒重的對照品，進樣測定，對乙酰氨基酚含量為98.83%。

2.2.2 色譜條件與系統適用性試驗

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.75%醋酸溶液（25∶75）為流動相；檢測波長為250nm。理論板數按對乙酰氨基酚計算應不低于1500，對乙酰氨基酚峰與對氨基酚峰的分離度應符合要求。

2.2.3 測定法

取本品適量，加流動相稀釋制成每1mL中含0.15mg的溶液，作為供試品溶液；另取對乙酰氨基酚對照品適量，加流動相稀釋制成每1mL中含0.15mg的溶液，作為對照品溶液，分別量取對照品溶液與供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算，即得。

2.2.4 線性考查試驗

標準曲線：精密稱取對照品6.0mg，加流動相制成每1mL含0.2mg的溶液，分別精密吸取2.0、4.0、6.0、8.0、10、12μL的對照品溶液，注入液相色譜中，記錄測定峰面積，其結果見表1。

表1 標準曲線測定結果

以對照品濃度為橫坐標，以峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，見圖1。

圖1 回歸方程：Y=5E+06x-14470，相關系數：R=0.9999，對乙酰氨基酚（C8H9NO2）在0.4～2.4μg范圍內線性良好

2.2.5 供試品穩定性試驗

按擬定含量測定方法配制供試品，間隔時間進樣，考察其含量有無變化，結果見表2。

表2 穩定性試驗結果

試驗表明，供試品溶液24h內含量無明顯變化，在24h內穩定。

2.2.6 精密度試驗

取配制好的樣品溶液，連續5次等量注入同臺液相色譜儀中進行測定，考察其精密度，結果見表3。

表3 精密度試驗結果

由表3可見，其精密度良好。

2.2.7 加樣回收試驗

對乙酰氨基酚回收率試驗：取已知對乙酰氨基酚含量的樣品（0.0918mg/mL）分別加入已知含量的高、中、低三組對照品，按正文規定含量測定方法進行制備供試樣，各進樣10μL測定，計算回收率，其結果見表4

表4 回收率測定結果

2.2.8 本仿制藥和市售藥品含量對比測定結果

三批樣品和市售藥品含量對比測定數據，見表5。

表5 含量檢查結果

3 結 論

3.1 本實驗建立了一種小兒乙酰氨基酚灌腸液中對乙酰氨基酚的質量標準控制方法。

3.2 小兒乙酰氨基酚灌腸液和市售藥品做質量對比試驗，結果是小兒乙酰氨基酚灌腸液和市售藥品含量均合格。

3.3 用高效液相色譜法測定對乙酰氨基酚的含量，高效液相色譜法測定小兒對乙酰氨基酚灌腸液的方法考查了樣品的穩定性，對照品的線性，測定儀器的精密度，可以保證本高效液相色譜法的準確。

4 討 論

4.1 小兒對乙酰氨基酚灌腸液是仿制藥物，主要成分是對乙酰氨基酚，本實驗建立了高效液相色譜法對乙酰氨基酚的含量測定，并按注冊管理法規定完成了市售藥品做質量對比試驗。在該藥和市售藥品質量對比試驗中，嚴格按照注冊管理法規定進行實驗，現象顯著，表明該藥品質量上符合市售藥品規定。

4.2 含量測定方法的建立

4.2.1 檢測波長的選擇

取對照品溶液，用紫外可見分光光度計在200～400nm波長范圍內進行掃描，尋找最大吸收波長為250nm，所以選擇測定波長為250nm。

4.2.2 流動相的選擇

參照2005版藥典一部和參考資料中的含量測定方法，用流動相為甲醇和0.75%冰醋酸水溶液（25∶75），方法重復性高，峰形及保留時間適宜。采用高效液相色譜法測定了對乙酰氨基酚的含量，結果顯示含量達到標示量，本文探討了對乙酰氨基酚在0.4～2.4μg的線性關系，結果是線性關系良好，以250nm 為測定波長，準確性和精密度好，操作簡便，色譜峰分離優良，回收率高。

4.3 小兒對乙酰氨基酚灌腸液的前景

市場上出現的解熱鎮痛藥“小兒對乙酰氨基酚灌腸液”反應很好，其退熱效果好，毒副作用小，藥物以分子形式分散，藥液通過直腸黏膜吸收，起效快，維持療效時間長，可避免口服所致的胃腸道不良反應；減輕了對肝臟的毒副作用，很適合兒科患者使用，而該藥的工藝簡單清楚，含量測定準確[8,9]。現今，我國撲熱息痛制劑產品與國外產品相比，在質量、規格、品種及品牌等方面都有一定差距，價格也相差很多。我國企業應抓住OTC藥將快速普及的機遇，努力開發附加值高的新劑型和“叫得響”的品牌產品，以滿足不同層次的用藥需求，提高經濟效益。

[1] 鄭虎.藥物化學[M] .5版.北京：人民衛生出版社,2004.

[2] 穆兆英,王秋華.對乙酰氨基酚致胃出血1例[J] .小兒急救醫學,2002,9(1)：64.

[3] 王士凡,王功立,孫定人,等.藥物不良反應[M] .2版.北京：人民衛生出版社,1999.

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