尾葉香茶菜揮發油的成分研究

南敏倫 趙雪嬌 張 玲 赫玉芳

吉林天藥現代中藥科技有限公司（130012）

尾葉香茶菜（Rabdosia excisa）系唇形科香茶菜屬植物，又名龜葉草、狗日草、野蘇子等，全草入藥，性味苦涼，具有清熱解毒、健胃活血之功效，主治胃炎 腹脹、經閉、癌癥初期，蛇咬傷等[1]。在朝鮮多被用來治療傷風感冒和咽喉腫痛。尾葉香茶菜的植物資源分布很廣，主要分布在我國東北、朝鮮、俄羅斯的遠東地區。全草高1m左右，根莖粗大，直徑0.8～1.5cm，密生須根。莖方柱形，直徑0.4～0.6cm，黃褐色，略帶紫色，微被柔毛，質脆易折，斷面具白色髓酆。對生葉片多卷縮或破碎，水浸展開后完整者為寬卵形，先端深凹，凹中有長尖尾狀頂齒，葉緣具粗鋸齒，葉基部寬楔形，下延至葉柄。偶見花和果，氣微，味苦涼[2]。近年來國內學者對該屬的化學成分研究較多，從尾葉香茶萊中分離出二萜類苦味成分，藥理實驗證明，對體外艾氏癌細胞顯示細胞毒作用。吉林大學桂明玉等從尾葉香茶菜中分離得到4個貝殼杉型二萜類新化合物exeisanin H、I、J、K及8個貝殼杉型二萜類已知化合物。二萜類化合物為香茶菜屬植物典型特征性成分，具有抗腫瘤、抗菌消炎、抗氧化及保護心血管等作用[3-7]。還沒有人對揮發油進行研究，本研究以其全草為材料，采用二氧化碳超臨界萃取法研究揮發油的化學成分，目的是為開發新的藥物資源，擴大藥用部位及選育新品種提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 GC-MS條件

美國HP6890A-5973氣相色譜質譜儀聯用儀，G1701BA化學工作站數據處理系統。HP-1（30mm×0.25mm，0.25μm）彈性石英毛細管柱；載氣為高純氦氣，載氣流量1.0mL/min；進樣口溫度280℃；分流比50∶1；升溫程序：起始柱溫60℃，維持3min，再以6℃/min升溫至300℃；離子源為EI源，離子源溫度200℃；接口溫度280℃；連接桿溫度200℃；電離電壓70eV；發射電流34.6A；掃描范圍m/z 20～500，掃描速度2000amu/s。

尾葉香茶菜于2008年8月17日采自吉林省煙筒山大荒山，自然陰干后放蔭涼通風處。經吉林省中醫藥科學院嚴仲凱研究員鑒定為尾葉香茶菜（Rabdosia excisa）的全草。

1.2 方法

1.2.1 揮發油的制備

尾葉香茶菜粉碎，20～80目中間的藥材粉，應用CO2超臨界萃取裝置（南通華安超臨界萃取有限公司）分離揮發性物質，得總揮發油粗品，用10倍量的水稀釋，用相同體積的乙醚萃取5次，合并乙醚液，用無水硫酸鈉脫水，低溫揮干乙醚，得到特殊香味的淡黃色透明油狀物, 揮發油得率為0.211%，低溫4℃密封保存備用。

取一定量的揮發油提取物，用乙酸乙酯溶解，應用氣質連用儀（美國HP6890A-5973氣相色譜質譜儀聯用儀）進行成分測定，通過比對標準譜庫確定其成分。

1.2.2 揮發油化學成分分析

圖1 尾葉香茶菜揮發油總離子色譜圖

取提取的揮發油，用氣相色譜-質譜聯用儀進行分析鑒定。通過通過鑒定，明確了該植物揮發油的主要成分及含量，為該植物進一步有效地開發利用提供了一定的科學依據，對推動該植物的研究具有重要意義。筆者認為，尾葉香茶菜是否具有其他的藥用價值的重要資源，今后有待于深入研究。本研究結果將為進一步開發該植物提供重要理論依據。

在實驗中，我們也用了水蒸氣蒸餾的辦法提取揮發油，結果表明超臨界萃取法優于水蒸氣蒸餾法，主要原因為超臨界萃取法萃取能力強，萃取效率高，有利于提高產品和資源利用率，而且提取時間短、耗能低[8]。水蒸氣蒸餾法此法雖簡單，但受熱溫度較高，有可能使揮發油的某些成分發生分解，導致提取得率較低，同時可以使淀粉粒等物質，在長時間G1701BA化學工作站數據處理系統，檢索NIST98譜圖庫，并分別與峰索引及EPA/NIH質譜圖集的標準譜圖進行對照、復合，再結合有關文獻進行人工譜圖解析，確定其揮發油中的各個化學成分。按峰面積歸一化法進行定量分析，分別求得各化學成分在尾葉香茶菜揮發油中的相對百分含量。

表1 尾葉香茶菜揮發油化學成分及其含量

2 結 果

對尾葉香茶菜揮發油的GC-MS分析，測得揮發油氣相色譜共有24個峰，總離子色譜圖見圖1；共鑒定出15個化合物，利用面積歸一法計算各化合物相對含量，鑒定出化合物含量占總揮發油的74.69%，化學成分及相對含量結果見表1。

3 結論與討論

分析結果表明，尾葉香茶菜所含揮發油成分主要有15種。揮發油化學成分以5β，11α-11-羥基-3，20-孕甾二酮（相對含量為19.26%），5-α-12，20-孕甾二酮（17.13%），[1R-（1α，4aβ，10aα]-7-（1-甲乙基）-1，4-二甲基-1，2，3，4，4a，9，10，10a-八氫-1-菲甲醛（12.67%），4-二烯-3，11-雄甾二酮（5.08%）為主，占總揮發油成分的49.06%。在檢測的化合物中，孕甾二酮占總揮發油的36.39%，酸類化合物占13.17%，醛類化合物占13.96%。經文獻檢索，所有化合物均首次從該植物中檢出。納智研究了疏花毛萼香茶菜的揮發油成分、姚煜研究了線紋香茶菜揮發油化學成分、高幼衡研究了顯脈香茶菜葉揮發油成分、趙玉蘭研究了藍萼香茶菜的揮發油化學成分，但是與我們研究的尾葉香茶菜的揮發油化學成分有很大的區別。的加熱蒸餾過程中易與水蒸氣、揮發油一起被蒸餾出，造成提取的揮發油中含有大量的泡沫，油水易形成乳濁液，難于分層；并且加熱時間過長可能引起其發生分解與轉化，影響其功效。為了盡量保證揮發油有效成分的完整性，運用二氧化碳超臨界萃取技術提取揮發油可能解決上述問題，綜上所述可知二氧化碳超臨界萃取技術比傳統的水蒸氣蒸餾法有省時、能耗低、收率高、純度高等優點，值得推廣應用。

[1]嚴仲鎧,李萬林.中國長白山藥用植物彩色圖志[M].北京:人民衛生出版社,1997:367.

[2]王迪等,尾葉香茶菜的生藥學研究[J].中醫藥學報,1998,6(5):30-31.

[3]龐勁松,于倩,劉寶.尾葉香茶菜化學成分及藥理作用研究[J].東北師大學報(自然科學版),2005,37(4):94-97.

[4]孫漢董,許云龍,姜北.香茶菜屬植物二萜化合物[M].北京:科學出版社,2001:114.

[5]吳桂凡.唇形科香茶菜屬植物化學成分研究[J].中醫藥學刊,2003,21(6):1012-1013.

[6]張崇禧,王雪.長白山地區尾葉香茶菜化學成分的研究[J].中成藥,2008,30(1):120-104.

[7]桂明玉,李緒文,徐吉慶,等.HPLC法測定尾葉香茶菜中二萜類成分的含量[J].藥物分析雜志,2006,26(4):483-485.

[8]謝瑩,杭太俊,張正行,等.4種姜黃屬藥材揮發油中莪術醇含量比較[J].中草藥,2001,32(7):600.