黃克江,楊立偉
(黑龍江中醫藥大學附屬第二醫院,黑龍江 哈爾濱 150001)
生肌膏由黑龍江中醫藥大學附屬第二醫院制劑室制備,應用于臨床數十年,主要成分為當歸、紫草、白芷、輕粉、血竭、松香、甘草、川大黃等,具有清熱解毒、生肌斂瘡之功效,應用于臨床外科疾病的潰瘍收口期、創面愈合期,療效顯著。本實驗對生肌膏的生肌、抗炎、鎮痛作用的實驗研究,為使之成為理想的創面用藥提供依據,現將研究結果報告如下。
1.1 藥物 生肌膏(黑龍江中醫藥大學附屬第二醫院制劑室制備并提供);馬應龍麝香痔瘡膏(武漢馬應龍藥業集團股份有限公司,批號:060305);白凡士林(哈爾濱青云石化有限公司生產,哈爾濱天鵝藥業有限公司分裝,原批號:20060704,分裝批號:20060340);二甲苯(GP,大慶有機合成化工廠,批號:040518)。
1.2 儀器 電熱恒溫水浴箱(上海康迪醫療器械廠);梅特勒AL-204電子天平(梅特勒托利多(上海)儀器有限公司);美國斯密爾系統(Semile ASP200脫水機、Semile RM3255切片機、Semile HI1210攤片機、Semile HI1220烤片機、Semile ST5020染色機、Semile CV5030蓋片機、Semile DM60000B顯微鏡,Nussloch Comble公司生產)。
1.3 動物 昆明種小鼠、SD大鼠(黑龍江中醫藥大學實驗動物中心提供,許可證號:SCXH(黑)2006-0006);鼠用全價飼料(黑龍江中醫藥大學實驗動物中心提供,許可證號:SCXH(黑)2006-0008);黑龍江省藥物研究所動物使用許可證號:SCXH(黑)2006-0002。
2.1 大鼠塑料環肉芽腫實驗[1,2]取SD大鼠30只,隨機分為3組:空白對照組(空白組)、馬應龍麝香痔瘡膏組和生肌膏組(陽性藥組)各10只。麻醉、備皮、消毒,將聚乙烯塑料環埋入大鼠背部皮下,縫合。術后第2天分組給藥,每天向各組大鼠塑料環涂相應藥物1次,10天后斷頭處死大鼠,取下塑料環,剝離肉芽組織,用電子天平稱重。之后將肉芽組織作病理組織學檢查,常規HE染色,觀察毛細血管數、纖維結締組織增生情況。
2.2 小鼠鎮痛實驗(熱板法)[3]實驗前對雌性小鼠進行篩選,取合格小鼠26只,隨機分為3組:空白對照組和馬應龍麝香痔瘡膏組各8只,生肌膏組10只。各組均在給藥前痛閾值測完后左右后肢均涂敷給藥2次,間隔20min,末次給藥20、40、60min后分別測小鼠痛閾值1次。
2.3 小鼠耳廓急性炎癥實驗(二甲苯致小鼠耳廓腫脹法)[1]取體重18~23g雄性小鼠30只,隨機分為3組:空白對照組、馬應龍麝香痔瘡膏組和生肌膏組各10只,連續鼠耳兩面涂藥,給藥3天。第3天給藥后30min,以二甲苯0.05mL涂于小鼠右耳兩面致炎,30min后再次給藥,30min后將小鼠脫頸椎處死,沿耳廓基線剪下兩耳,再用打孔器打耳片,電子天平稱重。以每鼠右耳片重量減去左耳片重量為腫脹程度,計算腫脹抑制率。
3.1 生肌膏的生肌作用 見表1~2。

表1 生肌膏對大鼠塑料環肉芽腫的影響
表2 各組肉芽組織毛細血管和成纖維細胞數的比較(±s)

表2 各組肉芽組織毛細血管和成纖維細胞數的比較(±s)
注:與空白組比較,*P <0.05,**P <0.01,***P <0.001。
5 3.4±0.55 7.6±1.81陽性組 5 6.6±1.52** 23.2±2.17***生肌膏組 5 7.6±2.88* 25.4±5.81毛細血管 成纖維細胞空白組組別 視野數(n)***
3.2 生肌膏的鎮痛作用 見表3。
表3 生肌膏對小鼠痛閾值的影響(±s)

表3 生肌膏對小鼠痛閾值的影響(±s)
注:與自身給藥前比較,*P <0.05,**P <0.01,***P <0.001。
組別 n給藥前痛閾值(s)給藥后痛閾值20min 40min 60min空白組8 22.6±3.2 17.0±5.1 21.3±5.9 26.1±4.5陽性組 8 23.8±4.5 28.0±9.2* 40.1±12.5** 37.6±13.2*生肌膏組 10 25.4±5.4 24.8±13.6 35.2±8.4***34.7±12.9
3.3 生肌膏的抗炎作用 見表4。
表4 生肌膏對小鼠二甲苯耳廓腫脹的影響(±s,mg)

表4 生肌膏對小鼠二甲苯耳廓腫脹的影響(±s,mg)
組別 動物數(n) 腫脹度 腫脹抑制率(%)空白組10 20.0±1.5-陽性藥組 10 15.1±5.3 24.5生肌膏組10 17.4±3.1 13.0
本實驗研究證明,生肌膏能顯著促進肉芽組織增生,肉芽病理組織學檢查也證實該藥能顯著增加視野內毛細血管和成纖維細胞數;成纖維細胞主要功能是合成膠原,膠原是創口愈合過程中細胞外的最主要基質,并能增加纖維結締組織增生,從而有利于創傷和潰瘍的修復。生肌膏能顯著提高小鼠熱板法痛閾值,抑制小鼠二甲苯致耳廓腫脹。實驗研究表明,生肌膏在生肌、抗炎、鎮痛方面具有顯著性作用,佐證了生肌膏的臨床療效,且為臨床應用提供了必要的實驗依據。
[1] 陳奇.中藥藥理實驗方法學[M].北京:人民衛生出版社,1994:377,367.
[2] 張亞西,曾亞男.單氏丁桂散促進創瘍愈合的實驗研究[J].中國中西醫結合外科雜志,2002,8(6):431.
[3] 文莉,舒成仁.寧血消痔栓鎮痛作用的研究[J].時珍國醫國藥,2005,16(1):4.