六味地黃丸對慢性再生障礙性貧血的療效及對EPO、SCF細胞因子活性的影響

閆盈濱，閆中亮，呂中陽

(1.哈爾濱市天馬血液病中醫研究所，黑龍江 哈爾濱 150016;2.黑龍江中醫藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040)

再生障礙性貧血(aplastic anemia，AA，簡稱“再障”)是由化學、物理、生物因素及不明原因引起的造血干細胞和造血微環境損傷，以及免疫異常等致使骨髓造血功能部分或全部衰竭的疾病。本研究通過六味地黃丸(北京同仁堂科技發展股份有限公司制藥廠，批號:3072472)對再障患者EPO、SCF細胞因子活性的影響，進而評估該藥對再障的臨床療效，現將結果報告如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 隨機選擇60例2005年3月～2005年12月在我院血液科住院慢性再障患者，總計60例，中醫證型為腎陰虛。按隨機數字表法分為治療組30例，對照組30例。另取健康人骨髓10例作為正常組。兩組患者性別、年齡、病程、骨髓增生度等的分布情況基本一致，經統計學分析，無顯著性差異，具有可比性。

1.2 診斷標準

1.2.1 慢性再障的診斷標準［1］參照張之南主編《血液病診斷及療效標準》(第2版)。

1.2.2 納入標準

①全血細胞減少，網織紅細胞絕對值下降，血紅蛋白下降緩慢;②骨髓象示:兩到三系全血細胞減少;至少一個部位增生不良;如增生良好紅系常有晚幼紅細胞比例升高;巨核細胞明顯減少。骨髓小粒中脂肪細胞及非造血細胞增多;③臨床發病緩慢，出血感染輕，一般無脾腫大;④能除外其他引起全血細胞減少的疾病，如骨髓增生異常綜合征、骨髓纖維化、急性造血功能停滯、陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥、急性白血病、惡性組織細胞增多癥等;⑤一般抗貧血藥物治療無效;⑥能隨訪，依從性好。

1.2.3 排除標準

①妊娠期或哺乳期婦女;②曾有可能引起繼發性疾病史或藥物史;③嚴重不可控制的出血;④嚴重不可控制的感染;⑤主要器官功能衰竭，如失常的心肺功能衰竭;⑥同時合并有未治愈的第二種血液病或其他惡性疾病。

1.3 中醫證型標準

參見1989年大連全國中西醫結合血液病專業委員會第三屆第二次學術會議制定標準。腎陰虛型:低熱、盜汗、眩暈耳鳴、手足心熱、口渴咽干思飲、失眠多夢、出血明顯、常有感染、舌紅、苔少、脈細數。

1.4 治療方法

兩組慢性再障患者均停用其他治療再障的藥物2周后進行觀察。治療組給予六味地黃丸，1次1丸，每日兩次;同時口服康力龍2mg，每日3次。3個月為1個療程，2個療程后作療效判定。對照組給予康力龍2mg，每日3次，口服，3個月為1個療程，2個療程后作療效判定。兩組患者治療期間，均配合對癥支持治療，如合并細菌感染者，及時應用抗生素控制感染;血紅蛋白低于45g·L－1，臨床貧血癥狀明顯者，給予間斷輸血;出血嚴重者給予止血藥或輸注濃集血小板。每周復查血常規1次，1～2個月復查肝功1次，治療前后各做骨髓穿刺1次。正常組僅抽取骨髓標本，不作任何處理。

1.5 療效判定

1.5.1 癥狀計分標準［2］

頭暈、乏力、耳鳴、自汗、潮熱盜汗、腰膝酸軟、發熱、手足心熱、失眠多夢、咽干口渴、小便短赤、便干。上述癥狀中沒有感覺，計0分;稍有感覺，計1分;感覺較重，但可耐受，計2分;感覺嚴重，不可耐受，計3分。

1.5.2 療效標準

1.5.2.1 西醫療效判定標準［1］參照張之南主編《血液病診斷及療效標準》(第二版)。分為基本治愈、緩解、明顯進步、無效。

①基本治愈:貧血和出血癥狀消失，血紅蛋白男達120g·L－1，女達 100g·L－1，白細胞達 4 ×109個·L－1，血小板達 80 ×109個·L－1，隨訪 1 年以上未復發。②緩解:貧血和出血癥狀消失，血紅蛋白男達120g·L－1，女達 100g·L－1，白細胞達 3.5 ×109個·L－1左右，血小板也有一定程度增加，隨訪3個月病情穩定或繼續進步。③明顯進步:貧血和出血癥狀明顯好轉，不輸血，血紅蛋白較治療前1個月內常見值增長30g·L－1以上，并能維持3個月。判斷以上三項療效標準者，均應3個月內不輸血。④無效:經充分治療后，癥狀、血象未達明顯進步。

1.5.2.2 中醫證候療效判定標準［2］

①臨床痊愈:中醫臨床癥狀、體征消失或基本消失，證候積分減少≥95%;②顯效:中醫臨床癥狀、體征明顯改善，證候積分減少≥70%;③有效:中醫臨床癥狀、體征均有好轉，證候積分減少≥30%;④無效:中醫臨床癥狀、體征均無明顯改善，甚或加重，證候積分減少<30%。

計算公式(尼莫地平法):［(治療前積分－治療后積分)÷治療前積分］×100%。

1.5.3 安全性指標

于治療前后各檢查1次血、尿、便常規，心(含心電圖)、肝、腎功能，并隨時記錄不良反應發生情況、采取的措施及轉歸。

1.6 統計學處理

采用統計軟件SPSS 12.0進行統計分析。計數資料采用χ2檢驗;計量資料采用單因素方差分析及t檢驗;等級資料比較采用Ridit分析。均以均數±標準差(±s)表示。

2 結果

2.1 療效比較

2.1.1 治療組、對照組總療效比較 結果見表1。

表1 治療組、對照組總療效比較［n(%)］

經Ridit分析，兩組間有顯著性差異(u=2.3521，P<0.05)。

2.1.2 治療組、對照組患者癥狀平均積分比較 結果見表2。

表2 治療組、對照組患者癥狀平均積分比較

2.1.3 治療組、對照組中醫證候療效比較 結果見表3。

表3 治療組、對照組中醫證候療效比較［n(%)］

經 Ridit分析，兩組之間有顯著性差異(u=2.4962，P<0.05)。

2.1.4 治療組、對照組治療前后WBC、Hb、PLT變化

兩組患者外周血WBC、Hb、PLT治療后明顯升高，與治療前比較有顯著性差異。

2.1.5 治療組、對照組治療前后骨髓增生度的變化

經χ2檢驗，兩組患者治療后骨髓增生情況較治療前改善，治療組有非常顯著性差異。

2.1.6 治療組、對照組治療前后BMMNC體外誘生EPO、SCF水平比較

治療組、對照組治療前BMMNC體外誘生EPO、SCF水平明顯低于正常組;治療后BMMNC體外誘生EPO、SCF水平升高，與治療前相比有非常顯著性差異;治療后治療組BMMNC體外誘生EPO、SCF水平與對照組無顯著性差。治療后BMMNC體外誘生EPO、SCF水平與正常相比仍有非常顯著性差異。

2.2 安全性指標結果分析

對兩組患者的安全性指標進行統計學處理，兩組患者均未發現不良反應。

3 討論

細胞因子由造血系統、免疫系統或炎癥反應中的活化細胞產生，能調節細胞分化增殖和誘導細胞發揮功能，是高活性多功能的多肽、蛋白質或糖蛋白，有特異的受體。近年來，隨著對正常造血調控的認識，越來越多的學者提出，由T淋巴細胞功能亢進引起的造血組織損傷及多種與造血有關的正負調控因子分泌異常，在再障的發生、發展及臨床轉歸中起著重要作用［3，4］。

SCF主要由正常基質細胞產生。其受體C－kit是早期髓系細胞的表面標志，與其配體相結合對造血干/祖細胞起支持作用。SCF直接對造血干細胞及早期祖細胞的生存、增殖、分化和粘附及骨髓微環境起著關鍵作用。SCF可協同多種造血生長因子促進早期祖細胞生成定向祖細胞，使其集落數增加，體積增大。對于再障患者SCF水平，目前文獻報道結果不一。Kojima等［5］測定再障患者SCF水平與正常人比較差異無統計學意義。亦有測定再障患者血漿SCF及可溶性C－kit受體的含量明顯低于正常對照組［6，7］。本實驗研究發現，慢性再障患者治療前SCF分泌水平較正常人低下，經六味地黃丸治療后，SCF分泌水平有明顯提高。

EPO是一種刺激紅系造血的激素，能促進紅細胞的增殖、分化、成熟，又稱為紅系造血刺激因子(ESF)。其水平除與缺氧、Hb的水平有關外，還與骨髓紅系細胞生成的功能密切相關。早期BFU－E表面的EPO受體很少，晚期BFU－E對EPO有反應;CFU－E是骨髓中對EPO反應的主要細胞;后期的紅細胞樣細胞和母紅細胞都表達EPO受體，可接受EPO刺激進一步增殖分化;成熟的紅細胞不再結合EPO。于氏等［8］的動物實驗表明，以補腎為主的中藥可刺激免疫介導型再障小鼠CFU－E、BFU－E的形成，從而促進紅系造血組細胞的增殖、分化。本研究結果表明，再障患者骨髓EPO水平明顯低于正常對照組，分析可能與再障患者骨髓微環境損傷導致分泌量下降有關。

以上研究結果顯示，六味地黃丸可使慢性再障患者BMMNC體外誘生EPO、SCF水平升高，通過促進上述造血調控因子的分泌，促進紅系造血祖細胞、粒系造血祖細胞和早期造血干細胞的定向增殖、發育，糾正部分免疫紊亂狀態，從而改善了骨髓造血功能。故而可升高慢性再障患者的WBC、Hb、PLT，患者的骨髓象由增生低下變為增生活躍，能明顯改善患者的貧血、出血、感染等臨床癥狀，有利于再障患者的臨床癥狀改善和造血機能的恢復，具有較好的臨床療效。

［1］ 張之南.血液病診斷及療效標準［M］.北京:北京科學出版社，1998:34－36.

［2］ 翁維良.中藥臨床藥理學［M］.北京:人民衛生出版社，2002:445.

［3］ Kojima S.Hematopoietic growth factors released by marrow stromal cells patients with aplastic anemia［J］.Blood，1992(79):2256.

［4］ 邵宗鴻，袁燁.再生障礙性貧血免疫發病機制及免疫治療［J］.中國實用內科雜志，2006，26(4):252－255.

［5］ Kojima S，Matsuyama T，Kodera Y.Plasma levels and production of soluble stem cell factor by marrow stromal cells in patients with aplasticanemia［J］.Br J Haematol，1997(99):440 －446.

［6］ 王軍，馮建飛，趙雪蓮，等.再生障礙性貧血患兒干細胞因子及其受體的研究［J］.中華血液學雜志，2005，26(5):303 －304.

［7］ 馮建飛，王軍，張樹人，等.再生障礙性貧血血漿SCF和可溶性C－kit受體關系的研究［J］.臨床檢驗雜志，2004，22(4):302－303.

［8］ 于志峰，戴錫孟.補腎活血法對免疫介導型再障小鼠的影響［J］.遼寧中醫雜志，2001，28(8):509－510.