重組人干擾素α－2b對復發性生殖器皰疹患者免疫功能的影響

楊衛琴，羅利飛

(1.浙江省臺州市路橋區婦幼保健所，浙江 臺州 318050; 2.浙江省臺州醫院路橋院區檢驗科，浙江 臺州 318050)

生殖器皰疹是主要由單純皰疹病毒Ⅱ(HSV－Ⅱ)引起的一種性傳播疾病，極易復發。近年來，復發性生殖器皰疹(recurrent genital herpes)的發病率逐年上升，能明顯增加艾滋病等其他性傳播疾病的感染機會，越來越受到重視。它可反復發作，難以治愈，主要與患者細胞免疫功能低下有關[1－2]。干擾素α－2b是一種基因重組干擾素，具有廣譜抗病毒作用及免疫調節功能，近年來研究發現其治療復發性生殖器皰疹的效果確切[3]。筆者觀察了重組人干擾素α－2b治療復發性生殖器皰疹的效果，并探討其對免疫功能的影響，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2009年1月至10月我院婦科和泌尿科的門診復發性生殖器皰疹患者60例作為治療組，診斷均符合2000年我國衛生部疾病控制司和全國性病、麻風病控制中心聯合頒布的《生殖器皰疹診斷標準》。其中男 21例，女 39例;年齡 19～46歲，平均(30.4±7.1)歲;病程 6 個月至 10 年，平均(2.8 ±0.7)年。所有患者均抽取皰液作PCR檢測，單純皰疹病毒均呈陽性，并排除自身免疫性疾病及其他系統性疾病，半年內未接受任何免疫調節劑治療。另選擇相同年齡段、性別相仿的門診健康體檢者30例作為對照組。

1.2 治療與觀察方法

治療組患者予重組人干擾素α－2b 300萬U肌肉注射，隔日1次，共用30 d。分別于治療前和治療后3個月檢測患者外周血T淋巴細胞亞群、自然殺傷(NK)細胞、淋巴因子活化殺傷(LAK)細胞的變化，并進行臨床療效觀察。對照組在行健康體檢時檢測上述指標。采用流式細胞法檢測外周血T淋巴細胞(CD3+，CD4+，CD8+和CD4+/CD8+值)，具體步驟按說明書進行操作。取淋巴細胞分離液，常規分離淋巴細胞，用RPMI 1640培養液洗滌3次，調整細胞密度為5×108/L～5×109/L，加入白細胞介素 －2(IL－2，調終濃度為500 mL/L)培養72 h，即可誘生出LAK細胞。參照王甫厚等[4]采用的方法，以K562細胞作為靶細胞，采用乳酸脫氫酶釋放法測定NK和LAK細胞的殺傷活性。觀察治療組治療前后3個月平均復發頻率和治療前后皮損平均愈合時間。

1.3 統計學分析

數據以均值±標準差(X ±s)表示，使用 SPSS 11.5統計軟件進行分析，計量資料采用 t檢驗，P＜0.05表示有統計學意義。

2 結果

結果見表1和表2。

表1 兩組外周血T淋巴細胞亞群及NK和LAK細胞活性變化(±s，%)

表1 兩組外周血T淋巴細胞亞群及NK和LAK細胞活性變化(±s，%)

注:與對照組比較，＊P ＜0.01;與治療前比較，△P ＜0.05，▲P ＜0.01。

檢測指標CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+NK LAK治療組(n=60)治療前45.54 ± 9.61＊38.59 ± 7.94＊37.62 ± 8.69＊1.03 ± 0.19＊1.74 ± 0.48＊1.02 ± 0.35＊治療后62.74 ± 11.54△46.51 ± 6.52△28.46 ± 5.82△1.63 ± 0.32▲2.76 ± 0.74△2.36 ± 0.68△對照組(n=30)74.35 ± 14.69 48.26 ± 9.97 25.34 ± 7.56 1.89 ± 0.41 3.27 ± 0.91 2.81 ± 0.82

表2 治療組治療前后每3月復發頻率和皮損愈合時間均值(±s)

表2 治療組治療前后每3月復發頻率和皮損愈合時間均值(±s)

注:與治療前比較，＊P ＜0.01。

治療前后治療前(n=60)治療后3個月(n=60)皮損愈合時間(d)7.04 ± 1.82 4.94 ± 1.08＊每3月復發頻率(次)3.84 ±1.37 1.76 ±0.64＊

3 討論

初次感染HSV－Ⅱ后，只有少數患者出現典型癥狀，而大多數患者無明顯癥狀，呈亞臨床狀態(潛伏感染狀態)，HSV－Ⅱ可持續潛伏于骶神經節。當過度勞累、免疫系統疾病、全身應用免疫抑制劑等因素使機體免疫力降低時，潛伏病毒可被激活而發病。可見，機體免疫功能正常是維持潛伏感染的關鍵，免疫功能低下是引起潛伏病毒被激活的主要原因。免疫學研究證實，復發性生殖器皰疹患者存在明顯的細胞免疫功能受抑制現象，復發性生殖器皰疹的感染和復發與細胞免疫功能有關[1]。本研究結果顯示，復發性生殖器皰疹患者外周血CD3+細胞、CD4+細胞明顯減少，CD8+細胞明顯增加，CD4+/CD8+值明顯下降，可見復發性生殖器皰疹患者確實存在細胞免疫功能紊亂，這與馬黎民等[5]的報道相一致。筆者認為，CD4+細胞數明顯下降，則明顯減弱了其介導的對單純皰疹病毒抗原的遲發型變態反應;另一方面，CD8+細胞數明顯升高，表現出機體的免疫抑制功能增強，造成單純皰疹病毒的繁殖和擴散。因此，CD4+細胞數下降、CD8+細胞數升高是本病反復發作的重要原因。NK細胞是機體中重要的免疫細胞，可直接殺傷被病毒感染的細胞;并可分泌IL－2和干擾素－γ等，發揮其免疫增強作用[6]。LAK細胞來源于NK細胞，其殺傷活性遠高于NK細胞。馬黎民等[5]研究發現，復發性生殖器皰疹患者細胞免疫功能缺陷以及NK細胞數目的下降可能是導致生殖器皰疹患者復發的原因。田中偉等[7]報道，生殖器皰疹患者的細胞免疫功能明顯降低，外周血NK細胞和LAK細胞的活性降低。本研究結果發現，復發性生殖器皰疹患者外周血NK細胞和LAK細胞的活性降低，與上述報道相符[5，7]。

干擾素能增強免疫功能，作用機制在于調節機體的免疫監視、防御和穩定功能，使NK細胞、細胞毒性細胞的細胞毒殺傷作用增強，吞噬細胞的活動增強，能誘導外周血中單核細胞的2，5－寡核苷酸合成酶活性，從而增加或誘導細胞表面主要組織相容復合物抗原的表達。因此，理論上干擾素對防止潛伏病毒的再次復制和提高機體抵抗力有一定的作用。近年來研究證實，干擾素α在體外細胞培養中具有抑制HSV－Ⅰ型和HSV－Ⅱ型的作用[8]。肖光明等[9]發現，干擾素－α能使慢性乙型肝炎患者血漿CD4+細胞、CD4+/CD8+值顯著提高，增加細胞免疫功能。楊根明等[3]發現，重組人干擾素α－2b治療復發性生殖器皰疹的臨床療效確切，能明顯降低復發率。本研究結果也證實了這一點，重組人干擾素α－2b治療復發性生殖器皰疹的作用機制可能是通過提高外周血CD3+細胞、CD4+細胞、CD4+/CD8+值，提高血NK細胞和LAK細胞活性，從而增強機體的免疫功能。

[1]Posavad CM，Wald A，Hosken N，et al.T cell immunity to herpes simplex viruses in seronegative subjects:silent infection or acquired immunity[J].J lmmunol，2003，170(8):4 380 － 4 388.

[2]畢 超，曹文苓，黃 平，等.生殖器皰疹初發患者外周血淋巴細胞檢測結果分析[J].中國微生態學雜志，2008，20(1):69－70.

[3]楊根明.重組人干擾素α－2b治療生殖器皰疹的療效觀察[J].山西醫藥雜志，2004，33(10):890 －891.

[4]王甫厚，陳紹先，郭彩云，等.LDH釋放法測定NK細胞毒的方法研究[J].中國免疫學雜志，1996，6(2):115 －117.

[5]馬黎民，李 亞，孫 麗，等.復發性生殖器皰疹患者外周血T細胞亞群和NK細胞檢測分析[J].嶺南皮膚性病志，2005，12(3):213－214.

[6]Giron － Gonzalez JA，Moral FJ，Elvira J，et al.Consistent production of a higher Th1:Th2cytokine ratio by stimulate T cells in men compared with women[J].Eur J Endocrinol，2000，143:31.

[7]田中偉，宋向鳳，彭振輝.生殖器皰疹患者治療前后血清IL－2/IFN－γ水平及NK/LAK細胞活性的變化[J].細胞與分子免疫學雜志，2004，20(2):217.

[8]徐 冰，王淑琴，李玉環，等.重組集成干擾素а體外抗單純皰疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型的藥效學研究[J].熱帶醫學雜志，2006，6(4):397－399.

[9]肖光明，何凱茵，連粵湘，等.α干擾素治療慢性乙型肝炎早期外周血T淋巴細胞亞群和血清肝纖維化指標的變化[J].實用肝臟病雜志，2005，8(2):80 － 82.