HPLC法測定復方雷尼替丁膠囊中鹽酸雷尼替丁的含量

姜鋒衛，陳玉璞

（河南省焦作市食品藥品檢驗所，河南焦作 454000）

復方雷尼替丁膠囊為組胺H2受體阻滯藥，主要用于胃潰瘍及十二指腸潰瘍、幽門螺桿菌感染的治療。現行國家藥品標準中，測定復方雷尼替丁膠囊中鹽酸雷尼替丁含量的方法為紫外分光光度法。本實驗欲用高效液相色譜法測定其中鹽酸雷尼替丁的含量，作為復方雷尼替丁膠囊質量控制指標之一，為控制該藥品質量，提供一種簡單、靈敏、快速、準確的檢測方法。

1 儀器與試藥

UVIKONXL型紫外分光光度計；AE-240雙量程電子天平 （梅特勒公司），島津高效液相色譜儀 （LC-10ADVP泵、SPD-10AVP紫外檢測器、CS-Light Potrun Analysis數據處理系統）；鹽酸雷尼替丁對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：100163-200405，供含量測定用）；復方雷尼替丁膠囊（天津藥業焦作有限公司，批號：10041131、10041206、10041312）；水為純凈水，甲醇為色譜純，醋酸銨為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：Shim-Paok CLC ODS 柱（6.0 mm×200 mm，5 μm）；流動相：甲醇-0.77%醋酸銨溶液（80∶20）；流速：1.0 ml/min；檢測波長：315 nm；柱溫：30℃；進樣量：20 μl。

2.2 檢測波長的選擇

對照品適量，加水制成含量約為30 μg/ml的溶液，在200～400nm的波長范圍內進行掃描，結果對照品溶液在315nm波長處有最大吸收，故選用315 nm為本法的檢測波長。

2.3 對照品溶液的制備

精取鹽酸雷尼替丁對照品38.6 mg，置200 ml量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得鹽酸雷尼替丁對照品貯備液（193 μg/ml）。

2.4 供試品溶液的制備

取供試品，按《中國藥典》方法求出平均裝量，將內容物混勻，研細，精密稱取細粉適量（約相當于鹽酸雷尼替丁150mg），置100 ml量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液2 ml，置100 ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

2.5 陰性對照品溶液的制備

按復方雷尼替丁膠囊的處方工藝，不加鹽酸雷尼替丁，制成陰性對照樣品，照“2.4”項下方法制得陰性對照溶液。

2.6 干擾試驗

分別取供試品溶液、陰性對照溶液和“2.2”項下的對照品溶液各20 μl進樣，在保留時間4.1 min處，供試品和對照品溶液中均出現雷尼替丁色譜峰，而陰性對照溶液未見此色譜峰，表明在本實驗條件下，鹽酸雷尼替丁的測定不受其他雜質峰的干擾。見色譜圖1。

2.7 線性關系考察

精密量取鹽酸雷尼替丁對照品貯備液（193 μg/ml）適量，分別制成濃度為 3.86、7.72、19.3、38.6、77.2 μg/ml的對照品溶液。按“2.1”項下色譜條件進樣，記錄色譜圖。以鹽酸雷尼替丁濃度（μg/ml）為橫坐標，峰面積為縱坐標，進行線性回歸，線性方程：Y=37 518X+181 0（r=0.999 9）。 結果表明，鹽酸雷尼替丁的進樣濃度在3.86～77.2 μg/ml范圍內，與峰面積呈良好的線性關系。

2.8 精密度試驗

取濃度為38.6 μg/ml的對照品溶液，重復進樣6次，分別測定峰面積，結果RSD=0.43%（n=6），結果表明本法精密度良好。

2.9 穩定性試驗

取“2.8”項下的對照品溶液分別于 0、2、6、8 和 12 h 測定峰面積，結果鹽酸雷尼替丁的RSD＝0.53%。結果表明樣品至少在12 h內穩定。

2.10 重復性試驗

取樣品（批號：10041131）適量，照“2.4”項下方法制備供試品溶液，平行測定6次，結果RSD=0.57%。結果表明本法重現性較好。

2.11 加樣回收率試驗

取樣品（批號：10041131）適量，按《中國藥典》方法求出平均裝量，將內容物混勻，研細，分別精取0.26 g，共6份，分置50 ml量瓶中，另取鹽酸雷尼替丁對照品適量，加流動相制成每毫升含鹽酸雷尼替丁20.0 mg的溶液100 ml，分別精密量取該對照品溶液10 ml加入6份樣品中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液1 ml，置100 ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。按“2.1”色譜條件測定，結果見表1。

表1 回收率試驗（n=6）Tab.1 Results of recovery test(n=6)

2.11 樣品含量測定

取3批樣品，各20粒，求出平均裝量，將內容物混勻，研細，精密稱取細粉適量（約相當于鹽酸雷尼替丁150 mg），置100 ml量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液1 ml，置50 ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液；另取鹽酸雷尼替丁對照品30.0 mg，置100 ml量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液10 ml，置100 ml量瓶中，加流動相至刻度，作為對照品溶液。按“2.1”項下色譜條件測定，結果見表2。

表2 樣品含量測定結果（%，n=3）Tab.2 Content determination results of samples(%,n=3)

3 討論

筆者查閱了許多文獻，發現許多流動相中含有乙腈。筆者認為，乙腈價格較貴且有毒，故棄用。筆者通過多次試驗，發現選用甲醇-0.77%醋酸銨溶液（80∶20）為流動相，在檢測波長315 nm處，雜質和輔料對鹽酸雷尼替丁的含量測定幾乎無影響，且色譜峰形好，陰性對照無干擾；試驗結果理想，方法簡便，靈敏，準確，可用于復方雷尼替丁膠囊中鹽酸雷尼替丁的含量測定。

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