HPLC法測定小兒布洛芬口服溶液中布洛芬的含量

王友新，劉俊波，閻廣華，常曉平

（河南省許昌市食品藥品檢驗所，河南許昌 461000）

布洛芬（Ibuprofen，簡稱IB），是一種非甾體抗炎藥。其作用機制主要通過對環氧酶的抑制而減少前列腺素的合成，從而降低神經痛覺的敏感性，同時通過下丘腦體溫調節而起解熱作用。小兒布洛芬口服溶液為長葛市人民醫院制劑，由布洛芬、氫溴酸右美沙芬、撲爾敏、醋酸鈉、蜂蜜、白糖、注射用水組成，具有鎮痛、抗感染、解熱等作用，用于小兒感冒引起的發熱、頭疼、咳嗽、鼻塞、流鼻涕、流眼淚、打噴嚏等癥狀。療效確切，給藥劑量容易控制，特別適合兒科使用，為了控制該制劑質量，保證臨床用藥安全有效，故選擇該制劑中的主要成分布洛芬作為指標成分，進行含量分析研究。本文建立了小兒布洛芬口服溶液中布洛芬含量測定的方法。結果表明，該法專屬性強，干擾小，并具有較好的重復性，可用于小兒布洛芬口服溶液的質量控制。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

UVIKON-XL紫外-可見分光光度計；日本島津LC-10A液相色譜儀（LC-10ATvp泵，SPD-10Avp紫外-可見檢測器，CTO-10ASvp柱溫箱，Chromato-Solution Light色譜工作站）；BP211D電子天平。

1.2 試藥

布洛芬對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：0179-9702）；小兒布洛芬口服溶液（長葛市人民醫院制劑室）；缺布洛芬的陰性樣品（長葛市人民醫院制劑室）；乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：CenturySIL ODS2（4.6 mm×200 mm，5 μm）；流動相：醋酸鈉緩沖液（取醋酸鈉6.13 g，加水750 ml，振搖使溶解，用冰醋酸調節 pH 值至 2.5）-乙腈（40∶60）；體積流量：1.0ml/min；柱溫：30℃；檢測波長：265 nm；進樣量：20 μl。 理論板數按布洛芬峰計算應不低于2 500。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取經五氧化二磷干燥器內減壓干燥至恒重的布洛芬對照品25 mg，置50 ml量瓶中，加甲醇適量，超聲10 min，使布洛芬溶解，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3 供試品溶液的制備

精密量取本品3 ml，置100 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為布洛芬測定的供試品溶液。

2.4 陰性樣品溶液的制備

取缺少布洛芬的陰性樣品，按“2.3”項下方法制備陰性樣品溶液，即得。

2.5 干擾試驗

精密吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性樣品溶液，各20 μl，進樣分析，記錄色譜圖。在小兒布洛芬供試品溶液色譜圖中，與對照品色譜圖相應位置上，確認了布洛芬吸收峰（tR=8.18 min），而陰性樣品色譜圖無干擾，見圖1。

2.6 線性關系考察

精密稱取布洛芬對照品約100 mg，置50 ml量瓶中,加甲醇適量，超聲10 min，使布洛芬溶解，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。 精密量取該溶液 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0 ml分別置于10 ml量瓶中，各加甲醇稀釋至刻度，搖勻。進樣20 μl，記錄色譜圖。以峰面積（Y）為縱坐標，濃度（X）為橫坐標繪制標準曲線，得回歸方程：Y=3.586 5×104X+2.395 3×102（r=0.999 9）。結果表明，布洛芬濃度在0.2～1.4 mg/ml范圍內線性關系良好。

2.7 穩定性試驗

取樣品溶液按“2.3”制成供試品溶液，室溫放置，于0、2、4、6、8、10、12 h進樣測定，計算供試品中布洛芬峰面積值的RSD為0.35%。結果表明，供試品溶液在12 h內穩定性良好。

2.8 精密度試驗

精密吸取“2.2”對照品溶液 20 μl，重復進樣 6 次，記錄色譜圖，計算布洛芬峰面積值的RSD為0.41%，結果表明該法精密度良好。

2.9 重復性試驗

取樣品溶液，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，進行測定，記錄色譜峰，計算供試品中布洛芬含量的RSD為0.92%。結果表明該法重復性良好。

2.10 回收率試驗

精密量取已知含量的樣品（批號：20090615）溶液 5、3、2 ml，分別精密加入布洛芬對照品溶液（0.5 mg/ml）5 ml，按供試品溶液制備方法制備成高、中、低3種質量濃度溶液，各3份，進樣測定，計算回收率，結果布洛芬平均回收率為98.1%，RSD 為 1.2%（n=9），見表1。

表1 回收率試驗結果（n=9）Tab.1 Results of recovery test(n=9)

2.11 樣品含量測定

精密量取樣品溶液3 ml，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，進樣分析，每個樣品測定3次，另取“2.2”項下布洛芬對照溶液，進樣分析，根據回歸方程計算布洛芬的含量，結果見表2。

表2 樣品含量測定結果（%，n=3）Tab.2 Content determination results of samples(%,n=3)

3 討論

本試驗建立了HPLC法測定小兒布洛芬口服溶液中布洛芬含量的方法，將布洛芬對照溶液在220～320 nm的波長范圍內掃描，在265 nm與273 nm波長處有最大吸收，在245 nm與271 nm波長處有最小吸收，在259 nm的波長處有肩峰，與《中國藥典》2005年版二部描述一致，故選用265 nm為測定波長。按處方比例和工藝，制成不含布洛芬的陰性供試品進行測定，在與樣品相同保留時間處未出現色譜峰，對測定無干擾；本法曾采用幾種流動相試驗，但以醋酸鈉緩沖液（取醋酸鈉6.13 g，加水750 ml，振搖使溶解，用冰醋酸調節pH值至2.5）-乙腈（40∶60）為流動相的分離效果和出峰時間最為理想，故選此為流動相。結果表明，本法具有回收率好，精密度高，重復性好，分析快速準確，無任何干擾的優點，可用于小兒布洛芬口服溶液制劑的質量控制。

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