應用HPLC法測定苯芐乙草胺混配除草劑中的有效成分

2010-09-04 03:00:52金晨鐘王義成劉桂英陳躍進王朝輝曾永賢屈雙婷

湖南農業科學 2010年23期

金晨鐘，王義成，劉桂英，陳躍進，王朝輝，曾永賢，謝晶，屈雙婷

（湖南人文科技學院，湖南婁底 417000）

40%苯芐乙草胺WP由苯噻酰草胺、芐嘧磺隆和乙草胺3種原藥按科學配比加工而成，是一種新型復配稻田除草劑，并能同時適用于我國北至東北三省、南到海南省等各種生態條件的水稻拋秧田、移栽田除草，可有效防除水田禾本科、闊葉類及莎草科雜草,綜合防效達95%左右，對作物則很安全[1－2]。該除草劑配比和應用范圍均為國內首創,其分析方法也少見報道。筆者采用外標法，在同一色譜條件下完成苯噻酰草胺、芐嘧磺隆和乙草胺3個有效成分的含量測定,并對其線性關系、精密度、添加回收率試驗進行測定，獲得了比較滿意的結果。

1 供試材料

1.1 試劑

所用試劑為乙腈和甲醇（色譜純）、二次蒸餾水、冰醋酸（AR）等。苯噻酰草胺、芐嘧磺隆和乙草胺標準品的含量大于98%。

1.2 儀器

所用儀器為LC-10APlus液相色譜儀（具可調波長紫外分光檢測器），帶色譜工作站。

1.3 色譜操作條件

色譜柱，C18（5μm），250 mm×4.6 mm（id）不銹鋼柱；流動相，甲醇∶水=70∶30（V/V，下同）；水用冰醋酸調 pH=3；檢測波長，230 nm；流速，1.0 mL/min；進樣體積，20 μL；柱溫30℃。

在此操作條件下，典型色譜圖如圖1。

1.4 測定步驟

圖1 典型色譜圖

1.4.1 標準溶液的配制分別稱取芐嘧磺隆、乙草胺、苯噻酰草胺標樣各約50 mg（精確至0.1 mg）于3個100 mL容量瓶中，用乙腈溶解，定容。用移液管準確移入上述芐嘧磺隆、乙草胺標準溶液各1 mL和苯噻酰草胺標準溶液10 mL于100 mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻后，將混合標準溶液用0.45μm濾膜過濾備用。

1.4.2 試樣溶液配制稱取混勻后的試樣200 mg（精確至0.1 mg）于100 mL容量瓶中，用少量乙腈溶解，并用流動相稀釋至刻度，搖勻離心后用0.45 μm濾膜過濾后備用。

1.4.3 測定在上述色譜條件下，待儀器穩定后，連續注入數針標準溶液，待相鄰兩針響應值變化小于1.0%，按標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進樣檢測，用兩次重復所得面積計算結果。

1.5 計算方法

試樣中苯噻酰草胺(芐嘧磺隆或乙草胺)含量X（%）按式（1）計算：

式中：A1——標準溶液中苯噻酰草胺（或芐嘧磺隆、乙草胺）峰面積；A2——試樣溶液中苯噻酰草胺（或芐嘧磺隆、乙草胺）峰面積；m1——標樣溶液中苯噻酰草胺（或芐嘧磺隆、乙草胺）的質量；m2——試樣的質量；P——標樣中苯噻酰草胺（或芐嘧磺隆、乙草胺）的純度（%）。

2 結果與分析

2.1 流動相及波長的選擇

經過大量反復的試驗確定甲醇∶水=70∶30為流動相。其中水用冰醋酸調至pH=3，檢測結果峰形對稱，分離好。王德海等方法表明[3-5]，苯噻酰草胺的最大吸收在218 nm處，芐嘧磺隆的最大吸收在234 nm處，乙草胺多采用氣譜法分析，綜合樣品中3個有效成分的含量，波長選定為230 nm。此時，乙草胺、芐嘧磺隆和苯噻酰草胺均有較大吸收。

2.2 線性范圍

將苯噻酰草胺配制成 0.25、0.50、0.75、1.00、1.25 mg/mL的混合標準溶液系列，將芐嘧磺隆和乙草胺配成 0.025、0.050、0.075、0.100、0.125 mg/mL的混合標準溶液系列，在上述操作條件下進樣檢測，以溶液濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，分別測得線性關系曲線圖（圖2，圖3，圖4）?；貧w方程分別為 Y芐=41.329 x-0.031（R2=0.999 8），Y乙=21.083 x-0.016 6（R2=0.999 3），Y苯噻=4.891 2 x-1.670 3（R2=0.999 6）。