五仁醇的研究進展

劉大偉，吳琳華，邵兵，徐小濱

(1.黑龍江省衛生學校，黑龍江 哈爾濱 150036;2.哈爾濱醫科大學附屬第二醫院，黑龍江 哈爾濱 150086;3.黑龍江中醫藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040)

中藥五味子(Fructus schisandrae chinensis)是木蘭科植物五味子［Schisandr chinensis(Turcz)Baill］的干燥成熟果實。其應用已有2000多年的歷史，不但在我國，就是在世界上許多其他國家也應用廣泛。《神農本草經》中，五味子被列為上品，味酸甘、性溫，歸肺、心、腎三經，有斂肺、滋腎、生津、收汗、生澀之功效。自從20世紀70年代研究發現五味子對慢性肝炎病人有很好的治療作用后，更引起了人們的濃厚興趣，促使醫療界和化學界對五味子的藥理作用和化學成分進行了比較深入的研究［1］。

五仁醇為五味子核仁的提取物，主要用于降低谷丙轉氨酶(SGPT)，治療急慢性肝炎。筆者從五仁醇的活性成分及藥理作用、質量控制、劑型研究等幾方面進行綜述。

1 活性成分及藥理作用

自上世紀70年代初期以來，許多臨床報告表明，五味子可以降低慢性肝病患者的SGPT，并且認為木脂素是在藥理和臨床研究階段降低非正常SGPT水平的活性物質，例如五味子甲素和五味子乙素等［2］。包氏［3］等也證明降低谷丙轉氨酶SGPT的有效成份，主要存在于五味子的醇溶部分即五仁醇中，并成功分離出7種單體成分，其強度順序為:五味子酯乙>丙素>乙素>甲素≥酯甲≥醇甲。劉氏［4］研究發現，五仁醇和醇乙的抗撲熱息痛肝臟毒性作用可能是對肝微粒體細胞色素P－450的誘導作用，能調整肝微粒體對撲熱息痛代謝的途徑，減少毒性代謝產物的生成量。劉氏［5］發現聯苯環辛烯類木脂素對肝臟有保肝、誘導藥酶增加解毒功能、抗氧化、促進蛋白生物合成和糖原生物等作用。除了上述的五仁醇關于肝保護藥理作用的研究，近年來關于木脂素的藥理作用研究深入而廣泛，還涉及心血管系統、中樞神經系統、生殖系統以及抗衰老、抗氧化等各個方面。

2 含量測定方法

臨床所用中藥五味子及其制劑品種較多，所測木脂素指標成分也不盡相同，主要有五味子甲素、乙素、醇甲和酯甲等。因此，有關木脂素分析方法研究報道較多。目前，常用的方法有分光光度法、薄層色譜掃描法(TLCS)、高效液相色譜法 (HPLC)、氣相色譜質譜聯用(GC－MS)及毛細管電色譜法(CEC)等，已經有相關綜述對此進行報道［6］。但這些方法多只對一種木脂素類化合物進行測定，這主要是由于木脂素類化合物結構相似，不易分離，即使有許多高效液相色譜相(HPLC)方法同時測定了幾種木脂素成分，但都存在保留時間過長，或檢測線不足以針對體內生物樣品分析等缺陷。因此，近年來出現許多關于采用液相色譜質譜聯用(LC－MS)方法測定五味子木脂素的方法的報道。由于液質聯用方法的準確、靈敏、快速、特異等優點而備受關注，本文將重點對液質聯用方法測定木脂素類成分進行綜述。有研究者用液質聯用儀 (RP－HPLC－DAD－ESI－MS)法對五味子的甲醇提取部分中的木脂素成分進行具體的分析，共檢測出16種木脂素類化合物，包括五味子醇甲、五味子乙素(schisandrin B)以及它的同分異構體(γ－schizandrin)、五味子甲素、五味子醇乙、五味子酯甲等，分別對這些木脂素類化合物在質譜條件下的電離方式的以及碎片離子結構進行了詳細的闡述，為深入的使用液質聯用的方法研究木脂素類化合物奠定了基礎［7］。Halstead［8］等人采用液質聯用LC－MS/MS的方法測定了五味子原料藥和市售的五味子提取物中4種木脂素的含量，分別是五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素、五味子醇乙。分析條件為:流動相采用的是0.1%的磷酸與乙腈混合流動相梯度洗脫;流速:0.2mL·min－1;進樣量:10μL;柱溫:35℃;毛細管電壓:70V;離子源:電噴霧電離源(ESI);脫溶劑氣溫度:350℃;檢測方式:正離子方式。該方法準確度高，精密度好，成功的實現了同時對4種木脂素的準確測定，簡便快捷。徐氏［9］等人用液質聯用(RP－HPLC－DAD－ESI－MS)的方法對五味子醇甲的藥代動力學進行了研究，采用的是10mol·L－1的醋酸鹽與乙腈的混合流動相梯度洗脫;流速:0.2mL·min－1;聯苯雙酯作為內標;電噴霧電離源(ESI);選擇性離子檢測方式。鄧氏［10］等人用液質聯用的方法對五味子甲素在大鼠體內藥代動力學行為進行了研究。流動相為甲醇:水 =84:16;流速:0.8mL·min－1;進樣量:10μL;離子源:大氣壓化學電離源(APCI)。陳氏［11］等人用液質聯用的方法(LC/MS/MS)快速測定了大鼠血漿中五味子乙素的血藥濃度并對其藥代動力學進行了分析，流動相為乙腈:甲醇:醋酸銨(pH 5.1，10mM)=47:33:20;柱溫:40℃;流速:0.2mL·min－1;進樣量:5μL;離子源:電噴霧電離源(ESI);源溫度:400℃;碰撞電壓:5.5kV。液質聯用方法可以用于五味子制劑的分離，鑒定，以及定量分析，尤其是其高靈敏度、選擇性、快速、以及檢測線較低，節約樣品量尤其適合對五味子多種成分藥動學的分析。

3 劑型研究

近年來關于五仁醇劑型研究的報道較少，目前上市的劑型主要是五仁醇膠囊、五仁醇軟膠囊、降酶靈膠囊、復方益肝靈片、復方五仁醇膠囊等。但是由于木脂素類成分為難溶性成分，體外溶出度較差，導致體內生物利用度較低。因此，趙氏［12］等人將五仁醇制備成固體分散體，采用直接將載體材料溶于五仁醇提取液，然后除去溶劑的方法制備了多種五仁醇固體分散體。以五味子甲素為指標成分，研究并比較了它們的表觀溶解度和體外溶出度，結果顯示，配比為1∶3的五仁醇－聚乙烯吡咯烷酮K30固體分散體中有效成分的表觀溶解度比五仁醇膠囊內容物顯著提高，達到5.06μg·mL－1，溶出介質 (水)中分散(包括溶解)的小于0.22μm的藥物高達43.2%，明顯的提高了有效成分的表觀溶解度和溶出度。黃氏［13］等人采用改良乳化－溶劑擴散法制備五味子總木脂素腸溶納米粒，以提高五味子總木脂素口服生物利用度，增強臨床療效。結果顯示，制得的納米粒在透射電鏡下均呈圓球形，大小均一，五味子甲素和酯甲的包封率均在90%以上，并在pH 7.2含0.5%吐溫－80的20%乙醇溶液中釋放達到70%以上，體外釋藥良好，能達到良好的腸溶效果。

4 五仁醇的開發展望

4.1 臨床應用的近一步擴展

雖然關于五味子的活性成分的藥理作用的相關研究很多，涉及很多方面，但是目前臨床上五仁醇制劑主要是用來治療急慢性肝炎，其它的藥理作用并沒有得到很好的臨床應用。而且臨床使用與研究的劑型比較單一，劑型存在缺陷，應開發出更多更好的現代化給藥系統促進五仁醇制劑的口服吸收，促進該藥物的臨床應用，提高療效。

4.2 藥物相互作用的進一步研究

五味子在中藥制劑中的應用非常廣泛，也是在許多中藥方劑中經常使用的藥材，并且五仁醇也經常出現在復方制劑中。但由于中藥成分自身的化學成份有很多，在使用過程中不僅自身的成分存在一定的相互作用，與其他成分合用時也存在一定的相互作用。已有文獻報道指出五味子的主要有效成分雖為難溶性木脂素類成分，但在一些中藥方劑的煎煮過程中其它成分可以促進其中木脂素類成分的溶出［14］，并且木脂素類成分的單體與其在制劑中吸收、分布、代謝、消除都存在著差異［15，16］，但是其產生的原因還不明確有待于更進一步的研究與探討。

［1］劉攸紅，王佛華.五味子的藥理［J］.河北中醫藥學報，1999，14(2):35－37.

［2］趙靜峰，李良，沈報春，等.五味子化學成分研究(Ⅰ)［J］.云南大學學報(自然科學版)，1999，21(4):314－316.

［3］包天桐，徐桂芳，劉耕陶，等.五味子仁七種成分的一些藥理作用比較［J］.藥學學報，1979，14(1):1.

［4］劉耕陶，魏懷玲.五味子對撲熱息痛肝臟毒性的保護作用［J］.藥學學報，1987，22(9):650.

［5］劉星.天然保肝藥研究進展［J］.天然產物研究與開發，1991，3(1):81.

［6］仰榴青，吳向陽，徐佐旗，等.五味子及其制劑中木脂素類成分含量測定的研究進展［J］.中國中藥雜志，2005，30(9):650－652.

［7］Huang X，Song F R，Liu Z Q，et al.Studies on lignan constituents from Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.fruits using high－performance liquid chromatography/electrospray ionization multiple－stage tandem mass spectrometry［J］.J Mass Spectrom，2007(42):1148－1161.

［8］Halstead C W，Lee S，Khoo C S，et al.Validation of a method for the simultaneous determination of four Schisandra lignans in the raw herb and commercial dried aqueous extracts of Schisandra chinensis(Wu-WeiZi)by RP－ LC with DAD［J］.J Pharm Biomed Anal，2007(45):30－37.

［9］Xu，M.J.Wang，G.J.Xie，H.T.et al.Determination of schizandrin in rat plasma by high－performance liquid chromatography－mass spectrometry and its application in rat pharmacokinetic studies［J］.Journal of Chromatography B，2005(828):55－61.

［10］Deng，X.X.Chen，X.H.Yin，R.Shen，et al.Determinatio－ n of deoxyschizandrin in rat plasma by LC－CM［J］.Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis，2008，(46):121－126.

［11］陳瑋瑩，李慧，羅文鴻，等.LC－MS法快速測定大鼠血漿五味子乙素及其藥代動力學分析［J］.中國現代醫學雜志，2007，17(14):1665－1673.

［12］趙鐵，邱明豐，張永煜，等.五仁醇固體分散體的制備及體外溶出度研究［J］.中草藥，2005，36(7):998－1002.

［13］黃雅潔，王琪，李仙義，等.五味子總木脂素腸溶納米粒體外釋藥研究［J］.中成藥，2008，30(1):50－53.

［14］Xu，M.J.Wang，G.J.Xie，H.T.et al.Pharmacokinetic comparisons of schizandrin after oral administration of Schizandrin monomer，Fructus Schisandrae aqueous extract and Sheng－ Mai－ San to rats［J］.Journal of Ethnopharmacology，2008(115):483－488.

［15］王勝春，皇甫孟軍，趙輝平，等.五靈膠囊中五味子乙素在小鼠體內藥代動力學研究［J］.時珍國醫國藥，2004，15(8):468－470.

［16］裴彬，蔡雄，繆曉輝，等.五味子甲素對大鼠肝細胞色素P4503A影響的研究［J］.肝臟，2006，11(4):261.