HPLC法測定多西他賽注射液中多西他賽的含量

鄧衛青 婁素琴 孫利偉

河南省新鄉市中心醫院（453000）

多西他賽（docetaxel）其化學結構為氧雜丁環酯，由結構可知其對堿和熱均不穩定。多西他賽為紫杉醇類抗腫瘤藥，通過干擾細胞有絲分裂和分裂間期細胞功能所必需的微管網絡而起抗腫瘤作用。由從紅豆杉的樹皮或針葉中提取的紫杉醇半合成得到，其體外抗癌活性可達紫杉醇的10倍[1]，適用于先期化療失敗的晚期或轉移性乳腺癌及使用以順鉑為主的化療失敗的晚期或轉移性非小細胞肺癌等，臨床較為常用。其價格相對較貴，為臨床用藥安全和合理用藥，本研究建立了HPLC法測定注射用多西他賽的含量，從而對其質量進行監督，方法可靠，結果準確。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

日本島津LC-2010A高效液相色譜儀；島津SPD檢測器；METTLER TOLEDO AG135十萬分之一電子天平。

1.2 試藥

多西他賽（多帕菲），生產廠家：齊魯制藥有限公司，批號：809020EW，規格：1mL：20mg，多西他賽對照品購自中國藥品生物制品檢定所，水為重蒸餾水，甲醇、乙醇為分析醇，乙腈為色譜醇。

2 多西他賽的含量測定

2.1 色譜條件

C18Diamond（150mm×4.6mm）柱；檢測波長230nm；流速1.0mL/min；柱溫25℃；流動相乙靖：水（v/v＝3：2）；進樣量10μL。

2.2 標準曲線繪制

精密稱取干燥至恒重的多西他賽對照品2.00mg，置10mL容量瓶中，加流動相至刻度，搖勻。分別進樣5、10、20、30、50μL。以峰面積為橫坐標，進樣量（μg）為縱坐標，得回歸方程Y＝0.020547＋4.05424×10-6X（r＝0.9999）。結果表明多西他賽的進樣量在1～8μg與峰面積呈良好的線性關系。

2.3 供試品溶液的制備

精密量取多西他賽樣品100μL，置10mL容量瓶中，加流動相至刻度，搖勻。經0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液2ml，進樣10μL，測得峰面積，計算多西他賽含量。多西他賽含量為標示量的97.4%。

2.4 精密度

吸取多西他賽對照品液10μL進樣，連續5次，測量峰面積，RSD=0.9%。

2.5 穩定性試驗

取同一供試品溶液，分別于0、1、2、4、6、8h進樣測定，計算得尺RSD=1.32%，供試品溶液在8h內穩定。

2.6 加樣回收率

取“2.3”項下處理的多西他賽樣品6份，分別加入多西他賽對照品液1mL，計算得平均回收率99.0%，見表1。

3 結 果

3.1 多西他賽保留時間7.7min左右，多西他賽標準品高效液相色譜圖，見圖1。

3.2 多西他賽樣品色譜圖，見圖1。

4 討 論

筆者考察了不同比例的甲醇-水、乙腈-水系統作為流動相時色譜峰的狀況，結果顯示乙腈-水系統下，峰形較好，理論塔板數較高，流動相乙靖∶水（v/v＝3∶2）時達峰時間適當，因此以此為依據確立流動相的選擇。同時，為保證試驗的最大平行性，選擇柱溫25℃，以便每次試驗數據進行更好對比。波長選擇上，多西他賽在190nm、230nm波長處有最大吸收，紫外吸收圖見圖2，為避免溶劑的末端吸收，因此檢測波長選為230nm。通過本實驗的研究，建立了多西他賽注射液質量控制的新方法，保證了臨床用藥安全。

表1 加樣回收率表

圖1 HPLC色譜圖

圖2 多西他賽紫外-可見光全波長吸收圖

[1]元英進,葛志強,馮霞.抗癌新藥紫杉醇和多烯紫杉醇[M].北京:化學工業出版社,2002.