紅景天靈芝膠囊增強免疫力及抗輻射功能研究

李金花，于文斌，趙麗茹，孟青青，白中文，秦玲（吉林省生物研究所，吉林長春130012）

紅景天靈芝膠囊增強免疫力及抗輻射功能研究

李金花，于文斌，趙麗茹，孟青青，白中文，秦玲
（吉林省生物研究所，吉林長春130012）

目的通過增強免疫功能及抗輻射功能實驗，研究紅景天靈芝膠囊的免疫功能及抗輻射功效。方法分別按增強免疫力實驗方法和抗輻射實驗方法進行。結果樣品對小鼠DTH的影響在劑量組與對照組間比較（P＜0.05或P＜0.01），對抗體生成細胞數的影響在高劑量組與對照組間比較（P＜0.05），對半數溶血值在高劑量組與對照組間比較（P＜0.05），碳廓清功能在高劑量組與對照組間比較（P＜0.05）；樣品能顯著增加輻射后小鼠外周血白細胞數量（P＜0.05或P＜0.01），并降低小鼠的骨髓細胞微核率（P＜0.05或P＜0.01）。結論紅景天靈芝膠囊具有增強免疫力及抗輻射的雙重功效。

紅景天靈芝膠囊；免疫功能；抗輻射；小鼠

紅景天具有益氣活血、通脈平喘的功效，主治氣虛血瘀、胸痹心痛、腦卒中偏癱、倦怠氣喘等。現代藥理研究表明，紅景天及其提取物具有提高免疫力、抗輻射、抗缺氧、抗疲勞、抗衰老、抗抑郁癥的作用［1］，其主要成分為紅景天苷［2］。靈芝具有補氣安神、止咳平喘的功效，主治眩暈不眠、心悸氣短、虛勞咳喘等。現代藥理研究表明，靈芝及其提取物具有免疫調節、抗輻射、抗衰老、抗腫瘤以及護肝解毒作用［3］，其主要成分為多糖類物質［4］。以下實驗分別從增強免疫力功能、抗輻射功能兩方面進行。

1 實驗材料

1.1 樣品紅景天靈芝膠囊，由長春茸源真菌技術開發公司提供。

1.2 實驗動物增強免疫力實驗小鼠：由吉林大學基礎醫學院動物實驗中心提供，ICR雄性，體質量18～22 g；抗輻射實驗小鼠：昆明種小鼠，雌性，體質量18～22 g，由軍事醫學科學院實驗動物中心提供。

2 增強免疫力功能實驗方法與結果

2.1 實驗方法選健康小鼠，每個檢測指標設小鼠48只，分為4組，每組12只。設低、中、高3個劑量組和1個陰性對照組。劑量組動物采用成人推薦攝入量的1，10，30倍，即0.013 3，0.133，0.4 g／kg BW，以蒸餾水作陰性對照，各小組灌胃量均為0.2 mL／10 g BW，連續灌胃30 d后測各項免疫指標。

2.1.1 遲發型變態反應（DTH）采用足跖增厚法。

2.1.2 抗體生成細胞檢測采用Jerne改良玻片法。

2.1.3 半數溶血值（HC50）的測定取羊血，生理鹽水洗滌3次，每次離心（2 000 r／min）10 min，每只鼠經腹腔注射2%壓積SRBC 0.2mL進行免疫。4 d后，摘除眼球取血于離心管內，放置約1 h，將凝固血與管壁剝離，使血清充分分析出，2 000 r／min離心10 min，收集血清。用SA緩沖液將血清稀釋。將稀釋后的血清1 mL置試管內，依次加入10%（V／V）SRBC 0.5 mL，補體1 mL。另設不加血清的對照管（以SA緩沖液代替）。置37℃恒溫水浴中保溫25min后，冰浴終止反應。2 000 r／min離心10 min，取上清1 mL，加都氏試劑3mL。同時取10%（V／V）SRBC 0.25mL，加都氏試劑至4 mL，充分混勻，放置10 min后，于540 nm處以對照管作空白，分別測各管光密度值。溶血素的量以半數溶血值（HC50）表示。

2.1.4 小鼠碳廓清實驗小鼠尾靜脈注射1∶4倍稀釋的印度墨汁后立即計時，于2，10 min，分別從內眥靜脈叢取血20μL立刻加到2 mL 0.1%Na2CO3溶液中，以Na2CO3溶液作陰性對照，722分光光度計于600 nm波長處測OD值。取小鼠肝臟和脾臟，用濾紙吸干臟器表面污血，分別稱重，計算吞噬指數。

2.2 實驗結果

2.2.1 對小鼠體質量和DTH的影響見表1。

2.2.2 對小鼠抗體生成細胞數及小鼠HC50的影響見表2。

2.2.3 對小鼠單核-巨噬細胞碳廓清功能的影響見表3。

表1 對小鼠體質量和DTH的影響±s，n＝12）

表1 對小鼠體質量和DTH的影響±s，n＝12）

注：與陰性對照組比較，＃P＜0.05，＃＃P＜0.01。

組別始重／g終重／g增重足跖腫脹度／mm陰性對照組19.3±1.0 36.4±1.1 17.0±1.3 0.47±0.08低劑量組19.3±1.0 36.5±1.5 17.3±1.9 0.49±0.07中劑量組19.6±0.8 36.7±1.4 17.1±1.3 0.55±0.09＃高劑量組19.6±1.0 36.5±1.4 16.9±1.4 0.57±0.09＃＃

表2對小鼠抗體生成細胞數及小鼠HC50的影響（±s，n＝12）

注：與陰性對照組比較，＃P＜0.05。

表3 對小鼠單核-巨噬細胞碳廓清功能的影響±s）

表3 對小鼠單核-巨噬細胞碳廓清功能的影響±s）

注：與陰性對照組比較，＃P＜0.05。

組別n吞噬指數／a陰性對照組12 6.58±0.34低劑量組12 6.65±0.38中劑量組12 6.72±0.58高劑量組12 6.96±0.45＃

3 抗輻射功能實驗方法與結果

3.1 實驗方法選健康小鼠80只分兩批，一批做外周血白細胞計數實驗，另一批做小鼠骨髓細胞微核試驗和骨髓細胞DNA實驗。每批4組，每組10只，設低、中、高3個劑量組和1個輻射模型對照組。劑量組動物取成人推薦攝入量的1，10，30倍，即0.013 3，0.133，0.4 g／kg BW，各組均按0.1 mL／10 g BW劑量經口灌胃。

3.1.1 外周血細胞計數實驗各劑量組經口灌胃40 d，輻射模型對照組每天以同樣方式給予同體積的去離子水。在實驗的第27天各組小鼠均以5 Gy Co60-γ射線全身照射1次。于照射前、照射后第3，14天取尾血測定WBC，分別比較照射前各組WBC總數、照射后第3天輻射模型對照組自身WBC總數、各時間點各劑量組與輻射模型對照組WBC總數的變化。各組均在實驗前、照射前、照射后3 d和照射后14 d稱重。

3.1.2 小鼠骨髓細胞微核實驗和骨髓細胞DNA實驗各劑量組均按0.1 mL／10 g BW經口灌胃，1次／d，連續30 d，輻射模型對照組每天以同樣方式給予同體積的去離子水。在實驗的第27天各組小鼠均以5 Gy Co60-γ射線全身照射1次。于照射后第3天，頸椎脫臼處死動物，常規取胸骨制片、固定、染色，油鏡下對每只動物觀察1 000個嗜多染紅細胞，計算含微核細胞數及微核細胞率。剝離出股骨，取1 mL Hank's液，沖出股骨中的全部骨髓細胞，混勻后用酶聯免疫光譜分析儀Plus 384 260 nm處測定骨髓細胞DNA含量。各組在初始、照射前、照射后3 d稱重。

3.2 實驗結果

3.2.1 對小鼠外周血WBC計數的影響見表4。

表4 對小鼠外周血WBC計數的影響±s，n＝10）

表4 對小鼠外周血WBC計數的影響±s，n＝10）

注：與輻射模型對照組比較，＃P＜0.05；＃＃P＜0.01。

白細胞總數／（×109／L）14 d輻射模型對照組—8.15±2.90 1.53±0.32 2.03±0.36低劑量組13.3 7.86±2.63 1.65±0.42 2.14±0.43中劑量組133.0 7.80±2.40 1.87±0.28＃2.42±0.35＃高劑量組400.0 7.80±2.35 2.01±0.30＃＃2.51±0.34組別劑量／（mg／kg BW）照射前照射3 d照射＃＃

3.2.2 對小鼠骨髓細胞微核及骨髓有核細胞DNA含量的影響見表5。

注：與輻射模型對照組比較，＃P＜0.05；＃＃P＜0.01。

4 討論

經口給予小鼠不同劑量的樣品能提高小鼠的半數溶血值，小鼠抗體生成細胞數，增強小鼠的遲發型變態反應，提高小鼠單核-巨噬細胞的碳廓清能力，表明紅景天靈芝膠囊具有增強免疫力之功能；抗輻射實驗結果顯示：樣品能夠顯著增加輻射后小鼠外周血白細胞數量，并抑制小鼠的骨髓細胞微核率，表明紅景天靈芝膠囊對輻射危害具有輔助保護功能。

［1］袁瑜.紅景天活性成分及藥理作用［J］.食品與藥品，2007，9（5）：55-57.

［2］張新勝.紅景天苷對骨髓抑制貧血小鼠骨髓細胞周期和凋亡相關蛋白表達的影響［J］.四川大學學報：醫學版，2005，36（6）：821-823.

［3］袁帶秀.靈芝活性成分、藥理作用及其應用［J］.中國民族民間醫藥雜志，2006（2）：110-112.

［4］吳京燕.靈芝多糖合劑抗輻射保健功能的研究［J］.南京師大學報：自然科學版，2003，26（3）：80.

R285.5

A

1007－4813（2010）06－0817－02

2010－09－27）

吉林省科技發展計劃項目（20050215-3）

李金花（1973－），女，大學本科，助理研究員。研究方向：藥用真菌及保健食品的開發研究。